基因修饰猪技术的应用与展望

基因修饰猪技术在人类生产和生活中发挥着越来越重要的作用。在农业领域,基因修饰猪模型主要应用于提高生长速度,改善肉质性状,增强抗病/逆能力,以及提高饲料转化率等重要经济性状领域研究。虽然至今为止,基因修饰猪技术并未在家猪育种领域有实质性贡献,但其发展的速度和取得的进展,是传统育种技术所不能企及。在医药领域,家猪在解剖与生理等方面与人类高度相似,通过对家猪某个(些)关键基因的遗传操作而获得疾病模型,在致病机理、治疗方案和新药开发中发挥的作用远远超过了啮齿类疾病模型。相信随着功能基因组的深入研究,更多的功能基因和调控元件被鉴定后,基因修饰猪必将为人类的农业生产与医药研发做出更大的贡献。

槐定碱通过靶向MAPKAPK2抑制人结直肠癌的发展

目的研究槐定碱对人结直肠癌发生发展的影响及其分子机制。方法利用CCK8,流式细胞术和免疫荧光等实验方法,阐明槐定碱对结直肠癌细胞增殖,自噬,凋亡和周期的影响。通过PharmMapper和KEGG databXase等网络药理学方法,发现槐定碱的潜在靶标。并利用CETSA,DARTS分析和蛋白质免疫印迹实验研究槐定碱对其靶标的影响。结果槐定碱能显著抑制结直肠癌细胞增殖和形成集落的能力。槐定碱在浓度为0~160μmol·L^-1范围内,呈剂量依赖调节细胞自噬、凋亡和周期的相关蛋白。槐定碱80~160μmol·L^-1处理的细胞进行流式细胞术检测,结果显示,槐定碱引起细胞G2/M期阻滞并促进细胞凋亡;细胞内LC3的免疫荧光显示,LC3明显上调,表明槐定碱促进结直肠癌的自噬。过表达MAPKAPK2能显著恢复槐定碱引起的细胞阻滞及自噬、凋亡的促进作用;siRNA敲低MAPKAPK2显示与槐定碱相似的作用,且同时敲低MAP⁃KAPK2和槐定碱处理后作用更加显著。通过临床数据分析,MAPKAPK2的高表达伴随着病人的预后不良。结论槐定碱通过靶向MAPKAPK2促进细胞自噬、凋亡和周期阻滞,从而抑制结直肠癌的发生与发展。

娃儿藤宁碱诱导肝癌细胞死亡及其作用机制

目的探讨娃儿藤宁碱调节肝癌的生长及分子作用机制。方法采用MTT和平板克隆形成实验检测娃儿藤宁碱作用对细胞活力及单细胞增殖能力的影响;DAPI染色、Western印迹分析和流式细胞技术检测娃儿藤宁碱对肝癌细胞凋亡的影响;免疫荧光染色检测娃儿藤宁碱对细胞自噬的影响;应用自噬抑制剂(Bafilomycin A1)抑制自噬探究对凋亡的影响;应用细胞热转变分析实验(CETSA)和药物亲和力反应靶标稳定性测定(DARTS)实验分析娃儿藤宁碱与蛋白激酶B(Akt)之间的结合关系,采用分子对接模拟娃儿藤宁碱与Akt之间的作用位点,利用Western印迹实验对其进行验证;将两种肝癌细胞系HepG2和Hep3B的Akt进行过表达,应用Western印迹和免疫荧光染色实验分析娃儿藤宁碱对肝癌细胞的凋亡、自噬的影响。结果娃儿藤宁碱显著下调肝癌细胞生存活力,降低单细胞增殖能力;显著改变凋亡相关蛋白PARP、活化胱天蛋白酶3、Bcl-2和Bax,自噬相关蛋白P62和LC3B的表达水平。在娃儿藤宁碱作用下,细胞活力进一步下降,单细胞增殖能力进一步降低,细胞凋亡进一步增加。娃儿藤宁碱可减缓链金霉素或温度对Akt蛋白的降解速度,娃儿藤宁碱可以直接与Akt的C端结构域结合,并可以显著抑制Akt的磷酸化(S308位点活性),表达Akt后,娃儿藤宁碱抑制的细胞活力有一定程度的恢复,凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白均有一定程度的逆转。结论娃儿藤宁碱通过促进肝癌细胞凋亡、诱导细胞自噬,进而发挥抗肝癌作用。

论《左传》的音乐美学思想

本文从《左传》入手,重点论述了其中蕴含的音乐美学思想。首先对中国音乐的起源与地位作了简要概括,强调中国古代礼乐一体、礼乐并重的特点,并由此进一步说明了中国音乐与诗歌、舞蹈之间的密切关系。同时,通过对《论语》中孔子有关音乐的论述进行分析,将其音乐思想的核心总结为"仁""和""善",这些思想又在《左传》中得到了充分体现。我们认为,《左传》音乐思想的主要特点体现为教化作用、等级观念、中和思想三个方面。从教化作用来讲,音乐在人的德行、礼仪、仁爱的建构上起着举足轻重的作用,音乐的教化作用在于稳固德行、安抚邦国;《左传》中音乐思想还表现为严格的等级观念,绝不允许僭越,有强烈的宗法色彩等特点。中和思想的深刻内涵就在于世事应和音乐一样有所节制,而中和之美是音乐弥久不衰的主题。

中药生物碱类成分的抗肿瘤药理作用研究进展

近年来,恶性肿瘤的发病率和死亡率逐年增加,严重威胁着人类健康。中药具有良好的抗肿瘤活性,在治疗恶性肿瘤方面有着疗效好、毒副作用小的优势,中药生物碱类成分更是近年来研究的热点,本文对中药生物碱类成分的抗肿瘤药理作用进行归纳总结,以期为今后生物碱的研究开发提供参考。

铁死亡调控机制及其在肝细胞癌中的研究进展

肝细胞癌是一种消化系统肿瘤,由于缺乏有效的治疗方法且频繁复发,因此存活率较低。而作为第一个被批准用于晚期肝癌的药物索拉非尼,虽然在一定程度上降低了肝细胞癌的死亡率,但其有严重的不良反应和新出现的耐药性,从而导致预后不良。近年来研究发现,铁死亡在肝细胞癌的发生、发展中起着重要作用。铁死亡是一种非凋亡调控细胞死亡的新方式,目前主要是通过脂质活性氧积累来触发铁死亡,在肝细胞癌的治疗中显示出巨大的优势。现就铁死亡的生化过程及其在肝细胞癌中的研究进展进行综述,为肝细胞癌的治疗提供新的方法与思路。

浅论中国书法艺术的文化特质

中国书法是以汉字为载体的视觉艺术,是汉字艺术化的再创造,是实用性与艺术性的高度统一。本文从造型艺术出发,揭示汉字蕴含的中国文化特质,分别阐述了儒家、道家、佛家文化在中国书法中的体现和运用,从视觉艺术的观照中感知深层的美学意义,从而揭示出中国书法艺术蕴含的丰富而广泛的人文情怀。

古汉语同义词辨析方法及其意义

本文通过对古汉语同义词辨析方法的探讨,旨在寻求扩大和正确区分古汉语词汇的方法,并达到准确阅读和理解古典文献、提高古汉语阅读水平的目的。汉语同义词探究的重要途径主要两个:一是“识其同”,二是“辨其异”。“识其同”主要从同义词对举规律、共时和历时同义词、社会因素(封建等级制度、方言等)造成的同义词、由结构对称或并列而成的同义词等几个方面,结合大量古籍中的例证进行了论述。在“辨其异”上,主要从词义使用范围大小、轻重程度、感情色彩、侧重点(所指对象)、语法功能、性质性状和用途等方面进行了详细阐述。要学好古代汉语,必须充分积累大量古汉语词汇,并掌握辨析同义词的方法,这样才能不断提高阅读古书的水平。

浅析李白诗歌中的道家、纵横家情结

本文对李白诗歌中所表现出来的道家思想、纵横家思想作一较完整的论述,主要论述李白道家思想的独特性和纵横家思想的经邦济世、积极进取的浪漫主义的显著特色,剖析了李白道家思想、纵横家思想形成的历史根源,以及两种思想形成的阶级基础,并探究这两种思想对李白青少年时期思想的形成产生的重大影响,并贯穿于李白的一生当中。本文揭示了李白道家思想、纵横家思想的独特性和超越性。突出地表现为他关心国事,对黑暗腐朽政治的揭露和鞭挞,抒写了对个性自由的追求和对封建伦理秩序的蔑视以及等级制度的强烈反抗,展现出李白心在道家、纵横家之内而身在道家、纵横家之外的超脱,出乎其类、拔乎其外,不囿于道家、纵横家的清规戒律,彰显自由奔放的浪漫主义本色。

脂蛋白脂酶缺失症基因治疗载体的构建及功能验证

脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)是甘油三酯分解的限速酶,LPL基因缺失会引起高血脂症,虽然发病率低,但到目前为止,尚无有效治疗手段。该文构建了用于纠正LPL缺失基因型的逆转录病毒载体MSCV-hLPL,结果表明,MSCV-hLPL可以高效侵染体外培养的细胞系C2C12、HEK293和3T3-L1,并且都可以产生具有活性的脂蛋白脂酶。利用MSCV-hLPL侵染后的C2C12、HEK293和3T3-L1,分别注射到裸鼠皮下组织,发现C2C12和3T3-L1可以分泌脂蛋白脂酶到临近的肌肉组织中,显著提高LPL活性。以上工作证明,基因治疗载体可以纠正脂蛋白脂酶缺失的基因型,而脂肪细胞和肌肉细胞移植入裸鼠体内后,均可以作为生物反应器产生具有活性的LPL。这是该领域中的一次开拓性尝试,为脂蛋白脂酶缺失症治疗方法的开发打下了坚实的基础。