蛹虫草多糖促进CETP-tg小鼠胆固醇逆转运

目的:本研究验证蛹虫草多糖(CMPS)在体内外促进胆固醇逆向转运(RCT)的效应,并探讨相关机制。方法:采用CETP-tg小鼠作为动物模型,通过同位素示踪技术检测体内的RCT效率;酶法测定血浆脂质水平。采用RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞作为细胞模型,油红O染色和总胆固醇试剂盒检测泡沫细胞胆固醇外排后剩余脂质含量。Western blot分析泡沫细胞及小鼠肝脏内涉及胆固醇转运、摄取、转化的相关蛋白水平。结果:CMPS灌胃4周后,高脂饮食CETP-tg小鼠血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇及高密度脂蛋白胆固醇浓度分别降低24%、23%和22%,体内RCT过程加速,血浆、胆汁、肠道及粪便外排通路中3H-胆固醇放射活性明显升高,同时,肝脏中胆固醇受体SR-B1和LDLR及转化酶CYP7A1蛋白表达上调,分别增加了105%、71%和58%。体外实验显示:CMPS促进了巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇外排,细胞内脂质和TC水平明显降低,同时,上调了巨噬细胞PPARγ-LXRα-ABCA1/ABCG1信号通路相关蛋白的表达。结论:CMPS促进了外周巨噬细胞中多余胆固醇的流出和体内胆固醇经肝脏途径外排,其机制可能与PPARγ-LXRα-ABCA1/ABCG1通路激活有关。

蛹虫草多糖降胆固醇作用的机制探讨

目的提取并纯化蛹虫草多糖(CMPS),分析相对分子质量分布,初步探讨其降胆固醇的作用机制。方法通过热水提取-醇沉法分离CMPS,采用Sevage试剂、AB-8大孔吸附树脂进行纯化,应用高性能凝胶渗透色谱明确CMPS相对分子质量分布。模拟机体胃肠道环境,测定不同质量浓度CMPS结合胆酸盐能力;培养HepG2细胞,观察CMPS对肝细胞增殖率及细胞内胆固醇水平的影响,蛋白免疫印迹分析肝细胞内3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA-R)及甾醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)表达变化。结果 CMPS中相对分子质量为3 119 kDa的多糖含量最高;CMPS体外结合胆酸盐能力较强,与胆酸钠、牛磺胆酸钠及甘氨胆酸钠的结合率分别达到63%、62%和50%。细胞实验数据表明低于200 mg/L的CMPS干预HepG2细胞24 h没有抑制其增殖率。同时,在安全质量浓度范围内(<200 mg/L),CMPS可显著下调肝细胞内SREBP-2和HMG-CoA-R蛋白表达,降低肝细胞内总胆固醇水平。结论 CMPS具有良好的体外降胆固醇活性。

氢气干预改善动脉粥样硬化易感小鼠血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活力及溶血磷脂酰胆碱水平

目的探究氢气干预在动脉粥样硬化早期对脂蛋白相关酶和脂质代谢的影响。方法低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLr-/-)小鼠高脂饲料饲喂4周,构建动脉粥样硬化易感小鼠模型,同时饮用富氢水及4%氢气吸入联合干预,检测小鼠血脂情况、疾病标志物水平、血浆中多种溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)分子水平及脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein⁃related phospholipase A2,Lp⁃PLA2)活力。结果氢气干预可以降低血浆甘油三酯水平及肝脏损伤标志物水平,降低血浆中多种LPC分子水平,改善Lp⁃PLA2活力。结论氢气干预可在动脉粥样硬化易感小鼠中发挥作用,可能通过调节Lp⁃PLA2活性及降低LPC水平缓解动脉粥样硬化的进展。