甲型H1N1流感患者实验室指标变化与临床的关系

目的分析208例甲型H1N1流感患者实验室检测指标,探讨其变化特点对甲型H1N1流感诊断及评估病情发展变化的价值。方法在病程中进行血常规、肝、肾功能指标、T淋巴细胞亚群以及其他感染性实验室指标的检测。对检验结果进行回顾性总结和统计学分析。结果入院初期绝大多数患者红细胞、血小板计数在正常范围内;43.3%患者白细胞总数下降,有36.1%患者中性粒细胞和16.8%患者淋巴细胞数降低;入院初期绝大多数患者肝、肾功能生化指标正常,部分患者存在电解质紊乱;CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数下降比较显著,特别是重症患者,并在入院数天后降至极低值,又随病情好转而回升正常。结论 CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞及血常规检查的淋巴细胞计数,是甲型H1N1流感患者早期鉴别诊断以及病情严重程度的重要指标,动态观察其变化对患者的病情发展、疗效观察及预后判断等方面有重要的指导价值。

用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶

目的用欧蔓陀罗凝集素分离纯化人肝癌组织中强结合的γ-谷氨酰转移酶(γGT),为进一步制备其抗血清提供抗原,以期对肝癌早期诊断进行研究。方法人肝癌组织经匀浆、溶解、盐析、透析、层析等步骤进行分离纯化;纯化过程中用IFCC推荐方法测定洗脱物的γGT催化活性,用紫外法监测蛋白出峰图谱,用Lowry法测定蛋白含量。结果经过粗提、DEAE阴离子交换层析、凝胶过滤层析及凝集素亲和层析等纯化步骤得到电泳纯的γGT,其比活为10.56U/mg蛋白,纯化倍数为84.9,得率为1.60%。结论该分离纯化方法能够较好地分离纯化人肝癌组织中欧蔓陀罗凝集素强结合的γGT。

血清结缔组织生长因子对慢性肝病的诊断价值

目的观察肝病患者血清结缔组织生长因子(CTGF)变化,探讨其与肝纤维化形成的关系,寻找新的判定肝纤维化程度的指标。方法应用ELISA法测定313例肝病患者血清CTGF水平,用RIA法测定血清透明质酸、Ⅲ型前胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、层粘连蛋白。对其中45例慢性肝病患者进行肝穿刺组织病理学诊断,应用SPSS11.0统计软件分析CTGF等指标与肝纤维化分期的关系。结果血清CTGF的水平与慢性肝炎病情轻重程度有关,与肝组织病理学纤维化分期呈正相关,r=0.634。结论血清CTGF与肝纤维化的形成有密切关系,是评估肝纤维化程度(分期)的良好指标。

人肝癌组织中DSA强结合的γ-谷氨酰基转移酶单克隆抗体的制备

目的制备与欧蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰基转移酶(γGT)的单克隆抗体(mAb),并对抗体进行鉴定。方法以纯化的人肝癌组织DSA强结合的γGT为抗原,免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞融合,经ELISA筛选和有限稀释法获得稳定分泌mAb的细胞株。结果获得5株分泌抗DSA强结合γGT的mAb细胞株,其中3株分泌的mAb具有较高的特异性;ELISA法测定小鼠腹水mAb的效价≥625000;亚类鉴定mAb为小鼠IgG1。结论成功制备了抗DSA强结合γGT的单克隆抗体,为进一步建立免疫学检测方法奠定了基础。

两种pH值条件下CNBr活化Sepharose 4B偶联DSA方法的比较研究

目的研究碱性、中性两种条件下CNBr活化Sepharose 4B偶联欧蔓陀罗凝集素(DSA)的效果。方法在两种偶联条件下,通过改变CNBr用量、活化时间以及温度等条件,观察DSA的偶联率指标。结果碱性条件下,活化15 min即使增加CNBr用量至300 mg/ml凝胶,固定化凝集素偶联率没有提高,DSA偶联率较低,在29.1%~50.9%之间;中性条件下,CNBr用量仅为碱性条件下的20%,活化温度控制在-10^-20℃可能获得较好的活化效果,DSA偶联率在78.8%~80.9%之间。结论中性条件下CNBr活化Sepharose 4B偶联DSA,实验易于控制,DSA偶联率比较稳定,实验重复性好于碱性条件下的结果,且可获较高偶联率的DSA-Sepharose 4B。

磁性纳米颗粒Fe_3O_4@SiO_2的制备及在全血DNA提取中的应用

目的自制Fe_3O_4@SiO_2磁性纳米颗粒并评价在全血样本中DNA提取效果,进一步研究开发磁珠法检测HBV DNA的技术。方法采用溶剂热法自制Fe_3O_4磁性纳米颗粒,并用表面化学修饰法制备Fe3O4@SiO_2磁性复合颗粒;利用该颗粒经吸附、洗涤、洗脱等步骤提取全血样本中DNA,并通过电泳、PCR扩增等传统技术检测DNA提取效果,与煮沸法提取血清DNA样本的效果进行对比。结果成功制备出直径约550 nm的Fe_3O_4@SiO_2磁性纳米颗粒,该颗粒分散均匀;自制的磁性纳米颗粒可用于全血DNA提取与纯化,实验操作简便。自制磁性纳米颗粒提取全血DNA浓度为150.56 ng/μL,纯度为1.53;该提取方法与传统煮沸裂解法对96份样本进行对照研究,证实其灵敏度有较大提高。结论利用自制的Fe_3O_4@SiO_2磁性纳米颗粒和合适的缓冲液体系,可成功地提取纯度较高的DNA,通过PCR扩增及对比实验表明,该磁性纳米颗粒及其提取工艺经优化后,可用于传染病的体外分子诊断研究。

乙型肝炎实验室诊断的研究进展

我国HBV感染目前仍是较严重的公共卫生问题。及时、准确地实验室诊断对控制HBV传播、提高乙肝的诊疗效果十分重要。随着诊断技术的发展,临床医疗机构已广泛开展与HBV感染相关的实验室检测,对HBV感染的防治发挥了重要作用。但在实际应用中,仍存在一些应用不当或对结果误判等问题。本文扼要介绍HBV相关实验室检测技术,同时指出需要客观地评价及应用HBV相关实验室检测技术,以及存在的主要问题,进一步提高实验室数据的利用效率,改进病毒性肝炎的实验室诊断水平。

SARS隔离区内医务人员防护级别与防护效果分析

目的 探讨SARS隔离区内不同医务人员采取不同防护措施的效果。 方法 对进出SARS隔离区的医务人员 ,作血常规、T淋巴细胞亚群、SARS抗体以及胸部X光检查。 结果 血常规 :进入隔离区的 2 5 7名人员除 4人白细胞总数升高外 ,其余均正常 ;T淋巴细胞亚群及胸部X光检查均正常 ;SARSIgG抗体进隔离区前阳性率为 1.0 1% ,出隔离区人员为 0 .78% ,无统计学意义 (P >0 .75 )。IgM抗体进出人员均为阴性。 结论 在采取必要的个人防护措施后 ,进入隔离区的医务人员是安全的 ,未出现显性或隐性感染 ,说明防护措施正确有效。

肝病患者血清总胆汁酸水平测定及其判断意义

血清总胆汁酸（ＴＢＡ）是胆甾醇在肝内分解以及在肠肝循环中的一组代谢产物，其变化灵敏地反映肝实质损伤程度［１～５］，特别是在慢性肝病时［３，５］。现将２２９例肝病患者的测定结果分析报告如下。１对象与方法１．１以符合１９９５年北京第五次全国肝炎会议诊断标...

2例SARS患者实验室指标动态观察及其与临床的关系

目的 :动态观察 2例严重急性呼吸综合征 (SARS)患者实验室指标的变化 ,探讨其变化特点以及在评估SARS病情发展变化中的价值。方法 :在发病过程中抽取静脉血进行血常规、血生化指标以及T淋巴细胞亚群以及其他感染性指标的检测。结果 :2例SARS患者外周血白细胞计数入院后合并感染时出现过升高 ,后经治疗转为正常 ;嗜酸粒细胞变化符合急性传染病的变化规律 ,可用该指标判断预后 ;CD3 + 、CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞入院时均显著降低 ,并随病情好转而升高 ;血清生化指标中 ,入院时肝酶谱、心肌酶谱增高 ;冠状病毒变异株抗体在病程中出现 ,且IgM略早于IgG 1～ 2d出现。 结论 :CD3 + 、CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞及淋巴细胞比例 ,可能是反映SARS患者病情严重程度的重要指标 ,对其动态观察对SARS患者的病情发展、疗效观察及预后判断等方面具有非常重要的指导价值。

肝癌组织γ-谷氨酰转移酶单克隆抗体制备及ELISA方法的建立

目的应用纯化的人肝癌组织中蔓陀罗凝集素(DSA)强结合的γ-谷氨酰转移酶(GGT)制备单克隆抗体(McAb),并建立ELISA检测方法。方法应用亲和色谱法纯化肝癌组织中DSA强结合的GGT;采用单克隆抗体技术获得其McAb;protein A-Sepharose亲和色谱法纯化McAb,过碘酸钠法标记HRP法后建立ELISA方法。结果获得5株能特异性识别DSA强结合GGT的McAb细胞株,其中3株细胞所分泌McAb具有较高的特异性,应用所获得McAb进行HRP标记后,建立的ELISA方法,其检测灵敏度为10μg/L,批内及批间平均变异系数为8.9%和11.5%。结论成功制备了DSA强结合的GGT McAb杂交瘤细胞系,并建立了ELISA免疫学检测方法,为临床应用打下基础。

凝集素亲和层析分析血清GGT寡糖链结构

目的 用凝集素亲和层析法 ,探讨血清 GGT在各种肝病时其寡糖链的变化 ,寻找出肝癌特异性GGT寡糖链结构 ,为进一步建立简易、特异的小柱亲和层析法分离肝癌特异性 GGT奠定基础。方法 以唾液酸酶水解 GGT糖链末端的唾液酸 ,再用 DSA和 Con A亲和层析柱对各种肝病患者血清 GGT进行洗脱 ,结合两种凝集素结合糖链的特性 ,分析其糖链结构。结果 血清经唾液酸酶水解 ,再用两种凝集素亲和层析后 ,发现肝病患者 GGT糖链结构均有所变化。N糖链天线数 :肝癌 >良性肝病 >正常人 ,糖链末端唾液酸量 :肝癌 >良性肝病 >正常人。肝癌病人出现和 DSA强结合组分 ,该组分不被 Con A结合。结论 肝癌病人血清 GGT可出现和 DSA强结合的三天线或四天线 N糖链 ,可利用这一特点建立检测肝癌特异性 GGT的凝集素亲和小柱层析法。

用欧蔓陀罗凝集素分离肝癌血清γ-谷氨酰转移酶特异性糖链及其临床应用

目的 用欧蔓陀罗凝集素 (DSA)分离血清γ 谷氨酰转移酶 (GGT)糖链的强结合组份 ,观察正常人、良性肝病及原发性肝癌 (PHC)患者的变化 ,为建立小柱亲和层析法分离PHC特异性GGT糖链奠定基础。方法 以神经胺酸酶 (NMD)水解后的血清直接上DSA亲和层析柱 ,首先用0 0 5M醋酸洗去不结合和弱结合组份 ,再用 0 1M醋酸洗脱强结合组份 ,用连续监测法测定洗脱液的GGT活性变化。结果 正常人、良性肝病患者在 0 0 5M醋酸洗脱时可出现 1～ 2个峰 ,没有强结合峰。PHC除此之外还出现一个比例不大的强结合峰。结论 采用二步法洗脱DSA亲和层析柱 ,可以较好地分离出DSA强结合组份。该组份为PHC患者所特有 ,PHC患者有较高的阳性率(80 % )。

血清芳香基酰胺酶连续监测法测定

报道了血清芳香基酰胺酶的连续监测法。酶促反应最适pH为7．6，用0．1mol／LTris—HCl缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围0～400U／L。批内CV1．9％～2．5％，批间CV3．1％～3．8％。121例健康成人血清酶活性为23.8±6．0U/L（x±s），男女性别间无差异（P＞0．05）。临床初步应用表明肝胆疾病时明显升高，特别是肝内外胆道阻塞时升高幅度较大。