乙肝可怕吗?

“中国是乙肝高发区”,那是10年前的事了!经过不懈努力,我国一般人群乙肝表面抗原阳性率已经从9.09%降到了5-6%。乙肝病毒的感染率在不断减少。乙肝其实真没那么可怕!首先,对于青少年和成年人来说,感染乙肝病毒后绝大多数表现为急性乙肝,90%-95%可以痊愈,仅有5%-10%会发展成为慢性。针对急性乙肝患者,如果病程在四个月以后还能检测到表面抗原,可以考虑抗病毒治疗以促进乙肝病毒清除。

膝骨关节炎模型大鼠相关穴位敏化的肥大细胞机制研究

目的:探讨不同程度膝骨关节炎模型大鼠鹤顶、阳陵泉和委中穴在穴位敏化的第7天穴区肥大细胞功能和形态的变化,说明穴位敏化的细胞分子机制。方法:选取150～160 g的SD雄性大鼠随机分为正常组(N)、假手术组(NS)、轻度关节炎组(A)、中度关节炎组(B)和重度关节炎组(C) 5组,在右侧膝关节腔内注射单碘乙酸盐(MIA)制备模型。造模成功后于造模的第7天取1. 5 mm×1. 5 mm×1. 5 mm体积的鹤顶、阳陵泉、委中3穴的穴区皮肤组织,采用甲苯胺蓝染色检测MC的募集和脱颗粒;免疫荧光观察MC脱颗粒释放的介质与MC共表达情况。结果:在穴位敏化的第7天,A、B、C 3组鹤顶穴区MC数量和脱颗粒率高于N组和NS组(P <0. 01),而阳陵泉和委中穴区未见明显变化,A、B、C 3组组间比较发现鹤顶穴区MC数量和脱颗粒率随疾病程度加重呈递增增长。A、B、C 3组鹤顶穴一些MC脱颗粒有类胰蛋白酶、5-HT、HA的释放,而阳陵泉和委中穴则未观察到这种变化。结论:在第7天时,鹤顶穴发生了穴位敏化,且敏化效应是即时的,敏化过程中伴随了MC的募集和脱颗粒,且MC的变化可能与疾病严重程度成正相关。穴位发生敏化具有特异性,每个穴位致敏的条件不同,MC脱颗粒所释放的类胰蛋白酶、5-HT、HA可能是穴位敏化发生的细胞分子机制。

维生素B_2辅助治疗手足口病90例报告

目的观察口服维生素B2辅助治疗小儿手足口病的临床疗效。方法门诊90例手足口病患儿随机分为观察组和对照组,各45例。在抗病毒治疗的基础上观察组口服维生素B2,对照组局部涂抹碘甘油进行辅助治疗。动态观察两组患儿退热、皮疹结痂及主动进食、口腔溃疡愈合时间。结果观察组患儿主动进食时间、口腔溃疡愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。退热时间,皮疹结痂时间组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论口服维生素B2治疗小儿手足口病口腔溃疡疗效满意,无明显不良反应,患儿依从性好。

丙型肝炎病毒核心蛋白上调基质金属蛋白酶组织抑制因子-1的表达

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1基因表达的影响,以探讨HCV的致肝纤维化机制。方法聚合酶链反应(PCR)扩增TIMP-1的启动子DNA片段,克隆至真核报告载体pCAT3-basic中,构建pCAT3-TIMP-1p报告载体;将该质粒转染人肝癌细胞系HepG2细胞,以酶链免疫吸附试验(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;将构建的pCAT3-TIMP-1p与HCV核心蛋白真核表达载体PcDNA3.1(-)-HCVcore共转染入人肝星状细胞系LX-2细胞,同时平行设立pCAT3-basic阴性对照组、pCAT3-control阳性对照组、pCAT3-TIMP-1p单独转染组,用ELISA法检测各组CAT的表达活性。结果成功获得TIMP-1基因启动子DNA片段,构建的pCAT3-TIMP-1p具有转录活性,与PcDNA3.1(-)-HCVcore共转染LX-2细胞后,ELISA法检测结果显示pCAT3-TIMP-1p吸光度值为0.833±0.040,同期单独转染LX-2细胞的pCAT3-TIMP-1p吸光度值为0.677±0.049,方差分析各组差异有统计学意义(F=132.401,P<0.05)。结论 HCV核心蛋白通过上调TIMP-1启动子的活性,促进TIMP-1基因的表达。

甘草甜素下调基质金属蛋白酶组织抑制因子-1基因的表达

目的:了解甘草甜素对基质金属蛋白酶组织抑制因子-1基因启动子活性的调节作用,探讨甘草甜素的抗纤维化机制.方法:应用聚合酶链反应(PCR)扩增基质金属蛋白酶组织抑制因子-1基因启动子,命名为TIMP-1P,以T-A克隆法,将TIMP-1P基因片段连入载体pGEM-Teasy.将获得的质粒pGEMTeasy-TIMP-1P,与报告质粒pCAT3-basic分别用NheI和XhoI双酶切后构建TIMP-1启动子报告基因表达载体pCAT3-TIMP-1P,以重组表达质粒pCAT3-TIMP-1P瞬时转染HepG2细胞,4h后以0.1mmol甘草甜素刺激,48h后收获细胞.同时以转染pCAT3-basic的HepG2细胞为阴性对照,每组设复孔对照,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测标本在415nm波长的吸光度值,其数值反映细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达水平.结果:构建的报告基因表达载体pCAT3-TIMP-1P经过序列分析和酶切鉴定正确.瞬时转染HepG2细胞后,pCAT3-basic的吸光度值为0.004±0.002,pCAT3-TIMP-1P为2.329±0.685,经方差分析两者差异有统计学意义(F=26.075,P<0.05),pCAT3-TIMP-1在HepG2细胞中能够启动CAT的表达.转染HepG2细胞的pCAT3-TIMP-1P经0.1mmol甘草甜素刺激后,其吸光度值为0.268±0.009,同期未经甘草甜素刺激的pCAT3-TIMP-1P吸光度值为0.490±0.153,方差分析两者差异有统计学意义(F=35.775,P<0.05).结论:甘草甜素可下调TIMP-1启动子的转录活性,抑制TIMP-1的基因表达.

腧穴敏化的生物物理特性研究进展

腧穴敏化是指在病理状态下,穴位从"静息态"到"激活态"的动态转化过程。然而既往对腧穴敏化的判断基本凭借医患的主观感觉,缺乏客观评判标准。近年来对腧穴敏化过程中的生物物理特性变化进行了诸多探索,取得了一系列成果。本研究从腧穴电敏化、光敏化、热敏化、微循环敏化、压痛敏化、声敏化6个方面入手,综述了当前腧穴敏化的生物物理特性研究进展。文献回顾表明腧穴敏化具有疾病特异性,表现形式多元且携带有多种疾病相关信息,是与疾病状态相关联的动态变化过程。同时提出未来研究应重点把握腧穴敏化动态过程中基础性规律,并着力构建和明确腧穴敏化的生物物理特性评判体系与标准。

给慢性乙型肝炎患者的话

肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列形成肝小叶,成千上万蜂窝状的肝小叶保障了肝脏丰富的血液供应,撑起了肝脏的基本功能。当肝细胞反复坏死、再生后,肝小叶的蜂窝状结构就被破坏,再生的肝细胞堆积成一团挤压小血管、小胆管,疾病就进展成为了肝硬化。失去小叶结构的肝细胞团妨碍了肝脏的血液供应、不能维持肝脏的基本功能,机体会出现相应的表现。我们称之为肝硬化失代偿期。当某种病因持续造成肝细胞不断地坏死、再生。新生的肝细胞在再生过程中基因编码就有可能会出现差错,差错累积到一定程度时正常的肝细胞就“黑化”成了癌细胞。

人肝再生增强因子上调细胞周期素B2基因的表达

目的研究人肝再生增强因子(ALR)转基因表达对细胞周期素B2启动子(cyclin B2p)转录的调节作用,从而进一步探讨ALR的生物学作用及机制。方法根据文献确定细胞周期素B2p区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素B2p,克隆至报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclin B2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,同时与ALR的真核表达载体pcDNA3．1(-)-ALR共转染HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果成功构建pCAT3- cyclin B2p报告基因表达载体;pCAT3-cyclin B2p与pcDNA3．1(-)-ALR共转染HepG2细胞系的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的25．13倍,是pCAT3-cyclin B2p单转染的2．60倍。结论人ALR对细胞周期素B2p基因的转录表达具有反式激活作用。

人肝再生增强因子下调钙结合蛋白S100A11基因表达的研究

目的探讨人肝再生增强因子(ALR)对钙结合蛋白S100A11启动子(S100A11p)转录的调节作用。方法利用生物信息学技术确定S100A11p区域,聚合酶链反应(PCR)扩增S100A11p,克隆至真核报告载体pCAT3中,构建pCAT3S100A11p报告载体;以该质粒转染HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性,并以人ALR的真核表达载体pcDNA3.1(-)ALR共转染的HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测CAT的表达活性。结果pCAT3S100A11p在HepG2细胞中具有CAT的表达活性;以pcDNA3.1(-)ALR和pCAT3S100A11p共转染HepG2细胞,CAT表达活性是单独转染细胞组pCAT3S100A11p的0.42倍。结论所克隆的S100A11启动子有启动子的转录活性,ALR的转基冈表达具有对S100A11基因的下调作用。

膝骨关节炎大鼠敏化穴区肥大细胞超微结构的电镜研究

目的:观察膝骨关节炎(KOA)模型大鼠鹤顶、委中在腧穴敏化过程中局部穴区肥大细胞(MC)超微结构改变,探讨腧穴敏化的MC机制。方法:将18只SD大鼠随机分为正常组、生理盐水组和模型组,每组6只。模型组采用单碘乙酸盐膝关节注射的方法制备大鼠KOA模型。造模后14天采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清IL-1β、CTX-Ⅱ水平;取鹤顶、委中穴区皮肤和皮下结缔组织,采用透射电子显微镜观察MC超微结构改变。结果:透射电子显微镜下观察到模型组鹤顶穴穴区MC周围有颗粒脱出,颗粒膜相互融合,脱颗粒后遗留有空泡;ELISA法结果显示模型组大鼠血清IL-1β、CTX-Ⅱ水平均显著高于正常组与生理盐水组(P <0. 01);模型组鹤顶穴穴区MC胞内致密颗粒占比较正常组及生理盐水组均明显降低(P <0. 01);模型组委中穴穴区MC胞内致密颗粒占比与正常组及生理盐水组相比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:MC参与了与疾病相关的腧穴敏化过程,特定疾病状态下的腧穴敏化具有腧穴特异性。

人胃癌组织中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达及其意义

目的:探讨休克蛋白70(HSP70)和糖调节蛋白94(grp94)在人胃癌组织中的表达与临床病理的关系。方法:应用免疫组织化学和病理学图像分析方法研究60例人胃癌组织及其癌旁组织、发生及未发生转移的癌组织中HSP70和grp94的表达。结果:在胃癌组织中HSP70和grp94的表达明显高于癌旁组织(93.3%,81.7%vs36.7%,25.0%,P<0.01)。HSP70和grp94在低分化和发生转移的胃癌组织中的表达明显高于非转移癌和癌旁组织(90.0%,85.0%;100%,84.6%vs36.7%,25.0%;P<0.01)。结论:HSP70和grp94在发生转移的低分化胃癌组织和未发生转移的高分化癌组织中表达存在明显不同,可以作为胃癌的诊断或预后指标。

西安地区肠道病毒71型手足口病患儿细胞免疫功能的临床研究

目的:研究西安地区肠道病毒71型手足口病患儿急性期外周血T淋巴细胞亚群的变化,以探讨其细胞免疫功能变化的临床意义。方法:根据病情轻重,将100例肠道病毒71型手足口病患儿分为重症组40例,轻症组60例,并与20例同期身体健康的同龄儿童进行对照,应用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群。结果:三组患儿总T淋巴细胞(CD3+CD19-)、抑制性T淋巴细胞(CD3+CD8+)以及辅助性T淋巴细胞(CD3+CD4+)的百分率比较具有显著性差异(P<0.05);其中T淋巴细胞、抑制性T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞在重症组最低,对照组最高;NK(CD16+CD56+)细胞百分率、B(CD19+)淋巴细胞百分率、辅助/抑制性T淋巴细胞比值在三组间的比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:肠道病毒71型手足口病患儿急性期细胞免疫功能受到抑制,重症手足口病患儿存在显著的细胞免疫功能紊乱。

慢性乙型肝炎患者196例病毒基因分型与临床的关系

目的探讨西安市中心医院感染科诊治的慢性乙肝患者血清中HBV基因型的分布状况及HBV基因型与临床特征的关系。方法采用巢式PCR法对196例慢性HBV患者的血清进行病毒基因型检测,并分析HBV基因型与患者临床特征的关系。结果 196例慢性HBV患者的基因分型结果为C型138例(70.4%)、B型40例(20.4%)、B/C混合型18例(9.2%),基因型的分布在性别上无统计学差异;各基因型在无症状携带者、慢性乙肝、肝硬化、肝癌中的分布差异也无统计学意义(P>0.05);C型感染者血清HBeAg阳性率(75.2%)高于B型感染者(14.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。各基因型患者在HBV-DNA载量和ALT水平上无统计学差异(P>0.05)。结论西安市中心医院感染科诊治的HBV患者的基因型以C型和B型为主;基因C型患者血清HBeAg阳性率高于B型;基因C型患者与B型相比在肝脏炎症程度、HBV-DNA载量方面无显著差异;基因B型和C型患者临床特点相似。

热休克蛋白70-甲胎蛋白抗原表位肽疫苗抗小鼠H22肝癌细胞免疫机制的研究

分别以AFP多肽、HSP70和HSP70-AFP多肽复合物免疫小鼠,检测各组CD8^+T细胞培养上清IFN-γ、TNF-α、穿孔素、颗粒酶B水平及CD8^+T细胞对H22细胞的杀伤作用,探讨热休克蛋白70(HSP70)-甲胎蛋白(AFP)抗原表位肽复合物对小鼠H22肝癌细胞的免疫效应。

酵母双杂交技术筛选白细胞cDNA文库中新基因NS2TP蛋白结合蛋白基因

目的:筛选HCV非结构蛋白2(NS2)反式调节蛋白(NS2TP)的结合蛋白,探讨HCV的致病机制及新蛋白NS2TP的生物学功能. 方法:应用酵母双杂交系统3,将PCR法扩增的NS2TP 基因连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒, 转化单倍体酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人白细胞文库质粒pACT2的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-α-半乳糖(C-α-gal)上进行双重筛选,提取阳性酵母茵落的质粒转化大肠杆茵氨苄青霉素-LB平板上选择并测序,结果在GenBank中进行生物信息学分析. 结果:筛选出与NS2TP结合的蛋白基因25个,其中包括细胞色素p450 2E1、核心蛋白聚糖、p68、β2微球蛋白、羧肽酶N2等已知功能基因及3个未知功能序列. 结论:为阐明新蛋白NS2TP的分子生物学功能及HCV 的致病机制提供了新的思路.

热休克蛋白70-甲胎蛋白重组复合物抗瘤免疫的实验研究

目的:构建含有分子伴侣热休克蛋白70(HSP70)和甲胎蛋白(AFP)分子的蛋白复合物,研究此蛋白复合物是否具有针对AFP肿瘤诱导产生特异性CTL反应和保护性效应的能力。方法:戊二醛交联HSP70和AFP构建HSP70-AFP复合物。皮下注射免疫Balb/c纯系小鼠,同时设立单独AFP和HSP70免疫小鼠组作为对照。酶联免疫斑点实验(ELISPOT)和酶联免疫实验(ELISA)分别检测免疫后小鼠脾产生细胞因子IFN-γ的细胞数目和抗AFP抗体的水平。采用小鼠体内肿瘤负荷实验评价重组蛋白复合物的免疫效应。结果:经重组蛋白复合物免疫,ELISPOT和ELISA实验结果表明HSP70-AFP复合物免疫组分泌IFN-γ细胞因子的脾细胞数目和产生AFP的抗体水平显著高于AFP和HSP70免疫组(P<0.01)。HSP70-AFP复合物免疫组瘤体积也明显小于AFP和HSP70免疫组(P<0.01)。结论:研究证实了HSP70的免疫佐剂效应。实验结果表明重组HSP70-AFP复合物的连续免疫可以在小鼠体内产生有效的抗瘤免疫,HSP70-AFP重组蛋白复合物对于今后肿瘤疫苗的研究可能具有一定的意义。

应用噬菌体展示技术筛选干扰素β基因启动子DNA结合蛋白的基因

目的筛选干扰素β(IFN-β)启动子DNA结合蛋白的基因,探讨IFN-β基因调节的分子生物学机制。方法应用噬菌体展示技术,以IFN-β启动子DNA的聚合酶链反应(PCR)产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的生物筛选过程,噬斑PCR扩增后,对所筛选克隆进行DNA序列测定和生物信息学分析。结果噬菌体经富集后,随机挑选52个克隆,序列测定后经过同源性搜索,确定与IFN-β启动子具有结合作用的肝细胞蛋白有6种,包括谷胱甘肽S-转移酶(GST),淀粉酶突变体蛋白,锌指蛋白等与细胞发育和代谢有关的蛋白。结论IFN-β启动子DNA与肝细胞中多种蛋白类型结合,为研究IFN-β基因在肝细胞中的表达调控奠定了基础。

人肝癌细胞BEL-7402中热休克蛋白70相伴甲胎蛋白的实验研究

为研究人肝癌细胞BEL-7402中热休克蛋白70(HSP70)与甲胎蛋白(AFP)的相互作用,采用免疫化学和免疫荧光检测HSP70和AFP在肝癌细胞中的表达和定位。HSP70与AFP的相互关系通过免疫共沉淀和蛋白印迹杂交进行分析。结果免疫化学显示人肝癌细胞BEL-7402中存在高水平的HSP70和AFP共表达,均定位于细胞浆。AFP存在于HSP70单抗的免疫沉淀中,而HSP70则存在于AFP单抗的免疫沉淀中。结果表明人肝癌细胞BEL-7402中HSP70与AFP相伴。两者之间的相互关系研究将成为探讨肝癌的发生和免疫治疗的新途径。

结肠癌中热休克蛋白70和糖调节蛋白94的表达与临床病理的关系

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)和糖调节蛋白94(grp94)在人结肠癌组织中的表达与临床病理的关系。方法:应用免疫组织化学和病理学图像分析方法研究80例人结肠癌组织及其癌旁组织、发生及未发生转移的癌组织中HSP70和grp94的表达。结果:在结肠癌组织中HSP70和grp94的表达明显高于癌旁组织(92.5%,85.0%VS56.3%,42.5%,P<0.01)。HSP70和grp94在中度和低度分化的结肠癌组织中的表达率明显高于癌旁组织(93.7%,87.5%;100%,90.0%VS56.3%,42.5%;P<0.01)。HSP70和grp94在DukesC期(97.1%,91.2%)和D分期(100%,90.9%)的表达比DukesA期(80.0%,70.0%)和B期(78.6%,71.4%)的癌组织阳性表达率高(P<0.05)。结论:HSP70和grp94在发生转移的低分化结肠癌组织和未发生转移的高分化癌组织中表达存在明显不同,它们的高表达可以作为结肠癌的诊断或预后指标。

面向服装E-Commerce的模特眼睛定位方法

针对电子商务网站二维服装虚拟试穿与搭配展示中模特图像配准的需求,提出了一种基于K-均值聚类和扫描标号法相结合的模特眼睛定位方法。首先对模特图像进行Gamma矫正,进而以K-均值聚类为基础分割图像并完成候选区域的边缘检测,最后采用扫描标号法定位模特眼睛。实验结果表明了该方法的鲁棒性与有效性。