基于尿控技术的改良经尿道前列腺钬激光剜除术治疗大体积前列腺增生临床观察

良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)是引起中老年男性下尿路症状的常见原因,经尿道前列腺电切术(transurethral resection of the prostate,TURP)是泌尿外科治疗BPH的“金标准”^([1])。TURP对于前列腺体积较小的BPH患者疗效确切,但用于治疗前列腺体积>80 mL的BPH患者时,术中出血量明显增加,术后下尿路症状改善不明显,且术后持续膀胱冲洗时间以及导尿管留置时间延长^([2-3])。美国泌尿外科协会指南指出,钬激光或铥激光前列腺剜除术是目前大体积前列腺增生和小体积前列腺增生患者均适用的微创治疗方法^([4])。

骶神经根磁刺激治疗经尿道前列腺钬激光剜除术后下尿路功能障碍的临床研究

目的探讨骶神经根磁刺激治疗经尿道前列腺钬激光剜除术(HoLEP)后下尿路功能障碍的临床疗效。方法选取2017年6月至2020年6月在杭州市第三人民医院行HoLEP且术后出现下尿路功能障碍的患者72例,其中术后予盆底肌群训练+骶神经根磁刺激治疗36例,为观察组;仅予盆底肌群训练36例,为对照组。比较两组患者治疗前后国际前列腺症状评分(IPSS)、视觉模拟评分(VAS)、生活质量指数(QoL)、尿动力学指标[包括最大尿流率(Q_(max))、平均尿流率(Q_(avg))]以及下尿路功能障碍(排尿困难、尿频/尿急、暂时性尿失禁、膀胱痉挛等)改善情况。结果治疗前,两组患者IPSS、VAS、QoL、Q_(max)、Q_(avg)以及排尿困难、尿频/尿急、暂时性尿失禁、膀胱痉挛等下尿路功能障碍发生率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组治疗后IPSS、VAS、QoL以及下尿路功能障碍发生率均明显低于治疗前,Q_(max)、Q_(avg)均明显高于治疗前,且均较对照组改善更明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论骶神经根磁刺激联合盆底肌群训练能显著改善HoLEP术后出现的下尿路功能障碍,提高患者生活质量。

海洋石油平台生产分离器改造技术应用

生产分离器是天然气生产平台最关键的设备,其分离效果直接影响气田产量以及下游设备的稳定性。因井口数量增加,南海东部某平台生产分离器分液能力不足、气液分离效果不佳,使得下游设备稳定性变差。根据降低生产分离器操作压力后预测的配产数据,对生产分离器内件进行改造。结果表明,经过内件改造后的生产分离器处理能力大幅提升,且降低了设备本身的操作温度,大大提高了设备的操作性能,达到了降本增效的目的。

矿井突水水源识别的主成分分析-混沌麻雀搜索-RF模型

为快速、准确地识别矿井突水水源,根据矿井不同含水层水化学成分的差异性,将Na^(+)+K^(+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)、Cl^(-)、SO_(4)^(2-)、HCO_(3)^(-)及总硬度作为判别指标。利用主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)对数据进行降维,并通过混沌麻雀搜索算法(Chaotic Sparrow Search Algorithm,CSSA)对随机森林(Random Forest,RF)模型中树深和树数目参数进行寻优,建立了基于PCA-CSSA-RF的矿井突水水源识别模型。选取新庄孜矿实测的45组样本数据进行预测分析,33组数据用于模型训练,12组数据用于识别测试,并将结果与其他模型识别结果进行对比。研究表明,利用PCA对数据进行降维可以减少原始数据中的冗余,利用CSSA优化的RF模型可提高全局搜索能力和预测能力,用该模型可提高突水水源识别的效率和准确率。

自贸区试点政策对地区碳排放的影响效应——基于省际面板数据的实证分析

在“双碳”目标背景下,重视地区碳排放是自贸区推动地区可持续发展的基础保障。本文选取2007—2019年中国30个省(区、市,未包括港澳台及西藏)的面板数据,采用双重差分法研究了自贸区试点政策对地区碳排放的影响效应。研究表明:自贸区试点政策有利于降低地区碳排放。中介效应分析表明:自贸区试点政策通过提高地区产业结构高级化、提升地区绿色技术创新水平,进而实现碳减排效果。异质性分析表明,相对于非沿海地区,自贸区试点政策在沿海地区的实施对降低地区碳排放效果更加显著。根据以上研究结论,提出以下相应的政策建议:简政提效,助力地区产业结构快升级;产研结合,优化绿色技术创新大环境;因地制宜,构筑优势产业培育新高地。

饲喂丁酸梭菌对肉鸡盲肠黏膜形态和转录组的影响

【目的】在肉鸡养殖中饲喂丁酸梭菌具有促进生长和提高饲料转化效率的作用,但其机制尚不明确。本研究采用转录组测序技术和组织学染色方法,研究饲粮中添加丁酸梭菌对肉鸡盲肠黏膜的影响,为丁酸梭菌的应用提供试验基础和理论支持。【方法】选取120只爱拔益加(AA)肉鸡,随机分为2组,每组6个重复,每个重复10只鸡,对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加丁酸梭菌(1×10^(9)CFU/kg),试验期为28 d,全程自由采食和饮水。在28日龄时每个重复随机选取1只肉鸡处死,采集盲肠黏膜样品,应用RNA测序技术检测盲肠黏膜组织的转录组学特征,应用组织染色镜检分析盲肠黏膜的形态变化。【结果】试验共鉴定出123个差异表达基因,其中上调70个,下调53个;GO功能富集分析发现,与物质转运、细胞活力和抗氧化应激相关的功能基因显著或极显著富集(P<0.05;P<0.01);KEGG通路富集分析显示,注释到维生素、氨基酸和O-聚糖的生物合成以及apelin信号通路的相关基因最为丰富。与对照组相比,试验组肉鸡盲肠黏膜中屏障功能相关蛋白如密封蛋白2(Claudin 2)、Claudin 15、Claudin 19、Claudin 23和紧密连接蛋白1(TJP 1)、TJP 2、TJP 3以及黏蛋白1(Mucin 1)基因的相对表达量显著或极显著增加(P<0.05;P<0.01);试验组盲肠黏膜HE和PAS染色镜检显示其肠腺深度、黏膜层厚度和肌层厚度以及杯状细胞的数量和密度均高于对照组。【结论】饲喂丁酸梭菌能够提高肉鸡盲肠黏膜的转运功能,增强抗氧化应激能力以及肠黏膜屏障功能,从而改善肠道健康和促进生长性能。

白头翁散煎剂发酵物对感染猪流行性腹泻病毒仔猪肠道屏障功能的影响

试验旨在研究白头翁散对感染猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)仔猪肠道屏障功能的影响。将24头7日龄体重相近的仔猪(杜×长×大)随机分为4组,分别为对照组、PEDV组、煎剂组和发酵组。试验期为12 d,第4天,对照组仔猪接种生理盐水,其他3组仔猪每头以10~(4.5)TCID_(50)(50%组织培养感染剂量)的剂量接种PEDV(HN2021),第5~9天,煎剂组和发酵组仔猪每天灌服煎剂和发酵液(0.2 mL·kg^(-1))。评估仔猪的生长性能、腹泻指数、病毒拷贝量、肠道细菌组成、肠道形态、肠道屏障功能,以及血清和肠道中的抗氧化指标。结果表明:煎剂和发酵液可显著提高PEDV感染仔猪平均日增重(average daily gain,ADG),降低腹泻率,抑制肠道内病毒复制(P<0.05),还可调节肠道细菌组成,显著提高乳酸杆菌和双歧杆菌数量(P<0.05);给药缓解了PEDV感染造成的仔猪肠道绒毛高度(villus height,VH)显著下降和隐窝深度(crypt depth,CD)增加,改善肠道形态,显著提高血清中D-木糖含量,降低肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)浓度,从而增强肠道屏障功能(P<0.05)。此外,煎剂和发酵液可降低氧化应激,表现为总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性显著升高,丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。这些数据表明白头翁散可增强感染PEDV仔猪的肠道屏障功能。

基于ISSA-ELM的煤与瓦斯突出危险等级预测

为提高煤与瓦斯突出危险等级预测的准确性,提出改进麻雀搜索算法(ISSA)优化极限学习机(ELM)的煤与瓦斯突出预测模型。首先,选用60组煤与瓦斯突出数据作为数据样本,采用主成分分析法(PCA)对其影响因素进行降维处理。然后,利用ISSA算法优化ELM算法的参数,建立ISSA-ELM模型。最后,选取样本后15组作为测试样本来验证模型的有效性,并与其他模型进行对比。研究结果表明:ISSA-ELM模型具有预测准确率更高、收敛速度更快和稳定性更佳等优点。研究结果可为煤与瓦斯突出危险等级准确判别提供参考。

降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇菌株的筛选与鉴定

本试验旨在筛选能够降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的微生物,应用于DON的脱毒。试验以DON为唯一碳源,从土壤、鸡和猪粪便等样品中筛选可以降解DON的菌株。选取其中降解率最高的菌株,通过细菌形态学、生理生化特征、16S rRNA以及特异性基因gyrB序列测定进行菌株鉴定,并探究其降解DON活性成分,以及DON的降解产物对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)活力和凋亡的影响。结果表明:1)从小麦田土壤样品中分离出了1株能够降解DON(1μg/mL)的菌株,在37℃培养96 h后对DON的降解率为60.77%,经鉴定并命名为解淀粉芽孢杆菌H7(Bacillus amyloliquefaciens H7)。2)解淀粉芽孢杆菌H7菌株主要通过分泌胞外酶降解DON。3)在CCK-8试验中,处理IPEC-J2细胞24和48 h后,0.5和1.0μg/mL DON降解产物组细胞存活率极显著高于DON组(P<0.01);在细胞凋亡试验中,处理IPEC-J2细胞24和48 h后,0.5μg/mL DON降解产物组细胞早期凋亡率和总凋亡率都显著低于DON组(P<0.05)。综上所述,本试验筛选到1株可降解DON的解淀粉芽孢杆菌H7,其活性物质胞外酶主要分布在细菌培养液上清中;DON经降解后对猪小肠上皮细胞的毒性降低。

响应面法优化玉米赤霉烯酮降解菌及其硫酯酶的发酵工艺

为提高解淀粉芽孢杆菌和硫酯酶的产量,试验以活菌量和芽孢量为指标,采用响应面分析方法对解淀粉芽孢杆菌H6的发酵工艺进行了优化,同时应用qPCR法对硫酯酶基因mRNA表达水平和蛋白质活性进行评估,并测定其对玉米赤霉烯酮的降解活性。结果表明:通过单因素试验筛选出培养基组成的最优碳源、氮源、无机盐分别为可溶性淀粉、酵母浸粉、MgSO_(4)。可溶性淀粉浓度、酵母浸粉浓度、发酵时间是发酵的关键因素。培养基和发酵工艺的最优参数为可溶性淀粉32.16 g/L,酵母浸粉16.27 g/L,MgSO_(4) 10.00 g/L,发酵时间39.28 h,初始pH 5.0,接种量1%,摇床转速200 r/min,发酵温度37℃。在摇瓶中解淀粉芽孢杆菌H6活菌生物产量达到6.33×10^(9)CFU/mL,50 L发酵罐验证活菌产量达到1.09×10^(10)CFU/mL。通过响应面法优化了解淀粉芽孢杆菌H6的发酵工艺,与初始培养基相比,发酵水平显著提高(P<0.05),硫酯酶活性显著升高(P<0.05)。

急性硬膜下血肿术后继发脑梗死的相关危险因素分析

目的探讨急性硬膜下血肿术后继发脑梗死的相关危险因素。方法回顾性分析2020-03—2023-03河南省直第三人民医院神经外科行血肿清除术的210例急性硬膜下血肿患者的临床资料。男154例,女56例;平均年龄54.25岁(范围41~74岁)。将术后发生继发脑梗死的患者作为发生组,将术后未发生继发脑梗死的患者作为未发生组。收集统计患者的性别、年龄、术前时间、脑疝、术前瞳孔变化、中线位移、基底池形态、血肿体积、围术期血压、手术时间、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、血肿厚度等信息,分析急性硬膜下血肿术后继发脑梗死的危险因素。结果210例患者中术后发生继发脑梗死20例(9.52%)。单因素分析结果显示,2组患者的术前时间、脑疝、术前瞳孔变化、中线位移、基底池形态、血肿体积、围术期血压、GCS评分等差异均有统计学意义(P均<0.05)。Logistic回归分析结果显示,术前时间>6 h、脑疝、术前瞳孔变化、中线位移≥10 mm、基底池形态、血肿体积>60 mL、围术期血压、GCS评分是术后发生继发脑梗死的危险因素(P<0.05)。结论术前时间>6 h、脑疝、术前瞳孔变化、中线位移≥10 mm、基底池形态、血肿体积>60 mL、围术期血压、GCS评分均是急性硬膜下血肿术后继发脑梗死的危险因素,临床需结合相关危险因素采取相应措施,以降低术后继发脑梗死的发生风险。

猪干扰素α和γ在杆状病毒中共表达及对PRRSV抑制作用

【目的】制备复合型猪干扰素α和γ进行应用抗病毒研究。【方法】本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码猪干扰素α和γ成熟蛋白基因插入供体质粒pFastBacDual,分别置于PH和P10启动子控制下,引入蜂素信号肽(honeybee melittin signal peptide,HBM)基因取代猪干扰素α和γ原有信号肽基因以实现分泌型表达,并在C端分别融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组杆状病毒感染昆虫细胞,鉴定重组蛋白的活性。【结果】通过间接免疫荧光、Western-blot证明猪干扰素α和γ重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中均获得表达,表达产物主要分布在培养上清中。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到3.24×107 U.mL-1。在Marc-145细胞,昆虫细胞上清经2-11稀释能够抑制100个TCID50的PRRSV的致细胞病变作用。【结论】应用杆状病毒表达系统实现猪干扰素α和γ在昆虫细胞上分泌共表达,重组蛋白在细胞上对PRRSV具有抑制作用。

猪干扰素α在昆虫细胞中分泌表达及其抗病毒活性检测

【目的】为获得重组猪干扰素α。【方法】本研究应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟猪干扰素α基因插入供体质粒pFastBacⅠ多克隆位点,置于pH启动子控制下,昆虫可识别的蜂素信号肽(honeybeemelittinsignalpeptide,HBM)取代猪干扰素α原有信号肽以实现分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10感受态细胞进行同源重组,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组穿梭质粒Bacmid,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。【结果】重组蛋白通过间接免疫荧光、Western-blot证明重组蛋白在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中获得分泌表达。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性,结果表明:昆虫细胞上清的抗病毒效价达到1.07×105U·ml-1,昆虫细胞裂解液的抗病毒效价为3.15×104U·ml-1。【结论】应用蜂素信号肽实现猪干扰素α在昆虫细胞上分泌表达,为临床上防治猪病毒性疫病奠定了基础。

骶3神经电针治疗脊髓损伤后逼尿肌反射亢进的临床效果

目的观察骶3神经根电针治疗脊髓损伤后逼尿肌反射亢进的疗效。方法采用骶3神经根电针治疗脊髓损伤后逼尿肌反射亢进的患者32例,观察治疗前和治疗8周后的排尿日记、尿动力学检查和生活质量评分。结果治疗后,患者排尿次数、漏尿次数、充盈末期逼尿肌压减少(P<0.05),残余尿量无明显改变(P>0.05),排尿量、最大膀胱容量、膀胱顺应性、生活质量评分较治疗前改善(P<0.05)。结论骶3神经根电针治疗脊髓损伤后逼尿肌反射亢进疗效满意。

固始鸡白细胞介素2基因的克隆、表达及其表达蛋白活性的检测

参照GenBank上已发表的鸡白细胞介素2序列设计引物,运用RT-PCR技术,从经ConA诱导的 20～35日龄固始鸡脾细胞总RNA中扩增出目的片段,IL-2基因,将其插入到pGEM-T载体上,构建了克隆质粒 pGEM-T-chIL-2。测序结果表明,本试验克隆的固始鸡白细胞介素2基因与GenBank上已发表的序列相比,存在2 个核苷酸变异。重新设计表达引物,以克隆质粒pGEM-T—chIL一2为模板PCR扩增表达片段,对表达片段进行 Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切,连接到作同样双酶切的pET28a表达载体上,鉴定后转化大肠杆菌BL21并进行IPTG 诱导表达,然后对表达产物进行SDS-PAGE电泳鉴定,结果表明,表达蛋白主要以包涵体的形式存在,表达蛋白分子质量约为18 ku;目的蛋白表达量占总量的18％。体外活性检测表明,重组蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性。

转移因子与重组转移因子及其在疾病防治中的应用

转移因子是来自于免疫淋巴细胞的一类可透析小分子多肽,它能够将致敏淋巴细胞的免疫信息传递给未致敏的受体淋巴细胞。转移因子具有特异性和非特异性免疫活性,特异性转移因子具有转移特异性细胞免疫的能力,非特异性转移因子具有促进淋巴细胞活化增殖,增强其免疫活性,并可诱导靶细胞产生大量的细胞因子。重组转移因子是利用基因工程技术将编码具有免疫增强活性的转移因子基因,进行克隆和体外表达,表达产物经纯化制备而成,试验表明其具有增强细胞免疫活性的作用。转移因子和重组转移因子是一种具有免疫增强活性的新型高效安全的生物药品,在临床上用于疾病的防治,具有广阔的应用前景。

参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜通道蛋白的影响及机制研究

目的探讨参苓白术散对腹泻幼鼠模型肠黏膜通道蛋白的影响及机制。方法将腹泻幼鼠模型(n=42,采用番泻叶药液灌胃进行建模)随机平分为三组,分别为模型组、低剂量参苓白术散组、高剂量参苓白术散组,三组分别给予参苓白术散0.0 g/kg(即0.9%氯化钠溶液)、1.2 g/kg、4.6 g/kg灌胃治疗,给药体积均为10 mL/kg,连续用药14 d,检测幼鼠肠黏膜通道蛋白-水通道蛋白8(AQP8)、跨膜转运蛋白钠氢交换体3(NHE3)囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)表达变化情况,观察幼鼠体质量、尿液乳果糖和甘露醇比值、小肠组织绒毛长度等变化情况。结果低剂量参苓白术散组、高剂量参苓白术散组治疗第7天、第14天的幼鼠体质量明显高于模型组(P<0.05),腹泻指数与模型组相比明显降低(P<0.05),高剂量参苓白术散组与低剂量参苓白术散组对比,差异有统计学意义(P<0.05)。低剂量参苓白术散组、高剂量参苓白术散组治疗第7天、第14天的尿液乳果糖和甘露醇比值明显低于模型组(P<0.05),高剂量参苓白术散组也低于低剂量参苓白术散组(P<0.05)。低剂量参苓白术散组、高剂量参苓白术散组治疗第14天的小肠组织绒毛长度高于模型组(P<0.05),隐窝深度明显低于模型组(P<0.05),高剂量参苓白术散组与低剂量参苓白术散组对比,差异有统计学意义(P<0.05)。低剂量参苓白术散组、高剂量参苓白术散组治疗第14天的小肠组织AQP8蛋白、NHE3蛋白相对表达水平高于模型组(P<0.05),CFTR蛋白相对表达水平低于模型组(P<0.05),低剂量参苓白术散组与高剂量参苓白术散组对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参苓白术散在腹泻幼鼠模型中的应用能促进体质量的恢复,降低尿液乳果糖和甘露醇比值与腹泻指数,还可延长小肠组织绒毛长度与降低隐窝深度,同时可促进小肠组织AQP8蛋白、NHE3蛋白的表达,抑制CFTR蛋白的表达。

酶标兔抗鸡IgG的制备

无菌采健康鸡心脏血 ,辛酸—硫酸铵法提取血清IgG ,SephadexG2 5柱层析 ,SDS -PAGE电泳检测IgG纯度 ,分光光度计测定含量 ,透析袋浓缩。与福氏完全佐剂和不完全佐剂乳化后 ,免疫 4只雄性健康家兔 ,1 0d心脏采血。用同样方法纯化兔IgG。过碘酸钠氧化法标记辣根过氧物酶 ,即得酶标兔抗鸡IgG。

实时荧光核酸恒温扩增检测技术在泌尿生殖道淋病中的应用

目的探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)检测泌尿生殖道淋病的灵敏度、特异度以及监测疗效的实用性。方法回顾性分析12 816例因怀疑泌尿道淋球菌感染需行淋球菌检测受试者临床资料,其中淋球菌培养检测6 323例,基于SAT开发的淋球菌核酸检测试剂盒(NG-SAT)检测7 107例,比较2种检测方法的阳性率;再以淋球菌培养法为金标准,计算同时行以上2种检测的614例患者NG-SAT检测尿液样本的灵敏度和特异度;对2种检测结果有差别的标本,进行荧光定量DNA杂交及聚合酶链反应法(FQ-PCR)复测与分析;对检测结果阳性的患者进行头孢曲松治疗,待症状消失后3d再次行以上2种检测。结果 NG-SAT检测尿液标本的灵敏度为100.0%,特异度为98.2%。2种检测结果有差别的标本7份,均为SAT检测阳性、淋球菌培养阴性;FQ-PCR复测结果显示6份阳性、1份阴性。179例患者经头孢曲松治疗后,NG-SAT检测阳性15例,淋球菌培养阳性7例。结论 NG-SAT检测尿液中淋球菌简便、准确,且能准确判断预后,值得临床推广应用。

基于网格搜索和ELM的冲击地压危险等级预测

为提高冲击地压危险等级预测模型的泛化性能及预测精度,采用网格搜索法结合十折交叉验证法对极限学习机(ELM)中的隐含层神经元个数及激活函数的类型进行组合优化,进而建立冲击地压危险等级预测模型;选取重庆砚石台煤矿36组实测数据进行试验,对影响因素数据进行标准化处理,选择其中26组样本对模型进行训练,采用该模型对后10组样本中冲击地压危险等级进行预测,并与其他方法作对比。结果显示:经过十折交叉验证,用该模型得到的正确识别率为84.615%,高于朴素贝叶斯及Adaboost M1的76.92%、61.54%,采用该模型对测试样本集中冲击地压危险等级进行预测,预测准确率为90%,高于朴素贝叶斯及Adaboost M1预测准确率80%。