miR-375、miR-92b靶向NLK对非小细胞肺癌细胞生物学功能及上皮间质转化的影响

目的探讨miR-375、miR-92b靶向Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人NSCLC细胞A549为实验细胞,分为7组:正常对照组、miR-375阴性对照组、miR-92b阴性对照组、miR-375+miR92b阴性对照组、miR-375抑制组、miR-92b抑制组和miR-375+miR-92b抑制组。采用双荧光素酶报告法观察miR-375、miR-92b与NLK之间的靶向关系。培养72 h时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-375、miR-92b、NLK mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖(OD值),划痕实验法(wound healing)检测细胞迁移,Transwell实验法检测各组细胞侵袭,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EMT标记蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达差异。结果miR-375、miR-92b与NLK存在靶向结合位点且在A549细胞中存在靶向关系。细胞培养72 h,miR-375抑制组、miR-92b抑制组、miR-375+miR-92b抑制组与相应的阴性对照组和正常对照组比较,NLK mRNA表达、OD值、迁移距离、侵袭细胞数降低(均P<0.05)。miR-375阴性对照组、miR-92b阴性对照组、miR-375+miR-92b阴性对照组与正常对照组比较,E-cadherin、vimentin表达差异不具有统计学意义(P>0.05);与相应的阴性对照组和正常对照组比较,miR-375抑制组、miR-92b抑制组、miR-375+miR-92b抑制组E-cadherin蛋白表达均增高,vimentin蛋白表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miR-375、miR-92b靶向NLK对NSCLC的生物学功能和EMT具有抑制作用,NLK表达调控可能是NSCLC的预后生物标志物和治疗靶点。

磁锚定牵引技术辅助胸腔镜下食管切除术三例

磁锚定牵引技术是磁外科的核心技术之一,借助外磁体对内磁体的“非接触性”牵引力,移动外磁体可以带动内磁体与组织抓钳向多个方向移动,将组织或器官牵拉至手术所需的位置,在术中协助显露术野。在前期动物实验研究的基础上,我们应用磁锚定装置辅助完成3例(男性,年龄63~71岁)四孔胸腔镜下食管切除手术,术中应用磁锚定牵引技术进行辅助,可以将食管向背侧、腹侧等不同方向牵拉,协助显露解剖平面,无需专用的胸腔镜器械或进行胸腔穿刺牵拉食管,减少了操作器械间的相互干扰。术中平均出血量83 mL,平均手术时间253 min,平均住院时间10 d。术后随访结果显示3例患者短期预后良好,磁锚定操作区域胸壁无肿胀、疼痛等不适。