二甲双胍抑制肺腺癌A549细胞增殖和迁移的作用及其机制

目的:探讨二甲双胍对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法:实验分为对照组、二甲双胍2.5 mmol/L组、5 mmol/L组、10 mmol/L组、20 mmol/L组。用浓度梯度(2.5 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L和20mmol/L)的二甲双胍对人肺腺癌A549细胞进行处理,作用24 h后,通过CCK8法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)的产生情况,Transwell法检测细胞迁移、侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测NLRP3、Caspase1、IL-1βmRNA的表达情况。结果:与对照组相比,二甲双胍各剂量组细胞增殖能力,迁移、侵袭能力明显被抑制,细胞ROS水平、NLRP3、Caspase1、IL-1βmRNA水平明显降低,凋亡率明显升高(均P<0.05),并呈剂量依赖性的趋势。结论:二甲双胍可以抑制人肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,可能与抑制ROS-NLRP3炎性小体信号通路有关。

miR-29c和NASP在非小细胞肺癌细胞中的表达、对后者生物学行为影响及靶向关系预测验证

目的观察非小细胞肺癌细胞A549中微小RNA-29c(miR-29c)、细胞核自身抗原精子蛋白(NASP)的表达变化,探讨二者对非小细胞肺癌细胞A549增殖迁移侵袭和凋亡的影响,并预测、验证二者之间的靶向关系。方法选取非小细胞肺癌细胞A549与正常人肺上皮细胞HBE,采用qRT-PCR法检测细胞中miR-29cmRNA、NASP mRNA,Western blotting法检测细胞中NASP蛋白。将非小细胞肺癌细胞A549分为miR-NC组(转染miR-29c阴性对照序列)、miR-29c组(转染miR-29c过表达序列)、si-NC组(转染NASP沉默阴性对照序列)、si-NASP组(转染NASP沉默序列)、miR-29c+NC组(miR-29c过表达序列和NASP过表达阴性对照序列共转染)和miR-29c+NASP组(miR-29c过表达和NASP过表达序列共转染)。采用CCK8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术测算各组细胞的凋亡率;Transwell法检测各组细胞迁移、侵袭能力。双荧光素酶报告基因检测试验鉴定miR-29c与NASP之间的靶向关系。结果与正常肺上皮细胞HBE相比,非小细胞肺癌细胞A549中的miR-29c表达降低,NASP表达升高(P均<0.05)。与miR-NC组相比,miR-29c组A549细胞增殖活性减弱,凋亡率升高,迁移、侵袭个数减少(P均<0.05)。与si-NC组相比,si-NASP组A549细胞增殖活性减弱,凋亡率升高,迁移、侵袭个数减少(P均<0.05)。与miR-29c+NC组相比,miR-29c+NASP组A549细胞增殖活性升高,凋亡率降低,迁移、侵袭个数增加(P均<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-29c与NASP之间存在靶向关系。结论非小细胞肺癌细胞A549中miR-29c呈高表达、NASP呈低表达。miR-29c抑制肺癌A549细胞增殖和迁移侵袭,并促进其凋亡,而NASP促进肺癌A549细胞的增殖和迁移侵袭,并抑制其凋亡,并且过表达NASP可逆转miR-29c对A549细胞增殖和迁移、侵袭能力的抑制作用和对其凋亡的诱导作用。miR-29c与NASP之间存在靶向关系。