酪氨酸酶基因工程菌产黑色素的发酵条件研究

研究了表达酪氨酸酶的基因工程菌（Ｅ．ｃｏｌｉＷＹ８）产黑色素的条件。ＷＹ８ 能在酪素平板上产生可溶性黑色素，在添加酪氨酸的液体ＬＢ培养基中的黑色素产率是基因来源菌—Ｐｓｅｕｄｏｍ ｏｎａｓｍ ａｌｔｏｐｈｉｌｉａ 的５ 倍。用正交试验法找到适宜发酵产黑色素的培养基，对摇瓶装量、菌龄、底物浓度、发酵温度和ｐＨ 等因素的影响作了进一步探讨。

嗜麦芽假单胞菌酪氨酸酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达

酪氨酸酶基因（mel）编码的酪氨酸酶是合成黑色素的关键酶。用鸟枪法分离嗜麦芽假单胞菌（PseudomonasmaltophiliaAT18）的mel基因：以pUC18为载体，E．coliHB101为受体菌，在加有一定量的Amp和L－tyr的酪素平板上筛选到分泌可溶性黑色素的转化子，所含重组质粒pWSY约700bp的外源DNA片段上携有mel基因，该片段无BamHI、HindIII、EcoRI、BclI等酶的识别位点。Southern杂交证实此片段确实来源于P．maltophilia。克隆片段的核酸序列分析鉴定ORF504为酪氨酸酶编码序列，SDS－PAGE电泳也显示工程菌HB101／pWSY额外表达一分子量约为18kD的蛋白，因此证明了这一蛋白是重组子表达的酪氨酸酶。

酪氨酸酶用于废水处理

酪氨酸酶用于废水处理王戈林，彭珍荣，沈萍武汉大学生命科学学院武汉４３００７２消除环境污染，保护环境＿，是全球日益关注的问题，废水生化处理是目前国内外净化水源的主要技术之一，人们预计生物工程中规模最大的生物反应器将是废水处理生物反应器。今天的化学工业高...

链霉菌酪氨酸酶基因的克隆与表达

本文综述了近年来对链霉菌酪氨酸酶基因的研究。由酪氨酸酶合成黑色素是链霉菌属各个种的共同特性，并受到酪氨酸酶基因的控制。链霉菌几个种的酪氨酸酶基因已克隆到，其产黑色素的特性使之作为重要的标记基因得以广泛应用，同时，该基因在链霉菌的不同种及不同属的微生物中得到了高水平的表达。链霉菌酪氨酸酶基因表达调控的分子机制也得到较深入的研究。

固定化假单胞菌产L-多巴

选择海藻酸钙和聚乙烯醇凝胶为固定化载体包埋假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．），以提高该菌以Ｌ－酪氨酸为底物生产Ｌ－多巴的效率．海藻酸钙和聚乙烯醇固定的假单胞菌分别将发酵周期缩短了８和１４ｈ．半连续发酵的结果表明，海藻酸钙和聚乙烯醇固定化细胞分别能重复使用５次和１４次，Ｌ－多巴生产效率比游离细胞分别提高了１６％和１６０％．聚乙烯醇固定化细胞经过热处理和在生理盐水中振荡处理可明显提高Ｌ－多巴的生产效率和产量。

重组质粒对大肠杆菌HB101生长影响的微量热研究

用微量热方法研究了嗜麦芽假单胞菌AT18,受体菌大肠杆菌HB101,mel基因工程菌——大肠杆菌HB101/pWSY8和携带克隆载体pUC18质粒的大肠杆菌HB101等的生长代谢过程.实验结果从热化学和热动力学上阐明了细菌的生长速率常数与其所含质粒的大小呈负相关.探讨了低温处理对含不同质粒大肠杆菌生长的影响,发现低温处理对工程菌生长影响最大.

酪氨酸酶基因工程菌所产黑色素的性质研究

本文对酪氨酸酶基因工程菌(E.Coli/p WSY)所产黑色素物理化学性质进行鉴定、比较、分析。从而为进一步开发、利用酪氨酸酶基因工程菌产黑色素提供理论依据。

基因工程菌(E.Coli WY8)产黑色素的条件研究

本文研究了基因工程菌(E.Coli WY8)产黑色素的条件,在用正交实验优化的培养基的基础上,对摇瓶装量,菌龄,底物浓度,发酵温度和pH等因素的影响作了研究,它将为工业生产提供重要数据。

利用软件下载专利好又多

尽管互联网上有许多的免费专利数据库网站为用户提供了极其丰富的专利信息,但是用户在检索、下载、阅读这些专利数据库时会遇到很多不便：如检索专利时不能在不同国家的专利数据库之间进行联合检索;不同国家专利数据库的全文说明书采用了不同的图形显示格式，

一种具高活性的酪氨酸酶基因启动子片段的分离

利用大肠杆菌启动子探测质粒ｐＫＫ２３２－８为载体，经ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ完全消化后与ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ部分消化的嗜麦芽假单胞菌染色休ＤＮＡ进行体外连接，转化Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１感受态细胞，在含氨苄青霉素（Ａｐ）和氯霉素（Ｃｍ）的选择平板上筛选转化子．从随机挑选的５４株转化子中，获得一株抗氯霉素水平达１０００ｍｇ／Ｌ的转化子Ｅ．ｃｏｌｉＰＡＳＩ，所含重组质粒被命名为ｐＡＳＩ．经限制性酶切分析和杂交分析表明，ｐＡＳＩ质粒上插入了一段来源于嗜麦芽假单胞菌染色体的ＤＮＡ片段，其大小为１．４ｋｂ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明转化子Ｅ．ｃｏｌｉＰＡＳＩ在含Ｃｍ的培养基上，额外表达了一条２２×１０３的ＣＡＴ蛋白质带．将重组质粒ｐＷＳＹ上的嗜麦芽假单胞菌ｍｅｌ基因亚克隆到ｐＡＳＩ上１．４ｋｂ启动子功能片段下游，构建成Ｅ．ｃｏｌｉＡＷＳ工程菌株，使黑色素产率提高了７０．６％．

糖代谢与抗肿瘤治疗

能量代谢重编程是肿瘤的十大特征之一,其中葡萄糖代谢异常是肿瘤代谢最突出的特征。在氧气充足的情况下,肿瘤细胞依然倾向于进行糖酵解,将葡萄糖代谢为乳酸。肿瘤细胞有氧糖酵解能力是正常细胞的20～30倍,为肿瘤代谢提供大量能量和中间产物。因此,靶向糖酵解等异常环节的代谢酶是抗肿瘤治疗的重点,目前相关研究也取得了一定的进展。本文综述了肿瘤中的糖代谢异常调控及靶向相关代谢反应的抑制剂研究进展。

申请号年度与申请年度不一致的多样性

在中国专利文献中,存在不少申请号年度(申请号的前两位)与实际申请年度不一致的情况。从统计数据上看,这种情况多时每年有上千件,少时每年也有几十件。通过分析和总结,笔者认为,申请号年度与申请年度不一致的原因主要有以下几点。

申请号年度与申请年度不一致的多样性

在中国专利文献中，存在不少申请号年度（申请号的前两位）与实际申请年度不一致的情况。从统计数据看到，这种情况多时每年有上千件，少时每年也有几十件。