驱动蛋白家族成员15(KIF15)对肝细胞癌增殖能力的影响及其作用机制

目的探究驱动蛋白家族成员15(KIF15)对肝细胞癌(HCC)增殖能力的影响及其作用机制。方法通过分析TCGA和GEPIA数据集确定KIF15在HCC中的表达情况以及对肿瘤分期、生存的影响。采用qRT-PCR和Western Blot检测体外培养的人源HCC细胞系(HepG2、Hep3B、MHCC-97H和LM3)与人正常肝细胞系L02细胞的KIF15表达水平,并选择Hep3B和HepG2进行后续研究。通过对Hep3B慢病毒转染sh-NC/sh-KIF15和对HepG2慢病毒转染LV-vector/LV-KIF15进行CCK-8、平板克隆和EdU染色实验评估细胞的活力和增殖能力。GSEA分析KIF15与HCC相关的作用信号通路并通过Western Blot进行检测。计量资料两组间比较采用成组t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果TCGA和GEPIA数据集分析结果显示KIF15在HCC患者癌组织中的表达明显高于正常组织,并且KIF15与HCC分期成正比,KIF15高表达的HCC患者的生存更差。与sh-NC-Hep3B相比,sh3-Hep3B的KIF15 mRNA水平和蛋白水平均下降(P值均<0.05);与sh-NC-Hep3B相比,sh3-Hep3B的细胞活力、克隆形成数和EdU阳性率均显著降低(P值均<0.05)。与vectorHepG2相比,LV-KIF15-HepG2的KIF15 mRNA水平和蛋白水平均升高(P值均<0.05);与vector-HepG2相比,LV-KIF15-HepG2的细胞活力、克隆形成数和EdU阳性率均提高(P值均<0.05)。皮下瘤实验结果显示:与sh-NC-Hep3B相比,sh3-Hep3B的瘤体积和瘤重量降低;Ki67的组化评分降低,而TUNEL的组化评分提高(P值均<0.05)。GSEA分析显示在HCC中PI3K/AKT/mTOR通路与KIF15呈正相关(NES=1.59,P<0.001),Western Blot检测发现LY294002能够抑制LV-KIF15-HepG2中上调的PI3K/AKT/mTOR通路,与LV-KIF15-HepG2相比,LY294002+LV-KIF15-HepG2的细胞活力、克隆形成数和EdU阳性率降低(P值均<0.05)。结论KIF15通过上调PI3K/AKT/mTOR信号通路增强HCC的活力和增殖能力。

肝癌微环境中肿瘤相关巨噬细胞的研究进展

由于肝细胞癌早期临床症状不明显,患者确诊时大多已发展到晚期阶段。错失最佳手术机会的肝癌患者治疗手段有限,因此寻找新的治疗靶点变得十分重要。肿瘤相关巨噬细胞(TAM),是存在于肿瘤免疫微环境中一群巨噬细胞,影响着肝癌细胞的各种恶性行为和肿瘤内的免疫逃逸状态。介绍了TAM的起源和分类,归纳了TAM在肝癌血管增生、侵袭转移、干细胞特性的形成和维持、以及抗肿瘤免疫中的作用和机制,简述了当前针对TAM的治疗靶点的研究进展等,认为靶向TAM可能是一个有前景的临床治疗方向。

简单炎症相关指数在肝癌肝移植预后预测中的价值

肝移植是肝细胞癌重要的治疗方式,但术后的复发率仍偏高。全身炎症反应可以通过一些常见的血清学指标包括中性粒细胞、淋巴细胞、血小板、C反应蛋白及以上述因子构建的简单炎症指数来反映。这些炎症相关指数对接受肝移植的肝癌患者预后具有重要预测意义。本文就目前常用的系统性炎症指标如中性粒细胞-淋巴细胞比值、血小板-淋巴细胞比值、淋巴细胞-单核细胞比值、系统性免疫炎症指数、预后营养指数、格拉斯哥预后评分在肝癌肝移植预后中的价值作一综述。

超声造影检测肝癌高危患者早期微小肝癌的影像学比较研究

目的:分析超声造影检测肝癌高危患者早期微小肝癌的影像学比较情况。方法:选择我院2013年6月至2018年9月在我院长期随诊的185例肝癌高危患者,分析患者肝内微小结节的常规超声和超声造影检查资料,分析≤2.0cm肝内实质性小病灶的实时超声造影结果。结果:185例肝癌高危患者经超声造影诊断共发现24例(24灶)微小肝癌患者,其中18例表现为"快进快出"增强模式(占75.0%),经手术及病理证实其中15灶为中度分化癌,2灶为高度分化癌,1灶为透明细胞癌,6例表现为"快进同出"增强模式(占25.0%),经手术及病理证实其中5灶为高度分化癌,1灶为透明细胞癌;透明细胞癌开始增强时间明显迟于中度分化癌及高度分化癌,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),高度分化癌的开始消退时间明显迟于中度分化癌,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:超声造影可观察到微小肝癌患者肿瘤内的血流灌注过程,显示不同分化程度的肝肿瘤增强方式及灌注特点,有助于提高患者肝硬化背景下微小肝癌的诊断率。

叹息式咳嗽训练对肝癌患者肝部分切除术后排痰的改善效果分析

肝癌可分为原发性和继发性两大类,目前,手术切除是治疗肝癌的首选方式,也是最为有效的方法,常见术式包括根治性肝切除、姑息性肝切除等[1]。调查显示,超过20%的患者肝部分切除术后会出现肺部感染,这是上腹手术术后的常见并发症,而咳痰是其有效的预防手段[2]。研究发现,采用传统咳痰法患者的配合度普遍不高,且医护人员需花费大量的精力敦促,加之咳痰瞬间产生的爆发性疼痛容易使患者产生畏惧心理,阻碍有效咳痰[3],因此,寻求新型的干预方式势在必行。叹息式咳嗽训练利用咳嗽反射,通过一系列准备待痰液上达咽喉部时使患者自然咳出,相比于传统方式,对气管产生的刺激更小[4]。本研究旨在探究叹息式咳嗽训练在肝癌患者肝部分切除术后排痰中的应用效果,现报告如下。

肝胆恶性肿瘤手术患者心理焦虑列线图预测模型的构建

目的:调查肝胆恶性肿瘤手术患者心理焦虑影响因素,分析心理焦虑的风险指标,构建列线图模型,并对模型进行验证。方法:纳入2021年1月至2022年10月因肝胆恶性肿瘤在某三级甲等医院肝胆外科住院手术患者162例,在患者出院时进行医院焦虑抑郁量表-焦虑分量表(HADS-A)问卷调查。依据调查问卷结果将患者分为无焦虑组(<8分)和有焦虑组(≥8分)。采用单因素分析、Logistic多因素回归及逐步回归分析,探索影响肝胆恶性肿瘤手术患者心理焦虑的危险因素,并构建可视化列线图预测模型。结果:162例患者参与问卷调查,99例(61.1%)存在焦虑。单因素分析结果显示:住院总时长、术后住院时长、肛门排气时间、患者本人对病情知情、疼痛评分、术后24 h内睡眠时间、下床活动时间、幸福指数、积极特质应对、消极特质应对、治愈疾病的信心、自然活动减少或受限、有无感到孤独或隔离感以及减压行为在两组患者间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),上述变量纳入Logistic多因素回归模型及逐步回归模型,两模型拟合指数(AIC)分别为157.54和139.89,经比较两模型间差异无统计学意义(χ^(2)=-12.349,P>0.05)。逐步回归分析结果显示患者本人对病情知情、疼痛评分、幸福指数、治愈疾病的信心、减压行为为独立风险因素,这5个影响因素转换为可视化列线图预测模型后,ROC曲线分析显示,曲线下面积(AUC)为0.907(95%CI 0.861~0.953),准确度为0.846(95%CI 0.781~0.898),Kappa值0.684。结论:本研究构建的列线图预测模型对肝胆恶性肿瘤手术患者心理焦虑有较好的预测效能,可以帮助临床医护人员快速识别患者心理焦虑的发生风险,为及时采取预见性管理措施提供借鉴。

肝癌微血管侵犯对预后的影响及基于γ-谷氨酰转肽酶-淋巴细胞比值预测评分模型的建立

目的研究肝细胞癌(HCC)微血管侵犯(MVI)对于患者肝切除术后预后的影响,评价术前γ-谷氨酰转肽酶-淋巴细胞比值(GLR)对MVI的预测价值。方法回顾性分析2004年7月至2016年8月南京鼓楼医院肝胆外科收治的455例因HCC行肝切除术患者的临床资料,采用单因素及多因素Cox比例风险模型分析影响患者无病生存期(DFS)及总生存期(OS)的独立危险因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析GLR对于MVI的诊断价值,并确定最佳临界值;使用单因素及多因素Logistic回归分析简单术前临床指标中肝细胞癌MVI的独立危险因素,建立预测评分模型。结果多因素Cox回归分析显示,肝硬化(HR=1.435,P<0.05)、切缘<1 cm(HR=1.691,P<0.01)、MVI阳性(HR=1.471,P<0.05)是DFS的独立危险因素,MELD评分≥9(HR=1.551,P<0.05)、切缘<1 cm(HR=2.477,P<0.01)、MVI阳性(HR=1.833,P<0.01)及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期(HR=1.622,P<0.05)是OS的独立危险因素。MVI阳性组手术切缘≥1 cm的患者术后DFS及OS均显著优于切缘<1 cm者(P<0.01),而MVI阴性组手术切缘对DFS及OS无显著影响(P>0.05)。ROC曲线分析提示,术前GLR对于MVI具有诊断价值(AUC=0.600,P<0.01),最佳临界值为42.75。多因素Logistic分析显示,肿瘤直径≥5 cm(OR=2.763,P<0.01)、多发肿瘤(OR=1.742,P<0.05)、甲胎蛋白(AFP)≥400μg/L(OR=1.817,P<0.01)、GLR≥42.75(OR=1.698,P<0.05)是MVI阳性的独立危险因素。以上述四危险因素构成的评分系统显示对于MVI有良好预测价值(AUC=0.696,P<0.01)。结论MVI阳性是HCC肝切除术后预后不佳的独立危险因素,较宽的切缘对于改善MVI阳性HCC患者预后具有重要意义。术前GLR是存在MVI的独立危险因素,与肿瘤直径、肿瘤数目及AFP共同组成的预测模型对于术前预估是否存在MVI,从而指导手术规划具有一定的参考意义。

芬戈莫德通过鞘氨醇-1-磷酸信号通路抑制肝癌细胞迁移的实验研究

目的探讨鞘氨醇-1-磷酸(SIP)信号通路及其抑制剂芬戈莫德(FTY720)在体外实验中对不同侵袭潜能人肝细胞癌(HCC)细胞迁移能力的作用。方法通过Real-time PCR和免疫印迹的方法比较低侵袭潜能HCC细胞MHCC-97L和高侵袭潜能HCC细胞MHCC-97H中S1P信号通路关键分子及下游促迁移信号通路的表达与活性水平。使用外源性S1P刺激MHCC-97L细胞,并使用siRNA干扰MHCC-97H细胞中S1P受体1(S1PR1)的表达,通过划痕愈合实验和Transwell实验检测HCC细胞迁移能力的变化。最后使用FTY720处理MHCC-97H细胞,观察S1P及其下游信号通路表达及活性的变化,并研究FTY720对MHCC-97H细胞迁移能力的影响。两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析。结果高侵袭潜能MHCC-97H细胞中,S1PR1、鞘氨醇激酶1(SphK1)及鞘氨醇激酶2(SphK2)的相对表达量分别为5.94±0.78、1.64±0.30及1.48±0.28,高于低侵袭潜能MHCC-97L细胞的1.00±0.06、1.00±0.06及1.00±0.09,差异具有统计学意义(t=10.96,3.575,2.841;P均<0.05)。MHCC-97H细胞中S1PR1、SphK1及SphK2的蛋白表达水平及活性以及S1PR1下游与细胞迁移能力密切相关的Src、粘着斑激酶(FAK)和Janus激酶2(JAK2)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路活性明显高于MHCC-97L细胞。外源性S1P可促进MHCC-97L细胞的划痕愈合能力。MHCC-97L的Transwell细胞迁移实验显示:S1P刺激组迁移过膜细胞数为(178.33±10.01)个/视野,显著多于空白对照组的(88.00±8.54)个/视野,差异具有统计学意义(F=116.60,P<0.01)。相反的,使用siRNA干扰MHCC-97H细胞中S1PR1表达后,细胞的划痕愈合能力受到明显抑制,Transwell实验显示:阴性对照组迁移过膜细胞数为(209.33±4.51)个/视野,而S1PR1特异性siRNA转染组迁移过膜细胞数为(98.67±9.02)个/视野,显著少于阴性对照组,差异具有统计学意义(t=19.01,P<0.01)。FTY720作为S1P通路抑制剂,同样抑制了MHCC-97H细胞的划痕愈合能力,Transwell实验同样显示:FTY720处理组迁移过膜细胞数为(58.67±6.03)个/视野,显著少于对照组的(203.33±10.41)个/视野,差异具有统计学意义(t=20.833,P<0.01)。FTY720的作用机制可能在于通过下调SphK1和S1PR1,抑制下游促迁移信号通路的活性,并进一步抑制HCC细胞的迁移。结论 S1P信号通路参与了HCC细胞的迁移,而FTY720作为一种具有抗HCC活性的免疫抑制剂,可能通过下调S1P及其下游信号转导,抑制HCC细胞的迁移能力。