枸杞多糖对2,4-二氯苯氧乙酸染毒大鼠海马神经元凋亡的保护作用

目的探讨枸杞多糖(LBP)对2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)染毒初断乳大鼠神经行为和海马神经元细胞凋亡的保护作用。方法SPF级初断乳SD大鼠48只,雌雄各半,随机分为Control组、2,4-D组、LBP组和2,4-D+LBP组各12只,旷场实验、高架十字迷宫观察实验大鼠行为学变化,试剂盒测定大鼠血清抗氧化酶活性,HE染色观察大鼠海马CA3区锥体细胞的形态,TUNEL荧光染色法观察海马CA3区神经元凋亡,免疫组织化学方法检测海马组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果(1)2,4-D组大鼠脑重和脑脏器系数降低,大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,丙二醛(MDA)含量升高(P均<0.01);海马CA3区锥体细胞数减少,光镜下观察细胞间隙增宽,排列不整齐,细胞与周围组织联系疏松,部分胞核固缩呈三角形或不规则形;大鼠中央格停留时间延长,穿行格数、直立次数和修饰时间减少,进入开放臂次数减少,开放臂停留时间缩短,开放臂停留时间百分比降低(P均<0.05);(2)与2,4-D组比较,2,4-D+LBP组大鼠脑重和脑脏器系数增加,血清SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P均<0.01);海马CA3区锥体细胞数量较2,4-D组增多,部分细胞恢复正常形态(P均<0.01);中央格停留时间缩短,穿行格数、直立次数和修饰时间均延长,进入开放臂次数增多,开放臂停留时间延长,开放臂停留时间百分比升高(P均<0.05);(3)TUNEL染色结果显示,2,4-D组大鼠海马神经元阳性细胞数增多,细胞凋亡率升高(P均<0.01),2,4-D+LBP组凋亡细胞数少于2,4-D组,呈现绿色或淡绿色荧光;(4)免疫组织化学方法发现2,4-D组大鼠海马组织Bcl-2表达降低,Bax表达升高,Bcl-2/Bax比值降低(P均<0.05),2,4-D+LBP组大鼠海马CA3区Bcl-2表达升高,Bax表达降低,Bcl-2/Bax比值升高(P均<0.05),神经元染色以胞浆有棕黄色物质沉积为主,也有胞膜或核膜染色。结论2,4-D染毒大鼠表现出抑郁和焦虑状态,大鼠血清抗氧化酶活性降低,大鼠海马CA3区锥体细胞受损,引起海马神经元细胞凋亡,LBP具有抗氧化和抑制海马神经元细胞凋亡的作用。

浅谈高中生英语学习兴趣的激发

高中英语课程标准强调英语课程应该从学生的学习兴趣、生活经验和认知水平出发。英语教学要激发学生的学习兴趣,注重学生成功欲的培养;运用启发式教学培养学生的兴趣;营造活跃的课堂氛围;加强对学生学习理念更新的教育;创造良好的英语学习环境,有效促进学习兴趣的激发。通过这些途径,让高中英语教师教得开心,学生学得有信心。

枸杞多糖对2,4-二氯苯氧乙酸所致雌性大鼠生殖系统损伤的保护作用

[背景]2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)作为阔叶杂草除草剂和植物生长调节剂而被广泛应用,相关研究显示2,4-D具有神经毒性、内分泌干扰性、遗传毒性与致癌性以及生殖毒性等。[目的]了解2,4-D暴露对雌性大鼠生殖系统的影响,初步探讨枸杞多糖(LBP)的保护作用及可能机制。[方法]SPF级雌性SD大鼠24只,每组6只,随机分为空白对照组(去离子水1 mL·d^(–1))、染毒组(75 mg·kg^(-1)2,4-D)、枸杞多糖对照组(50 mg·kg^(-1) LBP)、枸杞多糖干预组(75 mg·kg^(-1)2,4-D+50 mg·kg^(-1) LBP)。每天经口灌胃1次,连续染毒28d。每隔2d测量体重1次,染毒结束后取卵巢及子宫组织称重并计算脏器系数;采用苏木精-伊红染色法(HE)检测卵巢及子宫组织病理改变;采用ELISA法检测血清中雌二醇(E2)水平;使用相关试剂盒测定血清中氧化损伤[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)]水平;TUNEL荧光染色法检测卵巢及子宫组织细胞凋亡情况;Western blotting法检测卵巢组织中死亡受体通路相关蛋白Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达量。[结果]与空白对照组相比,染毒组大鼠卵巢组织结构异常,处于不同发育阶段的卵泡数量减少,形态出现改变,且闭锁卵泡数量增多;子宫内膜不完整,可见内膜缺失,出现不同程度的胞核假复层现象,固有层腺体数减少。与染毒组相比,枸杞多糖干预组大鼠卵巢组织结构相对较完整,处于不同发育阶段的卵泡数量增加,结构相对完整,排列紧密;子宫组织结构相对较完整,内膜缺失现象及胞核假复层现象减少。各组间SOD、GSH-Px、E2水平,MDA浓度差异均有统计学意义(F=86.1、26.2、43.3、22.3,均P<0.01)。与空白对照组相比,染毒组血清SOD、GSH-Px、E2水平降低(P>0.01),MDA􀀁浓度增加(P>0.01);与染毒组相比,枸杞多糖干预组血清SOD、GSH-Px、E2水平升高(P>0.01),MDA􀀁浓度降低(P>0.01)。各组间卵巢及子宫组织细胞凋亡率差异均有统计学意义(F=64.8、55.5,均P<0.01)。与空白对照组相比,染毒组大鼠卵巢及子宫组织细胞凋亡率升高(P>0.01);与染毒组相比,枸杞多糖干预组大鼠卵巢及子宫组织细胞凋亡率降低(P>0.01)。各组间卵巢组织内死亡受体通路相关蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。与空白对照组相比,染毒组大鼠卵巢组织内Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达升高(P<0.05或0.01);与染毒组相比,枸杞多糖干预组大鼠卵巢组织内Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达降低(P<0.05或0.01)。[结论]2,4-D能够引起雌性大鼠发生氧化应激进一步介导Fas-FasL通路引发细胞凋亡而造成雌性大鼠生殖系统损伤。枸杞多糖能降低雌性大鼠氧化应激水平,下调Fas-FasL通路相关蛋白表达,减少生殖细胞凋亡,以达到生殖保护的目的。