中学英语教学中文化意识培养的途径

《全日制普通高级中学英语课程标准》（实验稿）指出：在英语学习的较高阶段,要通过扩大学生接触异国文化的范围,帮助学生拓展视野,使他们提高对中外文化异同的敏感性和鉴别能力,进而提高跨文化交际能力。通过学习英语了解世界文化,培养世界意识;通过中外文化对比,加深对祖国文化的理解,树立正确的人生观、价值观、世界观,增强社会责任感,全面提高人文素养。根据这一要求,教师除了要教授语言知识外,还应该适时、适度地导入相关文化知识,培养学生文化意识。

猪圆环病毒3型TaqMan-MGB荧光定量PCR方法的建立及应用

为建立猪圆环病毒3型(PCV3)荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中PCV3基因序列设计特异性引物和探针,经过反应体系和条件优化,建立了特异性检测PCV3的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法。该检测方法在4.78×10~1拷贝/μL～4.78×10~9拷贝/μL质粒标准品范围内均有良好的线性关系;该方法特异性试验结果显示,其与多种常见猪病病毒均无交叉反应,特异性良好;本研究建立的方法敏感性是常规PCR方法的100倍,敏感性较高;批内批间重复性试验变异系数均小于2.3%,重复性良好。对临床样品的检测结果显示,该方法对PCV3的检出率高于常规PCR方法,并且PCV3阳性样品多存在混合感染情况。该方法的建立为PCV3的实验室诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。

猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan-MGB实时荧光定量RT-PCR方法的建立及应用

为了快速、准确地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV),本研究根据PRRSV基因序列设计特异性引物和探针,建立了一种可同时检测PRRSV经典毒株、高致病性变异毒株以及近几年中国新出现的NADC30-like毒株的TaqMan-MGB实时荧光定量方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行验证,同时用建立的实时荧光定量方法与常规PCR方法对临床收集的120份疑似PRRSV样品进行检测。结果表明,该方法特异性良好,对PRRSV的经典毒株、高致病性变异毒株及NADC30-like毒株均有良好的扩增,但对猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性,无交叉反应;模板浓度在101～108拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,标准曲线结果显示其扩增的相关系数为0.9999,扩增效率为93%;敏感性高,约是常规PCR方法的100倍,最低可以检测到101拷贝/μL的模板;重复性好,批内和批间重复性试验变异系数分别为0.17%～0.90%和0.65%～2.34%;用本研究所建立的实时荧光定量检测方法对120份临床样品进行检测,PRRSV阳性检出率为59.2%(71/120),而常规PCR方法的PRRSV阳性检出率为44.2%(53/120)。该方法的建立为PRRSV的实验室诊断、流行病学调查,以及预防和控制中国PRRSV的流行提供了快速、准确的检测手段。

猪圆环病毒3型PCR检测方法的建立与应用

为了快速、准确地对新出现的猪圆环病毒3型（PCV-3）进行检测,试验根据GenBank中PCV-3核苷酸序列设计上、下游引物,建立了一种快速检测PCV-3的PCR检测方法并对该方法的特异性、敏感性进行验证。同时用该方法对临床可疑样品进行检测,并对检测结果进行测序验证。结果表明：该方法具有良好的特异性,与其他猪病病毒均无交叉反应;同时该方法敏感性高,最低检测限可达4. 21×103copies/μL。运用建立的检测方法对2017年收集的47份临床样品进行检测,结果 PCV-3阳性率约为15%,检测结果与测序结果一致。说明所建立的PCV-3 PCR检测方法可用于临床样品的检测。

牛结合珠蛋白α链单克隆抗体制备及辣根过氧化物酶标记

为了制备牛结合珠蛋白主要抗原区重组蛋白(pir Bo Hp)单克隆抗体及对其进行辣根过氧化物标记。试验利用纯化的pir Bo Hp作为免疫原,免疫雌性BALB/c小鼠,然后利用淋巴细胞杂交瘤技术,制备Bo Hp单克隆抗体。通过Western blot试验分析制备的Bo Hp单克隆抗体的免疫反应性;利用抗体亚型鉴定试剂盒,分析鉴定Bo Hp单克隆抗体的亚型和轻链型。利用改良过碘酸钠标记法,对制备的Bo Hp单克隆抗体进行辣根过氧化物酶(HRP)标记。结果显示,试验成功制备了4株Bo Hp单克隆抗体,分别命名为1B3、6D6、6D3和6B7。Western blot结果显示,制备的4株Bo Hp单克隆抗体1B3、6D6、6D3和6B7能识别牛血浆中天然Bo Hp的α链。进一步抗体亚型鉴定结果表明,1B3、6D6、6D3和6B7抗体亚型均为Ig G1,轻链型为kappa链。利用改良过碘酸钠标记法,对纯化的Bo Hp单克隆抗体1B3、6D6、6D3和6B7成功进行了HRP标记。Bo Hpα链单克隆抗体的制备及其HRP标记为Bo Hp特异性诊断方法的建立奠定了基础。

猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为了检测猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus 2,PCV2)并对其进行准确定量,试验根据PCV2基因序列设计引物和探针,建立了一种特异性检测PCV2的TaqMan荧光定量方法。结果表明:该方法特异性良好;在5.0×10~1～5.0×10~9拷贝/μL模板范围内具有良好的线性关系;敏感性是常规聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法的100倍;重复性试验变异系数小于1.5%。与常规PCR方法相比,该方法对临床样品的检出率更高。该方法的建立为PCV2的实验室诊断、流行病学调查以及研究PCV2核酸载量与临床致病性关系提供了快速、准确的检测依据。

供应链融资监管业务财务风险浅析

供应链融资监管业务作为物流业务模式的延伸和物流增值服务,不仅为传统的物流企业带来新的利润增长点,也促使其向现代化物流企业转变。但是作为新的物流增值服务,其业务运营的一个重要核心就是风险控制,笔者从目前该业务所面临的财务风险分析着手,提出了一些风险防范措施,希望通过不断探索与实践,在物流的差异化经营之道上开辟出一片广阔的前景。

经济增加值在全面预算管理中的应用

本文从经济增加值在概念上的优越性着手,探讨其在全面预算管理中的具体应用。

航运企业集团有效实施全面预算管理探讨

全球经济危机带来我国进出口贸易明显下降,国内航运企业深受冲击,如何提升企业管理水平,确保持续发展是每个企业面临的新课题。笔者将从全面预算的特点出发,在分析目前航运企业集团全面预算存在问题的基础上,提出提高全面预算管理水平的一些浅见。

猪δ冠状病毒TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用

为了快速准确地检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),本研究根据PDCoV基因序列保守区设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,建立了一种特异性检测PDCoV的TaqMan-MGB荧光定量方法。结果显示,该方法特异性良好,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型等的检测结果均为阴性,无交叉反应;模板浓度在3.15×108～3.15×101copies/?L范围内具有良好的线性关系;敏感性高,最低检测限为10 copies/?L的模板;重复性好,批内和批间重复性试验变异系数分别为0.25%～1.06%和0.58%～1.27%;对临床样品的检测结果显示,本研究建立的荧光定量检测方法对PDCoV的阳性检出率(40%)高于常规PCR方法对PDCoV的阳性检出率(31.7%)。该方法的建立为PDCoV的实验室鉴别诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。