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人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达
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作者 王弘駂 李质馨 +4 位作者 田洪艳 徐冶朱 辛为 林冬静 窦肇华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期910-912,918,共4页
目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23~348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染... 目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23~348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染毕赤酵母X33细胞,用高浓度Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导目的蛋白分泌,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定人ZP3186S蛋白。结果:pPICZα-hZP3186S表达质粒经测序正确,并在毕赤酵母X33中能够高效表达。结论:毕赤酵母能够分泌性表达重组人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),进一步研究其生物学活性为研制不孕症诊断试剂和免疫避孕疫苗提供实验材料。 展开更多
关键词 透明带 人ZP3蛋白 毕赤酵母 基因表达
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