白介素-1受体拮抗剂对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡和caspase-3表达的影响

目的:观察白介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)对脊髓损伤(SCI)后继发性神经细胞凋亡和caspase-3表达的影响。方法:60只SD大鼠,随机分为假手术组、脊髓损伤组、IL-1Ra治疗组和生理盐水对照组,每组15只。采用Allen′s法建立大鼠急性SCI动物模型,IL-1Ra治疗组和生理盐水对照组于SCI后立即硬膜下腔内分别注射IL-1Ra(10μg/10μl)和等量生理盐水,于伤后24h以损伤为中心(假手术组取相应部位),切取长约8mm脊髓组织,用蛋白印迹法和免疫组化染色法检测caspase-3表达的变化;采用实时定量PCR法检测caspase-3mRNA的表达情况;用原位末端标记法(TUNEL)检测SCI后神经细胞凋亡情况。结果:SCI后24h,SCI组与假手术组比较受损伤的脊髓组织中caspase-3mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),且TUNEL阳性细胞明显增多(P<0.01);IL-1Ra治疗组大鼠受损伤节段脊髓组织caspase-3表达及TUNEL阳性细胞数较生理盐水对照组)均明显减少(P<0.01)。结论:IL-1Ra治疗可减少急性SCI后脊髓组织中caspase-3的表达和神经细胞凋亡的发生。

针刺影响慢性脊髓损伤大鼠脊髓组织神经生长因子及其受体的表达

为探索针刺治疗慢性脊髓损伤的作用机理,采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型,然后手术减压,并进行电针治疗。观察联合行为评分(CBS)、体感诱发电位和神经生长因子(NGF)及其受体的免疫组化变化。结果发现脊髓损伤后NGF和TrkA在神经元及胶质细胞表达增强,经过电针治疗后,NGF和TrkA在神经元和胶质细胞的表达下降;体感诱发电位检测和CBS评分显示,电针组明显优于减压组,电针组与减压组比较统计学差异具有显著性(P<0.05)。表明电针治疗促进脊髓损伤大鼠的行为功能恢复是通过内源性神经生长因子及其受体TrkA介导起作用的。

慢性压迫损伤对大鼠脊髓神经营养因子及其受体表达的影响

目的观察脊髓慢性受压后神经营养因子及其受体的变化情况。方法采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型,用免疫组化的方法观察脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB表达的变化。结果正常大鼠脊髓组织中,BDNF和TrkB反应物质几乎存在于所有的脊髓神经元,灰白质中胶质细胞染色明显;脊髓受到压迫后,压迫节段脊髓组织的神经元和胶质细胞表达BDNF和TrkB增强。结论在慢性压迫性脊髓损伤的过程中,脑源性神经营养因子及其受体表达增多,这可能对损伤脊髓神经元的存活和保留具有重要作用。

诱发电位改变与脊髓受压程度关系的实验研究

目的 :探索脊髓电生理的改变与大鼠脊髓慢性受压程度的相关关系。方法 :切除 T9椎板后置入慢性渐进性压迫装置 ,多次渐进旋入螺钉 ,在 3个月内造成大鼠胸段脊髓不同程度的慢性渐进性压迫 ,脊髓受压程度根据椎管侵占率分为轻度 ( <30 % )、中度 ( 30 %～ 60 % )、重度压迫 ( >60 % )三组 ,定期进行 CBS、MEP和 SEP等检查。结果 :重度压迫组后肢全瘫的 5只动物 MEP和 SEP均测不到 ;中度压迫组有 2只 SEP测不到。术后 90 d,实验组 SEP和 MEP的潜伏期明显高于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;中度损伤组、轻度损伤组和对照组SEP和 MEP均存在显著差异 ( P<0 .0 5 )。实验组动物的 CBS与 MEP和 SEP改变呈显著正相关。结论

针刺对慢性脊髓损伤大鼠神经递质和营养因子表达的影响

目的 探讨针刺治疗慢性脊髓损伤的机理。方法 建立后路渐进性脊髓压迫大鼠模型,然后手术减压,进行电针治疗,观察联合行为评分(CBS)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)、脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB的免疫组化检测结果。结果 初次术后90 d,电针组大鼠CBS评分优于减压组( P <0.05),ChAT免疫组化染色阳性细胞数多于减压组 ( P <0.05),神经元和胶质细胞增强的BDNF和TrkB表达得到恢复。结论 电针治疗可能通过影响 BDNF及其受体的表达,促进 ChAT表达和增强其活性而对大鼠慢性脊髓损伤起治疗作用。

电针治疗大鼠慢性脊髓损伤疗效观察及分子机制的实验研究

目的探索电针治疗慢性脊髓损伤的作用机理。方法采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型,然后手术减压,并进行电针治疗。通过体诱发电位和BBB评分观察后肢功能,采用免疫组化和蛋白印迹法观察神经营养因-子3(NT-3)及其受体(TrkC)的变化。结果脊髓损伤后NT-3和TrkC在神经元及胶质细胞表达增强,经过电针治疗后,NT-3和TrkC在神经元和胶质细胞的表达下降。诱发电位检测和BBB评分显示,电针组疗效优于减压组(P<0.05)。结论电针治疗可促进脊髓损伤大鼠的行为功能恢复,这可能是通过内源性神经营养因子及其受体介导的。

针刺影响大鼠慢性脊髓损伤神经递质的表达

为探讨针刺治疗慢性脊髓损伤的作用机理 ,采用大鼠后路渐进性脊髓压迫法造成动物模型 ,然后手术减压 ,并进行电针治疗。通过观察联合行为评分 (CBS)及胆碱乙酰转移酶 (Ch AT)的免疫组化检测 ,对实验动物进行评价。结果脊髓损伤后 Ch AT免疫组化染色阳性细胞数减少 ,CBS升高 ;经过电针治疗后 ,Ch AT阳性细胞数增多 ,CBS也下降。电针组与减压组比较 ,在统计学上具有显著差异 (P<0 .0 5 )。表明电针治疗可以促进脊髓损伤大鼠脊髓神经元合成 Ch AT,从而合成更多的运动神经递质乙酰胆碱 。

p38有丝分裂原激酶活化参与继发性脊髓损伤后神经细胞凋亡的实验研究

探索脊髓损伤(SCI)后p38有丝分裂原激酶(p38MAPK)的表达及其与神经细胞凋亡的关系。采用Allen’s法建立大鼠急性SCI动物模型,用蛋白印迹法和免疫组织化学染色方法检测SCI后p38MAPK和caspase-3表达的变化;采用实时定量PCR法检测SCI后caspase-3 mRNA的表达;用原位末端标记法(TUNEL)检测SCI后神经细胞凋亡。结果表明SCI后总p38MAPK表达无变化,但p38MAPK磷酸化明显增多,于伤后6h达高峰;伤后24hcaspase-3表达明显增加。TUNEL检测显示,伤后6h受损伤的脊髓组织有少许凋亡细胞出现,24h细胞凋亡最明显。鞘内注射p38MAPK抑制剂SB203580,明显减少caspase-3的表达,并减少细胞凋亡。以上结果显示SCI后损伤局部p38MAPK激活诱导了caspase-3基因表达,导致神经细胞凋亡;抑制p38MAPK可以阻止SCI后继发的神经细胞凋亡。

基础减压对慢性压迫性脊髓损伤大鼠ChAT表达的影响

目的:探讨手术减压对治疗慢性脊髓损伤的作用机理。方法:采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型,然后进行手术减压,观察其联合行为评分(CBS),并常规行病理及胆碱乙酰转移酶(ChAT)的免疫组化检测。结果:脊髓损伤后ChAT免疫组化阳性细胞数减少,CBS升高;经手术减压治疗后,ChAT阳性细胞数增多,CBS也改善,减压组与压迫组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:手术减压治疗的作用机制可能是其促进了脊髓运动神经元合成ChAT,从而合成更多的运动神经递质———乙酰胆碱,加速了实验动物行为功能的恢复。

大鼠胸段脊髓损伤后两种不同行为评分方法的比较研究

目的 :比较两种神经功能评分方法对大鼠脊髓损伤 (SCI)模型行为功能的评价。方法 :大鼠急性SCI模型按轻、中、重度损伤随机分组 ,分别应用联合行为评分 (CBS)和BBB评分方法对大鼠后肢行为功能进行评价。结果 :两种方法评价结果均与损伤程度相关 ,其中BBB评分方法相关性较高 ,且体现在损伤后运动功能恢复的每一阶段。结论 :BBB评分方法对大鼠SCI模型运动功能评价优于CBS评分方法。

肌肉与骨骼系统模块教学的初步探索

在骨科临床教学工作改革中,对肌肉与骨骼系统模块教学进行整合,将肌肉与骨骼的解剖学基础理论教学与临床教学相结合;重视学生在教学活动中的主体地位,充分调动学生的积极性、主动性和创造性,加强临床技能培训;采用临床病例分析教学模式,着力培养学生自学能力和独立分析问题、解决问题能力,并加强学生创新思维和创新能力的培养;并将模块教学与医学生和执业医师培训相结合。通过三年的教学实践,初步证明该模块式教学具有一定的优越性。

针刺影响慢性脊髓损伤大鼠BDNF及其受体TrkB的表达

目的 :探索针刺治疗慢性脊髓损伤的作用机理。方法 :采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型 ,然后手术减压 ,并进行电针治疗。观察联合行为评分 (CBS)和脑源性神经营养因子 (BDNF)及其受体TrkB的免疫组化变化。结果 :脊髓损伤后BDNF和TrkB在神经元及胶质细胞表达增强 ,经过电针治疗后 ,BDNF和TrkB在神经元和胶质细胞的表达下降。CBS值显示 ,电针组明显优于减压组 ,电针组与减压组比较统计学差异具有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :电针治疗可以促进脊髓损伤大鼠的行为功能恢复 ,BDNF及其受体TrkB介导了电针的治疗过程 ,与促进行为功能恢复有关。

电刺激与脊髓再生研究进展

近年来的实验研究发现电刺激可以影响体内的生物活性物质和神经递质的释放 ,进而从分子水平研究了电刺激的作用机理。本文就电刺激的方法、时机、作用。

慢性渐进性压迫对大鼠行为功能及脊髓运动神经递质表达的影响

目的 :观察脊髓慢性受压后实验动物的行为功能与运动神经递质表达的变化情况。方法 :采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型 ,观察联合行为评分 (CBS) ,常规病理及免疫组化检测胆碱乙酰转移酶 (ChAT)的变化。结果 :免疫组织化学染色显示 ,在正常大鼠脊髓前角运动神经元及大小神经元ChAT均表达阳性 ,脊髓损伤后ChAT阳性细胞数减少 ,CBS升高 ,二者具有相关关系。结论 :脊髓受压抑制大鼠脊髓神经元合成ChAT 。

肝癌衍生生长因子-2在大鼠脊髓损伤后的表达及其意义

目的:探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)-2在大鼠脊髓损伤后的表达及其意义。方法:取成年SD大鼠120只,随机分成正常对照组和脊髓损伤组。采用改良Allen’s法建立脊髓损伤动物模型,分别于损伤后1、21、45d分别采集受损伤的脊髓标本。应用免疫组织化学染色技术观察HDGF-2在正常脊髓、受损伤后不同时间点的脊髓组织中的表达情况。结果:(1)HDGF-2在大鼠正常脊髓和受损伤脊髓前角神经元和胶质细胞的细胞核中均有表达。(2)脊髓神经细胞核内HDGF-2染色评分,在正常组为50±9,脊髓损伤组为132±30,两组间HDGF-2表达比较具有显著性差异(P<0.01)。(3)HDGF-2表达评分在术后1、21、45 d分别为141±62,107±33和92±18,脊髓损伤不同时间点HDGF-2表达评分比较具有显著性差异(P<0.01)。结论:脊髓损伤后HDGF-2表达升高,提示其参与脊髓损伤和修复的病理过程。

慢性渐进性压迫对大鼠行为功能及脊髓运动神经递质表达的影响

目的 :观察脊髓慢性受压后实验动物的行为功能与运动神经递质表达的变化情况。方法 :采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型 ,观察联合行为评分 (CBS) ,常规病理及免疫组化检测胆碱乙酰转移酶 (ChAT)的变化。结果 :免疫组织化学染色显示 ,在正常大鼠脊髓前角运动神经元及大小神经元ChAT均表达阳性 ,脊髓损伤后ChAT阳性细胞数减少 ,CBS升高 ,二者具有相关关系。结论 :脊髓受压抑制大鼠脊髓神经元合成ChAT 。

大鼠脊髓慢性受压后脊髓组织神经生长因子及其受体的表达

目的:观察大鼠脊髓慢性受压后脊髓组织中神经生长因子(NGF)及其受体(TrkA)表达的变化。方法:采用大鼠后路渐进性压迫的方法制作大鼠轻、中、重度脊髓压迫损伤动物模型,用免疫组化检测脊髓组织中NGF及其受体的表达的变化。结果:正常大鼠脊髓组织中的脊髓神经元和灰、白质中的胶质细胞NGF和TrkA表达较弱;脊髓受压后NGF和TrkA表达增强(P<0.05)。受压程度越重,其表达越明显,免疫反应强度与脊髓受压程度呈正相关。结论:大鼠脊髓慢性受压后,NGF及其受体表达增多,这可能对脊髓神经元的存活和保留具有重要作用。

逆行交锁髓内钉与钢板治疗股骨髁部骨折的疗效比较

目的 :评价逆行交锁髓内钉与钢板治疗股骨髁部骨折的疗效。方法 :回顾分析应用逆行交锁髓内钉治疗股骨髁部骨折 3 1例 ,钢板治疗股骨髁部骨折 45例的恢复情况。结果 :经过 6～ 18个月的随访 ,逆行交锁髓内钉治疗组骨折愈合率 10 0 %,骨折平均愈合时间 4个月 ,感染率为 3 .2 %。钢板治疗组骨折愈合率 91.1%,感染率 11.1%,2例钢板外露 ,骨折平均愈合时间 5 .5个月。结论 :逆行交锁髓内钉治疗股骨髁部骨折 ,操作简单 ,固定坚强 ,对骨折局部血供破坏小 ,是一种疗效满意的方法。治疗结果优于钢板 ,但其应用有一定局限性。

动态MRI评估过伸性颈椎损伤发生过程中椎管内容、椎体及椎间盘相关变化的意义

目的:通过动态MRI测量,观察颈椎病患者的颈椎管内容、椎体及椎间盘的动态变化对过伸颈椎损伤发生中的意义。方法:对31例不同程度颈椎退行性变患者中立位MRI扫描后,再行过屈、过伸位扫描。测量三位置下C各节段脊髓、硬膜囊中矢径、硬膜囊3～7前间隙及椎管、椎体矢径,进行统计学处理后分析其动态变化。结果:高位颈椎C4以上脊髓、硬膜囊中失径在三位置下差异无显著()性意义。C4以下则差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01),椎体水平三位置中测得中矢径数值大小排列为:过伸位>中立位>过屈位;在椎间隙水平,因退行性变、膨出或突出椎间盘及黄韧带的影响则相反为:过屈>中立>过伸,且差异有显著性意义。本组有14例颈椎管狭窄其椎管、椎体比值<0.75,占45.16%(14/31)。结论:过伸位时颈脊髓和硬膜囊直径变粗,加上退行性变膨出或突出椎间盘和后方折叠内陷黄韧带致椎管容积相对狭窄加重,是过伸性颈椎损伤产生的机制所在,且常发生于下颈椎。对发育性颈椎管狭窄者更易患过伸性损伤。