蛋鸡白血病的PCR检测和序列分析

采用PCR方法对某蛋鸡场送检感染鸡进行实验室诊断,针对禽白血病病毒逆转录酶3’区域设计鉴定内外源病毒共同下游引物H5,针对ALV-J亚群gp85囊膜糖蛋白基因保守区域设计上游引物H7,A-E亚群gp85囊膜糖蛋白基因保守区域设计上游引物AD1,提取肝脏病料中核酸进行PCR扩增,测序分析结果表明为内源性禽白血病病毒感染。

鸡场土壤中大肠杆菌的检测与化学消毒剂筛选

应用平板计数法和大肠菌群最大或然数(MPN)法对44份养鸡场土壤样品污染情况进行测定,结果表明春秋季土壤污染较夏冬季严重;以从养鸡场土壤样品中分离鉴定的大肠杆菌作为指示菌,对戊二醛和二氧化氯的杀菌效力进行了测定,定量悬浮试验结果表明0.01%戊二醛作用30 min、0.02%戊二醛作用5 min、25 mg/L二氧化氯作用10 min,对大肠杆菌的杀灭率均达到100%。以土壤为载体的消毒试验结果表明0.01%戊二醛作用30 min、0.02%戊二醛作用10 min和300 mg/L二氧化氯作用30 min、400 mg/L二氧化氯作用10 min,对大肠杆菌的杀灭率均达到100%,两种消毒剂均具有良好的杀灭效果。

湖北省蛋鸡呼吸道型传染性支气管炎病毒的分离及鉴定

鸡传染性支气管炎（avian infectious bronchitis,IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（Avian infectiousbronchitis virus,IBV）引起的一种急性、高度接触性传染病。IBV因其血清型众多（至今已发现30多个血清型）和高度的变异性而使免疫预防复杂化。2008年下半年至今,笔者在湖北省蛋鸡场中发现一种呼吸道疾病,发病鸡主要是高产蛋鸡,主要引起产蛋量下降（产蛋率从90%以上一直降到50%～60%）,不同鸡群降幅不等,产白壳蛋、软壳蛋、

3种口蹄疫O型抗体检测试剂盒对疫苗免疫牛血清抗体检测的比较试验

为了提供检测结果准确且操作便捷的试剂盒,本试验应用两种商品化试剂盒和本实验室研制的一种基于合成肽包被抗原的间接ELISA试剂盒同时对口蹄疫疫苗免疫后14、21和28 d的150份免疫牛血清进行口蹄疫O型抗体水平的检测,并对3种试剂盒测定结果的符合程度、重复性和便捷性进行了比较。试验结果表明3种试剂盒测得的抗体水平检测结果之间高度符合,且3种试剂盒各自的检测结果重复性良好,基于合成肽包被抗原的间接ELISA试剂盒在操作便捷性方面优势明显。

猪SLA-1分子结合多肽特性分析及功能验证

本文利用软件对我国商品猪群中表达频率较高的SLA-1*080101等位基因进行分析,找出了该等位基因所呈递的多肽抗原的第2位和第9位氨基酸的偏好性,确定该等位基因的结合多肽残基基序为:X-(L/V/I/T/M)-X-X-X-X-X-X-(Y/F/M)。再结合表位预测软件,预测了6条口蹄疫病毒CTL表位,并通过动物试验验证,确定其中2条具有较强的细胞免疫反应(P1和P4)。本试验结果为开发口蹄疫细胞免疫疫苗,完善现有产品保护性能提供了科学依据。

猪SLA-1体外表达及其结合多肽的筛选

本文将猪群中表达频率较高的SLA-1*1301胞外区及SLA-β2 m基因序列片段合成后连接到pET21a(+)原核表达载体上,构建出pET21a-SLA-1*1301和pET21a-SLA-β2m重组表达质粒。通过IPTG诱导大肠杆菌刺激产生大量的相关目标产物,再将所获得的质量比较高的SLA-1*1301胞外区表达蛋白、SLA-β2m蛋白分别与6条软件预测的口蹄疫细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位多肽进行蛋白复性和纯化,通过蛋白纯化仪分析,结果显示,其中4条预测口蹄疫CTL表位多肽可以形成稳定的SLA I-β2m-表位多肽复合体,表明该4条多肽可能为口蹄疫的CTL表位肽,对将来开发细胞免疫疫苗和相关免疫增强剂有重要的指导意义。

猪圆环病毒2型合成肽疫苗佐剂筛选与免疫保护性研究

【目的】筛选更安全高效的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)合成肽疫苗佐剂。【方法】将IMS 251C VG、GEL 02 PR、ISA 15A VG、ISA 206 VG、ISA 61 VG、台湾细菌鞭毛、卡波姆、多糖共8种佐剂与适量PCV2多肽抗原按照特定方法配制成不同疫苗,并验证其物理性状,采用小鼠试验初步检验疫苗安全性及免疫效果,筛选出较优的佐剂进行仔猪免疫攻毒保护试验,进一步评估各疫苗的免疫保护效果。【结果】物理性状显示,所有疫苗稳定性均较好,4℃保存期均超过12个月。ISA 61 VG油佐剂黏度较高且乳滴粒径较大,ISA 15A VG、ISA 206 VG双相佐剂次之,其余水佐剂均较低较小。小鼠试验结果显示,除台湾细菌鞭毛佐剂外其他佐剂安全性均良好;小鼠ELISA抗体水平检测结果显示,ISA 61 VG、GEL 02 PR、ISA 206 VG组免疫效果明显高于其余疫苗组;综合评定安全性和免疫效果,筛选ISA 61 VG、GEL 02 PR、卡波姆、多糖、ISA 206 VG共5个佐剂组进行仔猪免疫攻毒保护试验。仔猪免疫攻毒保护试验结果显示,免疫后,ISA 61 VG和GEL 02 PR组保护效果明显优于其他佐剂,其制备的疫苗产生的ELISA抗体和中和抗体水平均明显高于其他组,同时还可刺激产生更高水平的细胞因子γ-干扰素(IFN-γ);攻毒后,ISA 61 VG、GEL 02 PR、ISA 206 VG组疫苗的仔猪相对日增重显著高于其他佐剂组(P<0.05),且实时荧光定量PCR和免疫组化结果显示,上述疫苗组可显著降低仔猪体内病毒载量(P<0.05)。临床症状观察显示,ISA 61 VG和GEL 02 PR疫苗组无体温升高或被毛粗乱等现象,病理切片表明这2个疫苗组组织病变较轻。【结论】油佐剂ISA 61 VG佐剂和水佐剂GEL 02 PR制备的PCV2合成肽疫苗对预防PCV2感染具有较好的免疫保护作用,试验结果为PCV2合成肽疫苗的研究提供了数据基础。

基于道路桥梁连接处的设计与施工浅析

因为对于道路桥梁的连接来说具有可以从柔性慢慢的转变成刚性的特殊性,所以为了可以更好的各种不同类型的质量隐患进行降低,那么就要把道路桥梁施工作业以及设计去提前做好,同时在制定施工方案的时候要结合着现场的实际勘察结果去进行,以此提供更加有力的支持给后期的施工作业。因此本文深入探讨道路桥梁连接处的施工和设计,希望通过这样的方式给相关的工作起到一定的参考作用。

犬瘟热、犬细小病毒疫苗株与国内流行毒株的同源性分析

为了对比不同厂家生产的犬四联(犬瘟热、犬细小、犬副流感、犬传染性肝炎)活疫苗中犬瘟热、犬细小病毒疫苗毒株与国内流行毒株的差异,掌握国内犬用疫苗疾病保护情况,本试验对A厂家和B厂家犬四联活疫苗的疫苗毒株中犬瘟热和犬细小病毒疫苗毒株进行分析。结果表明,A厂家与B厂家犬四联疫苗所含的毒株的基因序列同源性在犬瘟热、犬细小病毒2个种毒株方面差异较小(<8%),相似性较高,与国内流行毒株的同源性也较高(>89.6%)。结果表明这2个厂家犬用疫苗所使用的犬瘟热、犬细小病毒疫苗株与我国流行毒株的同源性较高,免疫动物可得到较好的保护。