大肠癌多药耐药逆转的研究进展

大肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,其多药耐药的发生是多因素、多阶段、多步骤共同作用的结果,针对其多药耐药逆转的研究对于提高患者的远期疗效极其重要。目前针对其多药耐药逆转机制的研究主要有针对P-糖蛋白的逆转、基因治疗、中医中药治疗等。在上述领域的研究已经取得了一定的进展,如何进一步深入研究大肠癌多药耐药的发生、发展机制,并实现多药耐药的逆转,将有助于预测和改善化疗疗效、提高消化道恶性肿瘤的综合疗效,并最终克服多药耐药这一难题。

短发夹RNA干扰表达质粒逆转人大肠癌细胞LOVO/5-Fu多药耐药的研究

目的:探讨短发夹RNA(shRNA)沉默多药耐药MDR)基因对大肠癌多药耐药细胞株LO-VO/5-Fu生长的影响。方法:构建靶向MDR1的shRNA干扰质粒转染人大肠癌多药耐药细胞株LO-VO/5-Fu,MTT法检测各组细胞对5-Fu的敏感性,流式细胞术检测细胞周期变化、凋亡情况及P-糖蛋白(P-gp)的表达,Realtime-PCR检测各组细胞MDR1 mRNA表达的变化,Western blot检测各组细胞P-gp表达的变化。结果:与对照组质粒组和未转染组相比,转染含shRNA干扰质粒细胞的实验组IC50明显降低,为(2.304±0.232)μmol/L,且差异有统计学意义(P<0.05),敏感性的相对逆转率为73.8%;凋亡率明显升高为(5.767±0.694)%(P<0.05);MDR1 mRNA表达明显下调(P<0.05);P-gp的表达水平降低(P<0.05)。结论:靶向MDR1的shRNA干扰质粒有效抑制了MDR1的表达,使P-gp的表达降低,从而增强了LOVO/5-Fu细胞对5-Fu的敏感性,有可能为临床上克服大肠癌化疗过程中出现的耐药提供新的作用靶点和治疗途径。

3D腹腔镜模拟训练器在外科临床教学中的应用效果

目的:探讨3D腹腔镜模拟训练器在外科临床教学中的效果。方法:选取2021年9月至11月进行外科实习的60名同学,随机分为2D组(n=30)与3D组(n=30),分别进行2D与3D腹腔镜模拟操作练习。模拟内容包括精准定位、手眼配合训练等。培训后进行考核,比较操作时间、主观评分(采用全球评价量表),并对培训满意度及视疲劳进行评价。结果:3D组各模块的用时短于2D组,全球评价量表得分高于2D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3D组对培训满意度、操作后的眼疲劳发生率高于2D组,差异亦有统计学意义(P<0.05)。培训考核后1 h,3D组眼疲劳发生率与2D组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3D腹腔镜模拟训练可帮助实习生降低腹腔镜操作难度,缩短操作时间,减少术中误操作,且对视觉影响较小,临床教学效果良好。

Hibernate在Struts中的研究与应用

介绍了目前比较流行的Struts和Hibernate两个开源框架,Struts作为目前比较流行的MVC模式的Web框架,却存在着持久层的开发问题,Hibernate通过其强大的O/R映射功能将Java对象同存放在关系数据库中的数据进行映射,避免了开发人员采用JDBC的方式大量使用SQL语句对数据库进行操作,让程序员可以使用面向对象编程的思维来操作数据库,能够提供更加灵活的业务逻辑。基于这两种框架的J2EE架构,实现了数据的持久化,从而提高了代码的复用性以及软件的开发效率。

腹腔镜腹膜外隧道式结肠造口的临床疗效

目的探讨腹腔镜腹膜外隧道式结肠造口在低位直肠癌术后的临床疗效。方法2015年1月~2019年12月我院60例因低位直肠癌行腹腔镜腹会阴联合切除术需行结肠造口,其中腹膜外隧道式结肠造口30例(腹膜外造口组),经腹膜结肠造口30例(腹膜造口组),比较2种造口方法造口时间、住院时间、术后排便预感和造口旁疝、回缩等。结果腹膜外造口组与腹膜造口组在造口时间、住院时间、排气时间差异无显著性[(35.4±9.7)min vs.(32.5±8.8)min,t=1.210,P=0.231;(55.6±12.1)h vs.(58.7±13.5)h,t=0.924,P=0.359;(9.4±3.6)d vs.(8.9±3.2)d,t=0.569,P=0.572]。60例术后随访9~57个月,中位随访时间26.4月,腹膜外造口组造口旁疝发生率明显低于腹膜造口组[6.6%(2/30)vs.26.7%(8/30),χ2=4.320,P=0.038]。腹膜外造口组14例(46.7%)排便前有明显预感,明显多于腹膜造口组6例(20.0%)(χ2=4.800,P=0.028)。结论腹腔镜腹膜外隧道式结肠造口术简单实用,不延长造口时间及住院时间,可减少造口旁疝并发症发生率,提高患者造口排便前的预感,有利于造口护理,值得临床推广。

粉防己碱逆转大肠癌耐药细胞株LOVO／5-Fu多药耐药性的实验研究

目的探讨粉防己碱（tetrandrine，Tet）逆转人大肠癌多药耐药细胞LOVO／5-Fu的多药耐药性（muhidrugresistance，MDR）及其机制。方法Tet作用于LOVO／5-Fu细胞48h后，用噻唑蓝法检测LOVO／5-Fu细胞耐药性，流式细胞术检测细胞凋亡、周期变化及其P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gP）的表达水平，实时荧光定量PCR检测各组细胞MDR1mRNA表达水平，Westernblot检测各组细胞P-gP蛋白的表达水平。结果经过Tet作用48h后，大肠癌LOVO／5-Fu细胞株的IC50降低为（4．15±0．31）μg／ml（P〈0．05），细胞凋亡率增加为（3．44％±0．28％）（P〈0．05），MDR1 mRNA转录水平降低为（570±85）（P〈0．05），P-gP的表达水平下降。结论Tet能逆转大肠癌多药耐药细胞LOVO／5-Fu的MDR，其机制可能是抑制MDR1基因的表达，使P-gP的表达降低，从而增强了LOVO／5-Fu细胞对5-Fu的敏感性。

短发夹RNA干扰质粒与粉防己碱对结肠癌耐药细胞多药耐药性的逆转作用

目的比较短发夹RNA干扰质粒与粉防己碱对结肠癌LoVo／5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用。方法用粉防己碱和靶向MDRl的短发夹RNA干扰质粒分别对结肠癌LoVo／5-FU耐药细胞进行处理，实验分为对照组（空白对照）、粉防己碱组和转染组（短发夹RNA干扰质粒）。应用MTT法检测细胞对5-Fu的敏感性；流式细胞仪检测细胞周期变化、凋亡情况及P-糖蛋白的阳性表达率；RT-PCR法检测MDRlmRNA的表达情况；Westernblot检测P-糖蛋白的表达情况。多组问的比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验。结果（1）细胞对5-Fu的敏感性：对照组、粉防己碱组、转染组的药物半数抑制浓度（IC50）分别为（7．3±0．3）、（4．4±0．7）、（2．4±0．4）mmol／L，3组比较，差异有统计学意义（F=65．27，P〈0．05）；粉防己碱组与转染组比较，差异有统计学意义（q=6．67，P〈0．05）。（2）细胞周期的变化：对照组、粉防己碱组、转染组G．期和S期细胞所占比例分别为38．13％±3．75％、51．36％±2．76％、59．24％±4．31％和20．46％±2．23％、14．32％±1．91％、9．40％±1．65％，3组比较，差异有统计学意义（F=25．23，24．37，P〈0．05）；粉防己碱组与转染组比较，差异有统计学意义（q=3．67，4．35，P〈0．05）。（3）细胞凋亡情况：对照组、粉防己碱组、转染组细胞凋亡率分别为1．32％±0．47％、3．24％±0．26％、5．88％±0．44％，3组比较，差异有统计学意义（F=99．26，P〈0．05）；粉防己碱组与转染组比较，差异有统计学意义（q=11．48，P〈0．05）。（4）P一糖蛋白的表达：对照组、粉防己碱组、转染组细胞P-糖蛋白的阳性表达率分别为96．9％±2．3％、61．6％±4．9％、76．6％±3．6％，3组比较，差异有统计学意义（F=67．83，P〈0．05）；粉防己碱组与转染组比较，差异有统计学意义（q=6．97，P〈0．05）。（5）MDRlmRNA表达情况：对照组、粉防己碱组、转染组细胞MDRlmRNA的相对表达量分别为1462±161、570±85、233±81，3组比较，差异有统计学意义（F=90．59，P〈0．05）；粉防己碱组与转染组比较，差异有统计学意义（q=5．12，P〈0．05）。结论粉防己碱和靶向MDRl的短发夹RNA干扰质粒均能逆转LoVo／5-Fu耐药细胞的MDR，且后者逆转作用更强，逆转机制与抑制P-糖蛋白表达及下调MDRlmRNA表达有关。

两种人大肠癌多药耐药株的建立及耐药性比较

目的比较递增药物质量浓度持续作用、恒定药物质量浓度周期作用两种方法建立的人大肠癌多药耐药细胞株的耐药性。方法用递增药物质量浓度持续作用、恒定药物质量浓度周期作用方式分别建立人大肠癌5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)多药耐药细胞亚系L2和L3,MTT检测两种细胞株的耐药指数,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因mRNA表达,Western blot检测p-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达。结果递增药物质量浓度持续作用法诱导8个月后,细胞可以在含2.5μg/mL 5-Fu的培养液中正常生长,对5-Fu的耐药指数为26.53,对该细胞亚系命名为L2;以含2.5μg/mL 5-Fu的培养液进行筛选,6个月后细胞能稳定生长,所得细胞亚系命名为L3,其对5-Fu的耐药指数为13.78。与L2相比,G1期细胞数量较少,细胞凋亡较多,MDR1 mRNA转录水平和P-gp表达相对较低。结论大肠癌LOVO细胞株经递增药物质量浓度持续作用、恒定药物质量浓度周期作用两种诱导方式作用后,成功建立的人大肠癌5-Fu多药耐药细胞亚系L2和L3均可产生MDR;其耐药机制可能与MDR1 mRNA和P-gp的过表达有关。两种方法建立的肿瘤多药耐药模型在耐药性上有一定差异。

XELOX和FOLFOX4新辅助化疗方案对不能手术切除的局部进展期胃癌的疗效比较

目的 比较XELOX和FOLFOX4两种新辅助化疗方案对不能手术切除的局部进展期胃癌患者的疗效.方法 前瞻性分析2006年7月至2009年10月山东大学附属省立医院收治的72例胃癌患者的临床资料.对由多学科协作小组评定不能手术切除的局部进展期胃癌患者,按照随机数字表法分为XELOX组（36例）和FOLFOX4组（失访3例,最终纳入本研究33例）.两组患者分别采用XELOX方案和FOLFOX4方案化疗6周.6周后根据复查结果由多学科协作小组评估疗效,对于完全缓解和部分缓解的患者施行手术切除并采用流式细胞仪检测细胞周期.率的比较采用Pearson x2检验;胃癌细胞周期各指数先采用Levene检验进行方差齐性检验,方差不齐采用t′检验,方差齐采用t检验.结果 XELOX组和FOLFOX4组的有效率分别为53%（19/36）和52%（17/33）,两组比较,差异无统计学意义（x2=0.01,P＞0.05）.XELOX组和FOLFOX4组中患者恶心呕吐、静脉炎、手足综合征的发生率分别为25%（9/36）、6%（2/36）、19%（7/36）和55%（18/33）、39%（13/33）、3%（1/33）,两组比较,差异有统计学意义（x2=6.31,11.59,4.53,P＜0.05）.XELOX组化疗有效的19例患者和FOLFOX4组化疗有效的17例患者接受手术切除,术后未发生吻合口漏、大出血等严重并发症.新辅助化疗后,XELOX组胃癌细胞的S期细胞比率（SPF）、增殖指数（PI）、G2/M分别为5.89%±0.79%、9.22%±1.99%、5.19%±1.66%,低于新辅助化疗前的6.76%±1.21%、10.44%±2.12%、6.04%±0.57%,而新辅助化疗后G0/G1为90.39%±4.78%,高于新辅助化疗前的87.54%±6.34%（x2=3.61,2.52,2.15,2.91,P＜0.05）;FOLFOX4组新辅助化疗后的SPF、PI、G2/M分别为6.09%±0.96%、10.65%±2.47%、4.88%±0.87%,低于新辅助化疗前的7.15%±1.45%、11.87%±2.33%、5.67%±1.03%,而新辅助化疗后G0/G1为91.45%±5.22%,高于新辅助化疗前的88.01%±4.23%（x2=3.50,2.06,3.37,2.94,P＜0.05）.新辅助化疗后两组PI值比较,差异有统计学意义（x2=2.66,P＜0.05）.结论 XELOX和FOLFOX4两种新辅助化疗方案对不能手术切除的局部进展期胃癌患者安全、有效,对胃癌细胞的增殖抑制明显;XELOX方案比FOLFOX4方案更为有效.

公文流转系统的研究

公文流转系统是办公自动化系统的核心,在介绍公文流转系统中工作流的基础上,对目前国内外公文流转用到的相关技术进行了总结,最后对公文流转的发展方向进行了展望。

食管胃交界处癌根治性切除术的预后危险因素分析

目的:分析食管胃交界处癌根治性切除术的预后危险因素。方法:抽取2016年11月至2018年11月滕州市中心人民医院收治的食管胃交界处癌患者120例,均行食管胃交界处癌根治性切除术,分析TNM不同分期患者的术后并发症、生活质量、生存情况,应用Logistic回归分析术后复发的影响因素。结果:120例中TNMⅠ~Ⅳ期患者术后并发症、生活质量、6个月~5年的生存率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后复发的独立影响因素为性别、年龄、病灶长径、是否接受化疗、复发间隔时间、住院时间、手术时间、TNM分期(OR=2.013、1.917、1.968、2.042、1.986、1.785、1.635、1.422,P<0.05)。结论:食管胃交界处癌行根治性切除术后复发的危险因素与患者自身、病灶、治疗情况相关,制定特征性个体防护方案,有可能改善预后。