鹅细小病毒vp基因片段的原核表达及抗血清的制备

以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-30a,阳性重组质粒经确证性序列测定,证明外源片断插入到pET-30a的预期位置。将其转入大肠杆菌BL21,经终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE表明外源基因获得表达,融合蛋白分子量约为34kDa。将诱导后的工程菌用6mol/L盐酸胍裂解,经超声处理后离心,利用镍离子亲和树脂对裂解产物的上清进行纯化。用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔制备兔抗该融合蛋白的抗血清。Westernblotting结果表明制备的兔抗血清与该融合蛋白及亲本病毒的结构蛋白都具有反应性。结合前期工作进展对GPVVP蛋白的B细胞线性抗原表位进行定位。

奶粉中测定微量元素样品前处理方法优化

样品的前处理技术对分析结果的准确性影响较大。本试验利用成功合成的磁性碳纳米复合材料为净化剂,联用电感耦合等离子体质谱法建立一种同时测定奶粉中5种微量元素的样品前处理方法。试验结果表明,方法的平均回收率为89.99%~92.17%,相对标准偏差<5%,最低检出限为0.025~0.086μg·mL^(-1)。与传统技术相比,优化样品前处理方法应用于奶粉中微量元素快速检测具有操作简单、吸附能力强、成本低等优势,实现了富集分离一体化。

苯醚甲环唑农药残留检测技术的研究进展

苯醚甲环唑是一种具有高效、广谱、低毒和内吸传导性强的三唑类杀菌剂,对作物具有保护和治疗作用,广泛应用于水果和蔬菜等农作物上。简述苯醚甲环唑的毒性和最大残留限量,综述苯醚甲环唑农药残留的固相萃取、液相萃取、分散固相萃取等样品前处理技术,重点总结气相色谱法、液相色谱法、质谱法、拉曼光谱、免疫分析法等检测技术在苯醚甲环唑农药残留分析中的应用及特点,并对其发展方向进行展望,为今后苯醚甲环唑农药残留的分析研究提供参考。

新型磁性介孔复合材料在绿叶菜有机磷农药残留样品前处理中的应用

该试验自主研发磁性纳米粒子负载十八烷胺功能化介孔碳复合材料,基于QuEChERS技术联合气相色谱-质谱联用仪开发一种绿叶菜有机磷农药残留量快速检测样品前处理方法。该磁性介孔复合材料的表面结构特征通过透射电子显微镜、X-射线衍射、磁强计、氮气吸附-脱附等手段进行了表征。实验结果表明,与传统的净化剂相比,该磁性介孔材料能够很好地消除基质干扰,提高检测效率,操作简单。绿叶菜基质中16种有机磷农药残留量在0.02~0.25μg/mL具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))在0.9943~0.9997,在0.02、0.05、0.10 mg/kg添加水平下,绿叶菜基质中16种有机磷农药平均回收率在81.3%~94.0%,相对标准偏差<10%,检出限为0.01~0.08μg/mL。将该方法应用于实际绿叶菜样品的检测,结果显示所有绿叶菜样品均符合有机磷农药最大残留限量标准。该方法具有灵敏度高、通用性强、准确度高、稳定性好、经济环保等优点,适用于其他蔬菜及水果中农药残留量检测样品前处理中。

介孔碳固相分散蔬菜中农药残留的前处理方法

利用双官能团分子十八烷胺功能化介孔碳,合成一种新型碳纳米复合材料。基于优化QuEChERS技术开发一种用于微固相萃取(μ-SPE)的高效富集9种农药残留的样品前处理方法,并结合气相色谱-质谱联用仪进行分析研究。发展一种使用μ-SPE介孔碳的新应用,其优势在于通过介孔纤维膜提供的吸附剂的保护,可用于处理基质复杂的样品,当加标浓度为0.020,0.050和0.120 mg/kg时,其平均回收率范围为85.0%~97.2%,相对标准偏差<10%(n=6),在0.05~0.25μg/mL浓度范围内呈良好线性关系,高灵敏度,3倍噪音最低检出限为0.01~0.08μg/mL,定量限为0.028~0.26μg/mL,相关系数为0.9991~0.9998。在优化条件下,功能化介孔碳纳米复合材料与传统固相萃取相比,具有较好的消除基质干扰和降低色素影响的能力,有望应用于其他复杂基质样品中农药残留检测样品前处理。

肉苁蓉中多元素含量测定研究

建立一种利用硝酸和双氧水为消解体系的微波消解法,采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)同时测定肉苁蓉中25种元素含量。按硝酸与双氧水3︰1(V/V)进行消解,调节进样系统和质量分析器进行重复性试验测定,肉苁蓉中K、Na含量均在1000 mg/kg以上,Ca、Mg含量在100 mg/kg以上。肉苁蓉平均回收率为84.25%~103.50%,相对标准偏差SRSD值为1.23%~5.10%(n=6),具有良好的线性关系(r值在0.9991~1.0000)。该方法具有样品前处理操作简单、成本低、灵敏度和精密度高等优势,有望应用于其他中药材及保健食品中多种元素含量的测定。