DNAH5基因新发移码变异所致1例原发性纤毛不动综合征患者的临床特征及遗传学分析

目的:探讨1例原发性纤毛不动综合征(PCD)患者的临床特征和遗传学特点。方法:选取2020年7月于山东省临沂市人民医院生殖医学科门诊就诊的1例PCD患者为研究对象,收集患者的临床资料,应用全外显子组测序(WES)对患者进行基因检测,应用Sanger测序对候选变异进行验证。采用SWISS-MODEL进行预测变异基因的蛋白结构。结果:先证者存在慢性鼻炎、支气管扩张、内脏转位及男性不育的临床表型。先证者行WES检测显示DNAH5基因第74外显子存在c.12890dup(p.N4297Kfs*13)纯合移码变异,导致多肽链合成提前终止,对基因功能造成影响。SWISS-MODEL预测示突变后蛋白缺失了一部分氨基酸残基,导致蛋白3D构象发生变化。该变异在ClinVar、gnomAD及OMIM数据库中均未见收录。参照美国医学遗传学与基因组学学会相关指南,判定此变异为致病性变异(PVS1+PM2_P+PM3_P)。结论:DNAH5基因c.12890dup(p.N4297Kfs*13)纯合移码变异可能是导致该患者临床表型的原因,上述发现丰富了DNAH5基因的变异谱。

WEE2基因突变与受精失败关系的研究进展

卵子和精子相互融合形成受精卵的过程称为受精,其标志是卵子排出第二极体,随后形成的雌原核和雄原核相互交融。人类胚胎发育及繁衍是否正常进行取决于受精是否正常完成。受精障碍及无原核形成是辅助生殖治疗反复失败的主要原因之一。其发病机制可从基因水平进行阐述,近年来,WEE2基因的变异和受精失败之间的关系备受关注。本文就WEE2基因突变与受精失败的关系进行综述。

妇科恶性肿瘤腔内放疗进展

腔内后装治疗是妇科恶性肿瘤特别是中晚期宫颈癌和子宫内膜癌的重要治疗手段。文章就近年来妇科肿瘤腔内治疗中的中子后装及间断剂量率后装的现状及进展作一综述。

血清CYFRA21-1、CEA联合检测在诊断复发性子宫颈鳞癌中的价值

目的探讨CYFRA 21-1、CEA在辅助诊断子宫颈鳞癌治疗后复发的临床价值,为复发性子宫颈鳞癌的诊断及预后评估提供有临床价值的肿瘤标志物。方法采用ES300全自动酶免疫分析仪检测51例治疗后临床证实复发或远处转移患者、36例治疗后无瘤生存患者、17例子宫良性肿瘤和31例健康女性血清CYFRA 21-1、CEA水平。结果(1)51例治疗后复发或远处转移患者CYFRA 21-1平均值为(6.18±3.67)μg/L,CEA平均值为(5.09±2.71)μg/L,显著高于治疗后无瘤生存患者、子宫颈良性病变患者及健康人。如确定CYFRA 21-1的界定值为3.3μg/L,其诊断子宫颈癌复发的灵敏度为76.4%(39/51);以CEA 3.4μg/L为界定值,其诊断子宫颈鳞癌复发的灵敏度为52.9%(27/51)。两者联合检测的灵敏度为88.2%(45/51)。(2)复发子宫颈癌患者经综合治疗后,CYFRA 21-1、CEA均有所下降,两者下降的幅度与疗效相关,但与治疗前水平无关。(3)36例治疗后无瘤生存患者CYFRA 21-1高于限定值者5例,假阳性率13.9%(5/36),CEA高于限定值者3例,假阳性率8.3%(3/36);17例子宫颈良性病变测定值CYFRA 21-1高于限定值者2例,假阳性率11.7%(2/17),CEA无高于限定值者;31例健康女性血清中CYFRA 21-1无高于限定值者,CEA高于限定值者1例,假阳性率3.2%(1/31)。结论CYFRA 21-1和CEA的联合检测为复发性子宫颈癌的诊断、疗效评价、随访及预测预后提供了有价值的肿瘤标志物。

外阴恶性肿瘤腹股沟淋巴结清扫术中保留大隐静脉在降低术后并发症中的价值

目的:探讨外阴恶性肿瘤腹股沟淋巴结清扫术中保留大隐静脉主干对降低术后并发症的作用。方法:将1989年1月-2005年12月期间住院并行双侧腹股沟淋巴结清扫术的64例外阴恶性肿瘤患者分为两组,31例行双侧腹股沟淋巴结清扫术时保留双侧大隐静脉主干,33例结扎、切除一段大隐静脉,对两组患者的术后急慢性并发症进行比较。结果:两组患者的手术时间、术中出血量均无显著差别,切口愈合时间、感染率相似,但下肢急慢性水肿、下肢疼痛、下肢软组织炎症发生率、感觉异常等并发症在保留大隐静脉组较切除组均明显降低。结论:外阴恶性肿瘤行腹股沟淋巴结清扫术时保留双侧大隐静脉主干不延长手术时间,不增加手术难度,但能明显降低多种术后并发症的发生率,提高了患者的生活质量。

宫颈癌治疗后未控或复发135例分析

目的:探讨宫颈癌治疗后未控、复发的相关因素。方法:回顾性分析2000年8月至2003年8月山东省肿瘤医院妇瘤科收治的135例治疗后复发或未控的宫颈癌患者的临床病理资料,分析初治时的发病年龄、临床分期、病理类型、肿瘤分化程度、肿瘤生长形态、肿瘤大小以及初治方法和完成情况。结果:发病年龄最小27岁,最大72岁,平均年龄49.9岁,发病年龄≤35y的患者18例(13.1%);Ⅰ期3例(2.2%)、Ⅱ期52例(38.5%)、Ⅲ期80例60.0%;鳞癌104(75.6%)、腺癌26例(19.3%)、特殊类型7例(5.1%);高分化14例(10.4%)、中分化88例(53.6%)、低分化33例(24.4%);糜烂型1l例(0.7%)、菜花型33例(24.4%)、结节型69例(51.1%)、空洞型27例(20%)、颈管型5例(3.7%);肿瘤直径≥4cm患者93例(68.9%);48例患者首选手术治疗,其中外院手术22例、术中有肿瘤残留的10例、术后病理提示具有预后危险因素而未在4周内补充治疗的17例;87例患者放疗为主,其中37例门诊放疗、21例放疗时间超过3个月。结论:宫颈癌治疗后未控、复发的相关因素有临床期别晚、非鳞癌等多种,应争取早期发现、规范治疗来提高疗效。

卵巢恶性肿瘤放射治疗现状及进展

放射治疗是卵巢恶性肿瘤的重要治疗手段,主要用于术后的辅助治疗以及晚期患者的姑息治疗,本文就其应用技术、疗效及副反应进行综述。

RNAi靶向沉默FLIP基因促进TRAIL诱导卵巢癌A2780细胞凋亡

目的探讨RNAi靶向沉默FLIP基因对TRAIL诱导卵巢癌细胞凋亡的影响。方法设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA,在脂质体(LipofectamineTM2000)介导下转染人卵巢癌细胞株A2780。采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIP-siRNAs转染前后A2780细胞FLIPmRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测FLIP-siRNA转染前后TRAIL对A2780细胞生长抑制作用的变化。以Annexin-V-PI双染法流式细胞术(FCM)比较FLIP-siRNA转染前后TRAIL诱导的细胞凋亡的情况。结果特异性FLIP-siRNA片段能有效降低A2780细胞中FLIPmRNA和蛋白水平(P<0.01),并具有时间依赖性;转染FLIP-siRNA后,TRAIL对A2780细胞的生长抑制作用明显增强(P<0.05),TRAIL诱导的细胞凋亡也显著增加(P<0.05)。结论靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP表达,并可增加细胞对TRAIL的敏感性。

容受前期与容受期子宫内膜基因表达及代谢物水平差异分析

目的分析容受前期和容受期子宫内膜基因表达及宫颈分泌物中氨基酸和肉碱水平差异,为探讨新的子宫内膜容受性分子标记物提供线索和依据。方法选取2020年1月6号至2022年1月31日就诊于临沂市人民医院生殖医学科的共59例不孕女性患者作为研究对象,收集临床资料。匹配年龄、体质量指数及不孕年限等因素选取准备胚胎移植的不孕女性3对(6名),取内膜组织进行基因转录表达分析。另选经辅助生殖技术妊娠25例为对照组,门诊监测排卵未妊娠女性28例为病例组,采用超声判定内膜容受性状态。前者提取子宫内膜组织进行测序后,进行差异表达基因的GO数据库和KEGG数据库富集分析。后者取对照组和病例组宫颈分泌物,经质谱检测其中氨基酸和肉碱水平。采用秩和检验、t检验及χ^(2)检验进行统计学分析。结果研究对象基本临床资料无明显差异(P>0.05)。基因测序提示上/下调最显著的基因分别是HLA-DRB5和MMP10。GO和KEGG富集差异表达基因较多的生物学过程、分子功能和通路主要有免疫调控、细胞粘附和色氨酸代谢等。分泌物代谢分析发现多种氨基酸和肉碱代谢物水平在二组间差异明显(P<0.05),主要为氨基酸和肉碱水平如丙氨酸、缬氨酸、3-羟基丁酰肉碱(C4OH)+丙二酰肉碱(C3DC)/葵酰肉碱(C10)等。结论容受前期与容受期子宫内膜组织相比,基因转录表达差异显著,可能与子宫内膜容受性状态存在关联。氨基酸和肉碱水平提示差异变化较大指标可能作为标记物预测子宫内膜容受性状态。

介导癌症发病及肿瘤靶向治疗中TLR4的作用

目的:评估TLR4与肿瘤发病的关系,并探讨其在肿瘤治疗中的作用。方法:以"TLR4、肿瘤(tumor)"为关键词,使用PubMed和CNKI数据库对2005-01-2010-12发表的文章进行分别和联合检索。纳入标准:1)TLR4的基本资料介绍;2)TLR4在肿瘤组织中的表达研究;3)TLR4在肿瘤治疗中的作用。根据纳入标准分析43篇文献。结果:TLR4的在胃癌、B细胞淋巴瘤、肝细胞癌、结肠癌、膀胱癌和前列腺癌等多种恶性肿瘤组织及细胞中阳性表达。TLR4是把双刃剑,一方面促进肿瘤的发展,另一方面对某些肿瘤的生长起抑制作用。结论:TLR4及TLR4的寡核苷酸基因多态性与肿瘤发生发展密切相关。TLR4有望成为肿瘤治疗的新靶点。

超分割后装治疗中晚期宫颈癌临床初步观察

目的观察192铱超分割后装治疗中晚期宫颈癌的近期疗效及并发症的发生情况,并列超分割后装与传统后装治疗效果及并发症进行比较。方法观察对象为2003年8月至2004年 1月间接受192铱超分割后装治疗的患者,共87例,其中ⅡB期29例,ⅢB期58例,每周治疗4次, 每次A点剂量1．5 Gy,每周累积剂量6 Gy,A点平均总剂量ⅡB期49．7 Gy,ⅢB期52．5 Gy。同时行10-15 MV-X线全盆体外照射,1．6～2 Gy／次,4次／周,外照射20～30 Gy后,中央挡铅4 cm,使盆腔外照射总量达52 Gy,总疗程8～10周。对照组选择2003年1月至2003年6月接受传统192铱后装治疗的患者89例,其中ⅡB期21例,ⅢB期68例,每周5-7 Gy／次,A点总剂量ⅡB期50．1 Gy,ⅢB期53．5 Gy。体外照射方案同超分割治疗。结果87例超分割后装治疗患者失访21例, 有效随访66例中,治疗结束时肿瘤局部控制率95％,1年生存率98％,2年生存率95％,其中ⅡB 期为100％,ⅢB期92％。放射性膀胱炎发生率8％,放射性直肠炎发生率15％。89例传统后装治疗患者失访29例,有效随访60例,1年生存率97％,2年生存率为95％,其中ⅡB期为100％,ⅢB 期93％。放射性膀胱炎发生率9％,放射性直肠炎发生率15％。结论超分割后装加盆腔外照射治疗Ⅱ、Ⅲ期宫颈癌,近期生存率较高,但与传统后装治疗近期疗效比较差异无显著意义,治疗过程中的局部炎性反应较重,不良反应率较高。

GSTP1和GSTM1基因多态性与卵巢浆液性腺癌患者生存的相关性分析

目的探讨谷胱甘肽孓转移酶P1（glutathione S-transferase Pl，GSTP1）和谷胱甘肽孓转移酶M1（glutathione S-transferaseM1，GSTM1）基因单核苷酸多态性对化疗治疗卵巢浆液性囊腺癌患者生存的影响。方法选取2004—08—31—2012-08—01就诊临沂市人民医院妇科的106例患者，应用紫杉醇联合卡铂（taxol＋carboplatin，TP）方案64例，其他化疗方案（拓扑替康、环磷酰胺、异环磷酰胺或吉西他滨）42例。应用焦磷酸测序法检测GSTP1和GSTM1的单核苷酸基因多态性（GSTP1 Ile105Val，GSTM1缺失型／GSTM1非缺失型）。基因型和总体生存率之间的关联使用Kaplan-Meier生存曲线和Cox比例风险回归模型进行评估。结果总生存率（overallsurvival，OS）比较结果显示，TP组患者总生存率为38．1％，显著高于其他化疗组的23．2％，Plog-rank=0．006。GSTP1（异亮氨酸纯合予，A／A）基因型患者总生存率为34．6％，GSTP1（异亮氨酸杂合子，A／G）总生存率为57．6％，差异无统计学意义，x^2=0．132，Plog-rank=0．716。Cox比例风险回归分析结果显示，GSTP1（A／G）与等住基因（A／A）风险系数比为1．20，95％CI为0．55～2．63，P=0．65。未检测到GSTP1缬氨酸等住基因纯合子载体（G／G）。GSTM1缺失型患者总生存率为29．5％，GSTM1非缺失型患者总生存率为74．9％，差异无统计学意义，x^2=0．015，Plog-rank旧。x^2=0．902。GSTM1基因无缺失型与缺失型Cox比例风险系数比为1．07，95％CI为0．48～2．42，P=0．87。结论不同GSTP1和GSTM1基因型患者化疗后总生存差异无统计学意义，但应用TP方案化疗患者总生存率显著高于其他方案化疗患者。

多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞的基因表达与胚胎发育潜能的相关性

目的:探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的不孕患者卵巢颗粒细胞基因的转录表达差异与早期胚胎发育潜能的相关性。方法:选择3对年龄、体质指数、卵巢储备功能相近,并使用促性腺激素释放激素(gonadotrophin-releasing hormone,GnRH)拮抗剂治疗的PCOS不孕症患者,其中胚胎数少者为病例组(n=3),多者为对照组(n=3)。收集患者的卵巢颗粒细胞并提取总RNA,进行基因转录表达差异的显著性分析及功能富集分析。结果:与对照组相比,病例组76个基因显著上调,110个基因显著下调。与进周期日相比,对照组人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)日的雌二醇(estradiol,E 2)水平显著升高。与对照组相比,病例组KRT7基因表达显著上调,CCNYL2表达显著下调。基因本体条目富集差异表达基因发现,与染色体分离、调控细胞周期、脂肪酸代谢等相关的基因显著富集;调控细胞组装、细胞分化、负向调控细胞周期、负向调控发育、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)的ERK1和ERK2信号通路等相关基因表达显著下调。KEGG分析显示,与固醇激素生物合成相关的基因显著富集。结论:接受GnRH拮抗剂治疗的PCOS不孕患者卵母细胞体外正常受精数及可用胚胎数存在显著差别,可能与卵巢颗粒细胞相关基因的表达差异有关。