应用MR氢谱检测大鼠脑胶质瘤C6细胞放射损伤

目的应用高分辨率MR氢谱检测大鼠脑胶质瘤细胞系C6的放射损伤并初步探讨其机制。方法以C6细胞为研究对象，应用MR氢谱检测细胞内多种代谢物浓度；彗星实验检测DNA损伤；流式细胞术检测周期进程及凋亡率；克隆形成实验观察克隆形成率并初步探讨放射损伤作用机制。采用单因素方差分析，Pearson法相关分析。结果照射剂量由0Gy增加为1、5、10、15Gy时，DNA损伤逐渐加重且有剂量依赖性（P=0．000～0．690），G1期所占百分比显著增加（P=0．026—0．749），凋亡率逐渐上升（P=0.000～0．000），克隆形成率逐渐降低（P=0．000—0．004）；同时，代谢物比值Lac／Cr逐渐减少（P=0．000-0．015），与DNA损伤参数（尾长、彗尾中DNA含量、尾矩）呈线性负相关（r=-0．971、-0．998、-0．995），与凋亡率呈线性负相关（r=-0．978）。结论MR氢谱检测发现C6细胞照射后Lac／Cr比值变化与肿瘤细胞凋亡有明显相关性，MR氢谱具有预测脑胶质瘤放射损伤的潜力。

高场强磁共振波谱观察脑胶质瘤细胞代谢特征

目的利用14.7T高场强磁共振仪检测脑胶质瘤细胞水溶性代谢物,观察其波谱代谢特征。方法培养并获取脑胶质瘤细胞株C6、U251,利用高氯酸提取细胞水溶性代谢物。通过14.7T高场强磁共振仪获取相应水溶性代谢物波谱并计算出乳酸(Lac)/肌酸(Cr)、琥珀酸(Suc)/Cr、N-乙酰天门冬氨酸(NAA)/Cr、胆碱复合物(Cho)/Cr、Cho/NAA、甘氨酸(Gly)/Cr、肌醇(MI)/Cr比值。结果 C6与U251脑胶质瘤细胞水溶性代谢物种类基本相同,但代谢物比值各具特征。结论高场强磁共振波谱能在细胞水平分析代谢物特征并用于检测细胞生理、病理状态。

X线照射对U87胶质瘤多细胞球体MMP-2活性及Cho/Cr的影响

目的构建胶质瘤细胞系U87的多细胞球体（MCS）模型,探讨不同剂量的X线对胶质瘤多细胞球体上清液基质金属蛋白酶2（MMP-2）活性和水溶性代谢物的影响。方法采用琼脂糖培养法建立U87多细胞球体模型;用0、1、5、10 Gy的X线分别照射多细胞球体,0 Gy组作为对照组,利用高氯酸提取细胞中水溶性代谢物[胆碱（Cho）、肌酸（Cr）、N-乙酰天门冬氨酸（NAA）],采用14.7T高场强磁共振仪获取水溶性代谢物波谱;采用明胶酶谱法测量U87多细胞球体上清中MMP-2活性。结果成功建立了U87多细胞球体模型;多细胞球体在1、5、10 Gy X线照射下的胆碱与肌酸比值（Cho/Cr）分别为2.74±0.02、4.32±0.17、4.92±0.07,与对照组（2.10±0.29）比较,细胞内水溶性代谢物比值Cho/Cr升高（P=0.033,P=0.000,P=0.000）;多细胞球体在0~10 Gy X线照射范围内,随着照射剂量的增加,细胞M M P-2活性增加。与对照组比较,差异有统计学意义（P=0.000）。结论亚致死剂量的X线可导致U87胶质瘤多细胞球体MMP-2活性增高,Cho/Cr升高。