半裸舟形藻的优化培养及在仿刺参养殖中的应用

底栖硅藻营养丰富,是仿刺参养殖中重要的食物来源。分离获得单株底栖硅藻半裸舟形藻,并对影响其生长的pH、光照度、氮磷比、玉米素等环境条件进行优化。试验结果显示,培养基的最适初始pH 8.0,最佳光照度2500 lx,玉米素的最适添加质量浓度1.0 mg/L,最佳氮磷比12.5。在此条件下,半裸舟形藻的比生长速率和细胞密度相对最高,积累的生物量最多。通过饲养试验研究半裸舟形藻对仿刺参幼参生长、消化和免疫功能的影响。试验共设3组,分别为商业饲料处理组、筒柱藻处理组和半裸舟形藻处理组。饲养试验共持续30 d,每10 d取样测定仿刺参的消化酶和免疫酶活性。结果表明,与筒柱藻和商业饲料相比,半裸舟形藻不但能够促进仿刺参生长,还可以更有效地提升仿刺参的消化酶和免疫酶活性。这表示饲喂半裸舟形藻对仿刺参的益生效果更明显,可以更有效地提升仿刺参的消化功能和免疫应答,抑制氧化损伤,提高磷酸酶响应能力和机体防御能力。试验结果可为底栖硅藻的培养和在仿刺参养殖中的应用提供参考。

药浴对仿刺参幼参肠道菌群的影响

为探究抗生素药浴对仿刺参幼参肠道菌群的影响,在刺参工厂化保苗期倒池时设置普通组和药浴组(普通组幼参为倒池未药浴正常培养,药浴组幼参用质量浓度0.1 g/L的氟苯尼考药浴15 min),分别于倒池后24、48、72 h,取2组仿刺参肠道样品进行16S rDNA高通量测序分析。试验结果显示,普通组幼参与倒池前的幼参肠道菌群结构基本一致,药浴组幼参肠道菌群结构变化较大,细菌多样性在24 h最高,随后逐渐降低。普通幼参优势菌门变形菌门相对丰度达98%以上,药浴后24、48、72 h,幼参肠道变形菌门相对丰度分别为90.51%、92.99%、96.63%,放线菌门、浮霉菌门、拟杆菌门、酸杆菌门、绿弯菌门、疣微菌门、厚壁菌门相对丰度有所提高,并新出现达达菌门、德潘菌门和芽单胞菌门。普通组幼参肠道中优势菌属新草螺菌属占比达95%以上;药浴后24 h幼参肠道中新草螺菌属相对丰度降低至2.46%,叶杆菌属、Candidatus Competibacter、鞘氨醇单胞菌属等成为新的优势菌属,药浴后48、72 h幼参肠道中新草螺菌属相对丰度逐渐升至36.7%、69.9%,其他菌属相对丰度逐渐降低,肠道菌群结构逐渐向药浴前恢复。抗生素药浴将幼参肠道菌群平衡打破,进而可能会影响到幼参的消化吸收,并增加致病风险,倒池时不建议采用抗生素药浴。本试验结果可为仿刺参健康养殖提供理论依据和技术支持。

优化水稻培养条件测定其果胶酶活力及灰度变化

采用浸泡发芽培养方法改变水稻分子内部构象,测定其变性淀粉果胶酶活力的变化,选择最佳浸泡发芽条件并测定变性后淀粉灰度。结果表明:最佳培养条件为浸泡温度25℃,浸泡方式为浸泡4 h断水10 h,加碱量为0.03%Ca(OH)2,培养时间为2.5 d,在25℃条件下发芽6 d,变性淀粉果胶酶活性最高,灰度较好。从而成功实现对发芽水稻变性淀粉果胶酶活性及其灰度分布的测定。

实时荧光定量PCR检测柞蚕微孢子虫的方法

提高柞蚕微孢子虫检测技术的准确性和灵敏度,对控制柞蚕微孢子虫的胚种传染至关重要。以柞蚕微孢子虫小亚单位核糖体RNA(SSU rRNA)基因为靶基因,建立柞蚕微孢子虫的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示:该方法能够特异性检测柞蚕微孢子虫基因组DNA,而对柞蚕基因组DNA无扩增产物。依据标准曲线确定荧光定量PCR的Ct值≤35作为检测的敏感度区间,对柞蚕微孢子虫基因组DNA的最低检出限为0.004 6 ng。应用该方法对100粒柞蚕蛹样本进行检测,共检出54个样本呈柞蚕微孢子虫感染阳性,而采用普通显微镜镜检与采用常规PCR方法检测呈阳性的样本数量分别为2个和34个。应用该方法对生产中的柞蚕种茧和雌蛾进行抽样检测,柞蚕微孢子虫感染阳性检出率显著高于用普通显微镜镜检的阳性检出率(P<0.05)。建立的柞蚕微孢子虫实时荧光定量PCR检测方法提高了检测的灵敏度。

枯草芽孢杆菌224 yplQ基因敲除及其对溶血性的影响

为了确定枯草芽孢杆菌224(Bacillus subtilis 224,BS224)的溶血基因或引起溶血的主效基因,以枯草芽孢杆菌224基因组DNA为模板,用PCR方法分别扩增yplQ基因上游约1.0 kb和yplQ基因下游0.5 kb两段DNA序列,并以携带新霉素抗性基因的重组质粒pMD18-T-neo为骨架,构建基于yplQ基因位点的基因阻断质粒pMD18-T-neo-yplQ,线性化后电转化至枯草芽孢杆菌224,通过新霉素抗性平板得到36个neor抗性转化子,基因组PCR鉴定和核苷酸测序证明,确定yplQ18为yplQ基因缺失菌株,将其接种到5%的绵羊血琼脂平板上进行溶血性检测,仍能引起溶血。结果表明,单独敲除枯草芽孢杆菌224染色体上yplQ基因对菌株的溶血性无影响或影响不大。

2种三聚茚基三芳胺染料的合成及其光伏性能

以三聚茚基三芳胺为给电子单元,以绕单宁-3-乙酸为受电子单元,设计合成了2种三聚茚基三芳胺染料六乙基三聚茚胺饶丹宁乙酸(MXD8)和六乙基三聚茚胺环氧噻吩饶丹宁乙酸(MXD9)。光学测试表明,该类染料光谱响应范围宽,摩尔吸光系数高。结合2种染料的紫外-可见光谱和循环伏安曲线,确定了染料的电子基态和激发态能级位置。结果表明,2种染料的能级位置符合染料敏化太阳能电池的要求。将它们用作染料敏化太阳能电池中的光敏化剂,在AM1.5-100×10-3 W/cm2的光强下,MXD8敏化电池的开路电压(VOC)为614 mV,短路电流密度(JSC)为5.76×10-3 A/cm2,填充因子(FF)为0.66,总光电转换效率为2.33%。尽管MXD9引入3,4乙撑二氧噻吩作为共轭桥,其光电转换效率却较MXD8低(1.27%)。阻抗测试表明,MXD9光电转换效率较低的原因主要是电子更容易复合。该结果表明,电子复合可能与分子共轭体系增大导致极化率增加有关。

獐茅HAK基因表达调控区的分离及其在水稻中的功能分析

獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用。为了进一步了解AlHAK1基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1基因转录起始位点上游长度约1.3 kb的启动子区域。启动子顺式元件分析显示该序列具有典型的TATA和CAAT盒,以及一些与植物生长发育和环境响应相关的顺式元件。为了明确AlHAK1启动子的功能,将其与GUS基因融合构建到植物表达载体pCAMBIA1301上,通过农杆菌介导转化法导入水稻中。对转基因植株进行GUS组织化学染色,结果显示在转化AlHAK1启动子水稻的根、茎、叶、花药和内外稃部位均检测到GUS活性。GUS荧光定量分析显示AlHAK1启动子调节GUS表达活性低于组成型启动子CaMV35S和Ubiquitin,但其根部和茎部的GUS活性相对较高。对转化植株进行不同胁迫处理后检测GUS活性,结果表明受到ABA、干旱、高温的诱导后其茎部和根部GUS活性有所提高,推测位于该启动子-682 bp的HSE元件和-1 268 bp的MybBS元件可能在高温、ABA和干旱诱导的表达调控中起作用。

混合式教学模式下《有机化学》课程设计

为培养一流化学本科人才,建设一流有机化学课程,需开展以“两性一度”的标准的课程设计。线上线下混合式教学模式能够充分发挥混合教学的优势,为实现“两性一度”提供了有力保障。以卤代烃为例,总结了《有机化学》线上线下混合式教学的工作思路和方法,推动创新性、高阶性和挑战度理念在《有机化学》一流课程中的应用。

不同培养条件下发芽水稻α-淀粉酶活力及粘度变化

对水稻进行浸泡发芽培养,使水稻分子内部构象发生改变,达到变性目的,测定变性淀粉α-淀粉酶活力的变化,选择最佳浸泡发芽条件并测定变性后淀粉的粘度。结果表明,选择在25℃,浸泡4 h断水10 h,加碱量为0.03%Ca(OH)2的条件下培养60 h,然后在25℃下发芽6 d,α-淀粉酶活性最高,粘度较好。

有机化学实验综合设计:9,9-二正丙基-2-硝基芴的高效合成

硝化和亲核取代都是有机化学的经典反应,在本科基础有机化学教学中占有重要地位。然而,由于课时有限,经费不足,部分高校基础有机化学实验开设不足,现有合成制备实验无法满足日益提高的教学要求。发展综合性强,反应时间短,重复性好,且实验成本低的有机合成制备实验是解决上述问题的有效手段。本实验紧密结合当今有机化学发展前沿,设计了以芴为反应原料,以有机半导体材料中间体9,9-二正丙基-2-硝基芴为目标产物的创新实验方案。该实验在8 h内连续完成硝化和亲核取代两步反应,涵盖萃取、重结晶、柱层析等多种重要有机合成技能训练。实验时间短,重复性好,且成本低,符合基础有机化学实验教学在培养拔尖创新人才方面的新要求。

樱桃砧木‘本溪山樱’离体叶片再生系统的建立

该试验分别研究了基本培养基种类与激素配比对樱桃砧木离体叶片再生和生根的影响。初步筛选出樱桃砧木‘本溪山樱’诱导培养基,WPM+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+GA0.5mg/L作为转化再生条件,可以诱导较多的再生芽,其再生频率达到76.3%左右。1/2MS+IBA1.0mg/L可以有效诱导再生芽生根,生根率较高,为93.6%,几乎全部生根,且根系较长,生长健壮。初步探索了抗生素对离体叶片再生系统的影响,卡那霉素30mg/L是‘本溪山樱’遗传转化选择的最佳浓度。

传感器在化学教学中的应用

论述了传感器在中学化学酸碱中和滴定与浓度对化学平衡的影响实验教学中的应用。应用传感器进行化学实验不仅体现了绿色化学理念,而且在培养学生的实验探究能力、创新精神、科学素养等方面还起着重要作用。

农杆菌介导的獐茅NHX1基因导入水稻辽粳9号体系的建立及优化

离子平衡调节是植物抵御盐分伤害的一种非常重要的机制。将已分离出的獐茅Na+/H+逆向转运蛋白基因AlNHX1构建到植物表达载体pCAMBIA1301中,通过农杆菌介导转化法将AlNHX1基因转入到辽粳9号水稻中,并对转化体系进行优化。结果表明:水稻愈伤组织诱导培养基中2,4-D的最适浓度为2mg.L-1,最佳侵染时间为90s;抗生素敏感性试验结果表明:筛选培养基中适宜的潮霉素选择压为50mg.L-1。在较优转化体系下,辽粳9号水稻的转化频率和再生频率分别达到43.9%和16.1%。

借助传感器探究化学反应原理的教学评一体化单元教学设计

在化学反应原理实验教学中,教师应用控制变量的方法进行实验对比观察,利用不同传感器设计探究实验的新方案,引导学生捕获新证据,结合理论知识进行定量分析,“看到”化学反应原理微观本质,并且根据学生对实验数据的分析情况诊断并发展学生数据处理能力、宏观辨识与微观探析水平以及证据推理与模型认知水平。“浓度对化学平衡的影响”和“钢铁吸氧腐蚀原理”实验的教学评一体化设计突破了传统实验的局限,利用传感器的优势,帮助学生定性、定量思考改进实验方案,快速且准确地获取可视化的数据证据,有助于提升学生的化学学科核心素养。

中国明对虾混合养殖池塘沉积物微生物群落比较研究

微生物群落在养殖池塘生态系统中发挥着重要的作用,与环境质量及养殖动物的生长和疾病暴发密切相关。为了考察中国明对虾不同混养模式中的微生态状况,本研究基于16S rRNA基因的高通量测序技术,比较了6种不同中国明对虾混养池塘沉积物微生物群落的差异。结果表明,6种混养池塘沉积物的主要微生物均为变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria),与褐牙鲆的混养,会导致变形菌门丰度升高,同时抑制放线菌门的生长。中国明对虾、海蜇、菲律宾蛤仔混养具有最高的沉积物微生物群落丰富度和多样性。通过对微生物功能进行预测发现,化能异养和含硫化合物的呼吸是中国对虾混养池塘沉积物微生物群落的主要功能。中国明对虾、海蜇、菲律宾蛤仔混养沉积物中部分细菌的某特异性富集,可以提高沉积物中溶解氧量并促进化学物污染物的降解。综上所述,中国明对虾、海蜇、菲律宾蛤仔混养模式在6种不同中国明对虾混养池塘中微生态状况最佳。

地衣芽孢杆菌对仿刺参生长、消化和免疫功能的影响

为探讨益生菌制剂对仿刺参生长、消化和免疫功能的影响,选用分离自仿刺参肠道的地衣芽孢杆菌作为潜在的益生菌株进行仿刺参投喂试验。选择初始体质量为(7.17±0.86)g的仿刺参为试验对象,设计空白对照组及益生菌处理组进行投喂。益生菌在饲料中的添加密度分别为10^(5)、10^(7)、10^(9)、10^(11)cfu/g,每10d测定相关指标。40d投喂试验结束后,通过注射灿烂弧菌的方式对各组仿刺参进行攻毒试验。试验结果显示,105、1011cfu/g处理组与对照组相比,各指标差异不显著。而投喂含有10^(7) cfu/g和10^(9)cfu/g地衣芽孢杆菌饲料时,仿刺参质量增加率、特定生长率、消化酶活性(胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶)及免疫酶活性(酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、溶菌酶)均显著高于对照组。试验期间,淀粉酶及超氧化物歧化酶活性呈先升后降的趋势,其他指标呈上升趋势。攻毒试验表明,投喂107cfu/g和109cfu/g地衣芽孢杆菌的仿刺参累积死亡率较低,相对免疫保护率较高,仿刺参抵抗灿烂弧菌的能力得到提高。试验结果表明,当饲料中地衣芽孢杆菌密度为10^(7)cfu/g和10^(9)cfu/g时,仿刺参生长指标、消化酶活性和免疫酶活性均显著提高。

响应面法优化提取仿刺参中海参皂苷工艺

通过Box-Benhken响应面法优化仿刺参中海参皂苷的提取工艺,为海参皂苷提取提供借鉴。以海参皂苷CladolosideA(CA)为评价指标,以溶剂体积分数、提取次数和提取时间为因素,采用单因素法和Box-Benhken响应面法相结合的方法优化仿刺参中海参皂苷CA的提取工艺参数,从而确定海参皂苷的提取工艺。试验结果显示,以海参皂苷CA的含量为指标测定提取液,优化的提取工艺条件为:微波功率为400W,溶剂为25mL70%乙醇,温度为45℃,次数为3次,时间为10min,在此条件下,海参皂苷CA的含量达151.8μg/g,与预测值相近。本试验采用的海参皂苷的提取方法操作简便,提取效率较高,为刺参皂苷的提取和利用提供科学依据。

仿刺参—中国明对虾—斑节对虾混养下水体微生物组成和多样性

2018年6—9月,在辽宁省辽东湾沿岸约3.33 hm2、水深1.5 m的仿刺参轮放轮捕池塘中,混养中国明对虾(30000尾/hm2)和斑节对虾(7500尾/hm2)。养殖期间不投饵,每月15日前后采集养殖池塘水样1次,通过16S rRNA扩增子的高通量测序,定量分析混合养殖池塘水体细菌群落的多样性及丰度变化,以探索该养殖水体中微生物群落的多样性及组成结构的动态变化特征。试验结果显示,混养水体中主要细菌为变形菌门(51.5%),其次为放线菌门(23.6%)、拟杆菌门(11.3%)和厚壁菌门(9.1%)。聚类分析表明,养殖前期(6—7月)和后期(8—9月)池塘水体中细菌群落具有明显的差异,养殖后期池塘水体微生物群落的丰富度和多样性明显上升;变形菌门的丰度和拟杆菌门的丰度在养殖前期明显高于后期,放线菌门的丰度呈先降后升的趋势,而厚壁菌门在养殖后期丰度明显高于养殖前期。试验结果表明,混养过程中,水体微生物群落特异性富集远洋杆菌属和假交替单胞菌属,通过水环境微生态结构变化提高了水体抵抗富营氧化的能力。养殖后期,水体微生物群落中假单胞菌、微酸菌纲和梭状芽孢杆菌的特异性富集,增强了养殖池塘对于氨氮和亚硝酸盐的去除能力,促进了水质的净化,降低了养殖物种感染疾病的风险,提高了养殖虾的成活率。

贵州省盘县近50a降水特征分析

利用贵州省盘县站1965—2014年的降水资料,分析盘县近50 a降水的变化规律。结果表明:盘县年降水量有明显的减少趋势,其气候倾向率为-6.192 9 mm/a,1965年达到50 a来最大值,年降水量为2 103.4 mm,近50 a内最小值出现在2011年,降水量仅为660.2 mm。近50 a汛期降水量也呈减少趋势,其气候倾向率为-4.518 mm/a。春季、夏季、秋季三季降水量有减少的趋势;其气候倾向率为分别为-1.20 mm/a、-1.52 mm/a、-3.09 mm/a,但冬季降水量有增多的趋势,其气候倾向率为0.07 mm/a,增多趋势并不明显;盘县降水主要出现在5—9月。

盘州市气象站迁站前后风资料对比分析

利用盘州市气象站1987~2002 (旧站址)和2003~2018年(新站址)的逐日风速观测资料,分析盘州市新旧站址的大风日数变化、平均风速变化及年最大风速的风向频率等特征。结果表明:盘州市新旧站址大风日数均呈下降趋势,但迁站前16年的大风日数仅为200天,迁站后16年大风日数明显增加,大风日数达366天;新旧站址年、各季节平均风速也呈下降的趋势,其中春季的平均风速减少明显;旧站址最大风速主要为东北风(NE)、东北偏东风(ENE)、西南风(SW);新站址最大风速主要为西南风(SW)、西南偏南风(SSW)、南风(S)、西南风(SW);旧站址年平均风速在1992年和1998年发生了突变,新站址在2013年发生了一次突变。