miR-182激活PI3K/AKT信号通路促进肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究

目的:探讨miR-182通过PI3K/AKT信号通路对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法:将体外培养的HepG2细胞分为对照组(未转染)、阴性组(转染阴性对照)、模拟物组(转染miR-182模拟物)和模拟物+抑制剂组(转染miR-182模拟物后,加入PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002),采用RT-PCR检测各组细胞中miR-182的表达水平,Western blot检测各组细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达,采用MTT法、克隆形成实验和Transwell小室分别检测各组细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果:与对照组相比,模拟物组细胞的存活率、克隆形成率和侵袭细胞数、迁移细胞数均明显升高,细胞中p-PI3K、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达水平也均明显上升(P<0.05);而阴性组和对照组细胞相比无显著性差异(P>0.05)。与模拟物组相比,模拟物+抑制剂组细胞的存活率、克隆形成率和侵袭细胞数、迁移细胞数明显降低,细胞中p-PI3K、p-AKT和MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达水平也均明显下降(P<0.05)。结论:miR-182可通过激活PI3K/AKT信号通路上调MMP-9、c-Myc、VEGF蛋白的表达促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

BTG1过表达对胰腺癌细胞增殖、侵袭和cyclin D1、cyclin B1、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响

目的探讨B细胞易位基因1(BTG1)过表达对胰腺癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法采用qRT-PCR和Western blot检测人胰腺癌细胞株PANC-1、AsPC-1、BxPc-3和正常胰腺导管上皮细胞株H6C7中BTG1 mRNA和蛋白的表达水平。将体外培养的BxPc-3细胞分为对照组(未转染)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空载体质粒)和BTG1组(转染pcDNA3.1-BTG1过表达质粒),转染48 h后,qRT-PCR和Western blot检测转染效果;MTT法、流式细胞术和Transwell小室法分别检测各组细胞的增殖能力、周期分布和侵袭能力;Western blot检测各组细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白B1(cyclin B1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达情况。结果与H6C7细胞相比,PANC-1、AsPC-1、BxPc-3细胞中BTG1 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05),且BxPc-3细胞差异最为显著。与对照组相比,BTG1组细胞的增殖、侵袭能力、细胞在S期的百分比以及细胞中cyclin D1、cyclin B1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均明显降低,而细胞在G0/G1期的百分比明显升高(P<0.05);而pcDNA3.1组和对照组细胞的增殖能力、侵袭能力、周期分布情况以及cyclin D1、cyclin B1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均无统计学差异(P>0.05)。结论BTG1过表达可抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭,其作用机制可能与下调cyclin D1、cyclin B1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达有关。

miR-144对胰腺癌SW1990细胞增殖、迁移、侵袭及PI3K通路的影响

目的探讨miR-144对胰腺癌SW1990细胞增殖、迁移、侵袭及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测人正常胰腺上皮细胞系HPDE与胰腺癌SW1990细胞中miR-144表达水平。将miR-144阴性对照质粒、miR-144 mimic质粒分别转染至SW1990细胞,分别命名为阴性转染组、miR-144过表达组,未经处理的细胞命名为空白对照组。采用RT-qPCR法检测各组miR-144表达水平;CCK-8法检测细胞增殖情况;平板细胞克隆形成实验检测菌落形成;Transwell检测细胞迁移及侵袭能力;Western blot法检测PI3K通路中PI3K及其磷酸化蛋白(p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)及其磷酸化蛋白(p-Akt)的表达水平。结果SW1990细胞中miR-144的表达水平显著低于HPDE细胞(P<0.05);miR-144过表达组中miR-144表达水平显著高于空白对照组和阴性转染组(P<0.05)、细胞增殖率、菌落形成、迁移及侵袭数量和p-PI3K、p-Akt蛋白表达水平均显著低于空白对照组、阴性转染组(均P<0.05)。结论miR-144在胰腺癌细胞SW1990中呈低表达,上调miR-144表达水平有效抑制胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,其机制可能与PI3K通路抑制有关。

当代大学生法律意识教育调查研究

对当代大学生法律意识现状的分析,多维度探索出我国高校法律意识教育的合理性改革,培养塑造大学生现代法律意识,对于实现建设社会主义法治国家的目标具有重要的现实意义。文章通过参考部分高校在校大学生的法律意识状况的抽样调查结果,了解当前大学生法律意识的现状和影响因素,并相应地提出改进当代大学生法律意识教育的对策。

影响民族关系的因素及增进民族团结的策略

作为多民族国家最基本社会关系的民族关系,其发展以民族存在的时代社会环境诸要素为基础,受党和国家民族政策的指导和规范;准确把握影响民族关系的主要因素,对深刻认识民族关系的发展规律,科学、有效地协调多民族国家内部的民族关系,增进民族团结具有重要的现实意义。

多元文化背景下大学生社会主义核心价值观的培育与践行

当今世界,文化在世界范围内呈现出多元并存和自由发展的显著特征,给大学生的价值观和思维方式带来重大影响,导致方向迷失以及无政府主义和极端个人主义的产生。而社会主义核心价值观是民族精神最深层的思想内核,直接反映社会价值的本质和特性。通过对大学生社会主义核心价值观的培育,能够引导他们正确面对多元文化社会,积极践行社会主义核心价值观,有效防止多元文化带来的负面影响。

从根除特权思想看党员干部群众路线的践行

特权思想是党员领导干部践行群众路线的"硬伤",反对党员领导干部中的特权思想也是我们党历来的鲜明主张,认为特权思想是导致党群关系、干群关系紧张甚至冲突的重要根源。因此,开展党的群众路线教育实践活动,首先必须要根除党员领导干部的特权思想。

关于我国社会主义市场经济下的法治思考

随着我国社会主义市场经济体制的确立,法治的实行不可避免,这是社会发展的必然趋势,市场经济的发展需要法治作保障。市场经济是法治经济,而区别于法制经济。

企业伦理与企业活力

第二次世界大战以后,世界资本主义进入一个相对稳定和比较成熟的发展阶段,许多资本主义国家通过加强对经济生活的国家干预、加强对社会经济活动宏观调控和计划指导等手段,逐步形成了一整套比较完善的自我调节机制,使资本主义社会的种种矛盾得到了一定程度的缓解。这时,以原子能、电子计算机和宇宙空间技术的发明、应用为主要标志的新技术革命,一方面大大推动了社会生产力的发展,引起了社会经济结构、物质生活方式的深刻变化。

发挥统一战线优势 为贵州经济建设服务

党的十七届五中全会审议通过的“十二五”规划建议在提出要以科学发展为主题的同时明确提出，制定“十二五”规划要以加快转变经济发展方式为主线。进一步指明了当前和今后一个时期我国经济社会发展的努力方向。就贵州而言，须从国家宏观政策的重大战略性调整出发，来谋划“十二五”规划的战略思路，才能在中长期发展中占领制高点，赢得主动权。

WTO背景下中国政府如何推进依法行政

中国加入WTO所面临的最大挑战不是企业而是政府。文章从中国需要加入WTO、并在WTO规则要求的背景下揭示了中国政府现行的行政管理体制所存在的诸多问题,进而从实现政府职能的转变、改进政府管理方式、实现依法行政的基础等方面,探讨了中国政府应对加入WTO后推进依法行政的对策。

邓小平法治思想对我国依法治国的指导作用

党的十五大在认真总结近二十年来民主法制建设经验的基础上，明确提出了依法治国，建设社会主义法治国家的任务，是对作为邓小平理论重要组成部分的法治思想的高度概括与总结，也是继承和发展邓小平理论的重大成果。认真学习和深入研究邓小平的这一思想，将对党的十六大提出的到2010年形成中国特色社会主义法律体系，具有重大的理论指导作用和实践作用。

PET/CT在胰头肿块型良恶性病变的鉴别诊断和在术前评估胰腺癌切除的可行性

目的 1、探讨PET/CT在胰腺癌与肿块型胰腺良病史鉴别诊断方面的价值。2、PET/CT对胰腺癌可行性切除评估中的价值。3、PET/CT在发现淋巴结转移,神经束膜侵犯和远处转移方面的价值。方法本文对37例经B超、CT、内镜等检查发现胰头占位但未能明确肿块性质的患者进行PET/CT扫描。收集病灶的大小、部位,局部和远处淋巴结转移状况,神经束膜侵犯情况,病变与邻近组织器官的解剖学关系以及是否出现远处转移病灶等情况;测量肿瘤大小及面积,病灶的18FSG早期最大标准化摄取值(SUVmax)。结果 24例术前考虑胰腺癌患者早期SUVmax平均值为6.38±3.84;肿瘤的大小平均3.40cm×2.64cm,假阳性4例;慢性胰腺炎7例早期SUVmax平均值为3.30±2.27;肿瘤的大小平均3.7cm×2.5cm。2例壶腹部癌患者SUVmax分别是5.4和4.2,肿瘤大小分别是:4.2cm×3.8cm和2.7cm×1.9cm;2例胰腺粘液性囊腺瘤,SUVmax分别是:0.6和0.8,肿瘤大小分别是:3.8cm×2.5cm和5.4cm×2.7cm。1例胰腺实性-假乳头状瘤,SUVmax值为6.9,肿瘤大小为6.6×4.7cm。1例十二指肠乳头癌,其SUVmax为6.9,肿瘤大小1.7cm×1.4cm。以早期SUVmax等于3.0作为胰腺良恶性病变的鉴别阈值,PET/CT诊断胰腺癌敏感度、特异性和准确性分别为87.1%(27/31例)、83.3%(5/6例)、86.5%(32/37)。PET/CT发现5例胰腺癌存在远处转移而无法施行手术治疗。结论 PET/CT显像诊断胰腺癌灵敏度、特异性以及准确性较高,在胰头癌和肿块型慢性胰腺炎的鉴别诊断中具有显著意义,并在术前胰腺癌可切除性评估起到指导性意义。

国际金融危机环境影响下我国中小企业的对策和措施

中小企业是我国国民经济的重要组成部分,对现代经济和社会的进步发挥着越来越重要的作用,本文首先对国际金融危机影响中小企业的发展和现状进行了实证分析,在此基础上提出了因管理缺陷、融资困难、人才匮乏等因素制约中小型企业发展的成因,随后提出了提升中小企业应对金融危机对策和措施。

新时期高校思想政治理论课教学实效性的探索与研究

新时期,随着我国改革的全面深化,思想观念的束缚被冲破,一系列突出矛盾和问题接踵而至,高校大学生价值观的改变使思想政治理论课教学面临强烈的冲击和严峻的挑战.思想政治理论课的实效性如何增强,教育主渠道和主阵地作用如何有效发挥,是高校当前思想政治理论课教学亟待探索和研究的一个重大问题.

慢病毒介导Ras-GRF1调控肝癌干细胞干性维持与自我更新能力的机制

目的:探究Ras蛋白特异性的鸟苷酸释放因子1(Ras protein specific guanylate releasing factor 1,Ras-GRF1)在肝癌干细胞(cancer stem cells,CSC)生物学特性及自我更新中的作用,并初步探究其作用机制。方法:实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测人正常肝细胞系(HL-7702)和不同肝癌细胞系(Huh7、HepG2、Hep3B、CLC4、CLCl3、SMMC-7721)中Ras-GRF1表达水平;流式细胞术分选出肝癌干细胞,利用Ras-GRF1-pCMV6-GFP重组慢病毒感染肝癌干细胞,MTT法、EdU染色和平板克隆形成实验检测过表达Ras-GRF1对肝癌干细胞增殖能力的影响;Transwell小室实验检测过表达Ras-GRF1后肝癌干细胞迁移与侵袭变化;成球实验检测过表达Ras-GRF1后肝癌干细胞的自我更新能力;蛋白免疫印迹(Western blot)检测肿瘤干细胞中Hippo信号通路关键蛋白大肿瘤抑制因子(large tumor suppressor,LATS)、Yes协同蛋白(Yes cooperative protein,YAP)和哺乳动物STE20样蛋白激酶(mammalian STE20-like protein kinase,MST)的蛋白及磷酸化表达水平。结果:不同肝癌细胞中Ras-GRF1 mRNA表达量较人正常肝细胞中显著降低(P<0.05);分离到的肝癌干细胞在感染Ras-GRF1-pC MV6-GFP重组慢病毒后,细胞中RasGRF1 mRNA表达量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);在两种肝癌干细胞HepG 2-CSC和SMMC-7721-CSC中,相较于空白对照组,Ras-GRF1-pC MV6组细胞增殖活性显著降低,EdU阳性染色数目和细胞克隆形成数目均显著减少,细胞迁移与侵袭数目也均显著减少,细胞成球能力明显降低,p-LATS/LATS、pYAP/YAP及p-MST/MST蛋白表达显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:通过慢病毒介导Ras-GRF1在肝癌干细胞中过表达后,能够抑制肝癌干细胞的增殖、迁移与侵袭,降低自我更新能力,其机制可能与调控Hippo信号通路相关。

纳米Ag改性方式对锂氟化碳电池性能的影响

分别采用纳米Ag线和纳米Ag颗粒对氟化碳材料进行复合,以CF_(x)、CF_(x)@Ag1(复合纳米Ag线)、CF_(x)@Ag2(复合纳米Ag颗粒)为正极活性物质,制备5 Ah软包装锂氟化碳电池,研究纳米Ag线和纳米Ag颗粒复合对电池电化学性能的影响。使用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、能量散射光谱(EDS)对材料的形貌结构进行表征分析并利用四探针测定其电导率,采用恒流放电测试及交流阻抗对电池的电化学性能进行分析,并测定电池恒流放电下的温度变化。结果表明,纳米Ag线和纳米Ag颗粒复合均可以提高CF_(x)材料的电导率,以改性材料为活性物质制备的电池具有更好的电化学性能和热稳定性,其中CF_(x)@Ag1的改性效果好于CF_(x)@Ag2。

热电池Fe-Co-S型复合正极材料制备及电化学性能研究

采用物理混合法和高温固相法分别制备了Fe-Co-S型复合正极材料,对复合正极材料的物相组成、微观形貌及热稳定性等进行表征。对不同方法制备的热电池正极材料进行电化学性能测试,结果表明高温固相法制备的复合正极材料峰值电压和大电流放电下的脉冲性能更优。研究了Fe与Co的不同比例对Fe-Co-S型复合材料放电性能的影响,确定Fe与Co的最佳质量比为5∶5。研究了不同比例碳纳米管包覆对Fe_(0.5)Co_(0.5)S_(2)复合正极材料性能的影响,结果表明碳纳米管最佳添加量为1.5%(质量分数)。

高校《毛泽东思想和中国特色社会主义理论体系概论》课程“翻转式课堂”教学改革探析

《毛泽东思想和中国特色社会主义理论体系概论》(以下简称《概论》)课是高等学校设置开设的公共必修课程,具有理论性强、知识量大,并兼有时代性、实践性的特点。现该课程再沿用传统的教学方式则效果不佳,只有改革教学内容,搭建理论与现实深度结合的平台,采用"翻转式课堂"教学方式,方能促进教学质量和效果的提升。