流式细胞术检测细胞毒方法的建立

目的 :建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法 :用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞 ,再用碘化丙碇 (PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为 10 0∶1～ 6 2 5∶1,共孵育时间为 1～ 6小时 ,流式细胞仪收集 10 0 0个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果 :CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料 ,18小时后也能很好地区分效靶细胞 ;靶细胞的自然死亡率低于 5 % ;杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为5 0∶1～ 2 5∶1,共孵育时间为 2～ 4小时。结论 :CFSE PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点 :避免放射性试剂的应用 ,敏感性增强 ,单细胞水平的分析。

不同预处理方法对妇科器械清洗效果的对比分析

目的探讨不同预处理方法清洗妇科器械的效果。方法使用2h以上的非感染性妇科器械包(每包53件)21套,随机分为3组:碱清洗组、多酶清洗组和对照组;碱清洗组采用碱性清洗剂、多酶清洗组采用全效多酶清洗剂、对照组用常用水,3组在机洗+酶清洗前分别预浸泡10min;采用目测和残余血检测进行清洗效果比较。结果碱清洗组和多酶清洗组,目测合格率为96.22%和91.64%,两组差异无统计学意义,但与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);残余血测试:碱清洗组与多酶清洗组残余血测试结果均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);碱清洗组和多酶清洗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在机洗+酶清洗前,使用碱清洗剂进行器械的预处理可以有效地去除蛋白质、油脂类等污染物,使妇科器械的清洗效果更好。

不同清洗剂与预处理时间对手术器械清洗效果的研究

目的研究不同清洗剂和预处理时间对手术器械清洗效果是否有显著影响,以提高器械的清洗质量。方法采用普通多酶清洗剂(A组)、生物膜清洗剂(B组)和ANIOSYMEDDI多酶清洗剂(C组)分别浸泡相同类型的术后污染器械各240件,浸泡时间5、10、20、30 min,通过ATP检测法,检测器械上的ATP相对荧光量(RLU),并进行对比评价清洗效果。结果 A组清洁度合格率明显低于B、C组,差异有统计学意义(P<0.01);而B、C组比较,合格率差异无统计学意义。进一步分析显示:B、C组浸泡5与10、20、30 min比较,合格率差异有统计学意义(P<0.05);而浸泡10与20、30 min比较,合格率差异无统计学意义。结论生物膜洗剂和ANIOSYMEDDI多酶洗剂是一种理想的器械预处理清洗剂,均能够显著降低污染物,在严格按照规范清洗操作下,2种清洗剂预处理器械清洁效果差异无统计学意义,浸泡10 min即可达到理想的清洗效果。

追踪法在消毒供应中心缺陷管理中的应用及效果分析

护理缺陷事件是指护士在护理工作中出现的不足、差错及事故,对病人直接或间接产生了影响。消毒供应中心（CSSD）是承担医院内各科室所有重复使用诊疗器械、器具和物品清洗消毒、灭菌以及无菌物品供应的部门,其工作质量直接影响医疗护理质量和病人安全,是医院感染控制的核心部门。

消毒供应中心规范化层级培训的实践及效果

随着医学技术的发展，消毒供应中心（CSSD）需要处理的医疗器械和器皿的结构越来越复杂，特别是手术器械和微创以及植入器械的集中处理更加严格。随着《医院消毒供应中心三项标准》等强制标准的实行，对CSSD人员的专业技术提出了更高的要求。目前我国还未形成完善的CSSD专业培训认证以及人员教育培训体系的建立，在各级护理学院教育和医院护士培训中，对CSSD相关理论学习内容甚少或遗漏状态[2]。而面对CSSD集中管理模式的转变，其专业性在院感控制中的核心作用日显突出，为保障医疗护理安全，适应医院发展需要，对专业人员规范化培训实践和研究成为当前的首要任务。2014年1月我中心开展规范化层级培训，取得了良好效果，现报告如下。

复用物品分散与集中管理的质量比较

随着医学技术的发展,临床使用的物品种类、数量也越来越多。医院复用物品的清洗消毒,既往大多是由使用科室自行处理,由于缺乏专业规范的清洗流程及设备,清洗消毒质量存在安全隐患,而呼吸机管道、湿化瓶、雾化器等消毒不彻底是引起外源性医院感染的原因之一[1]。现今观点认为,集中处置能够提高物品的清洗消毒效果,预防和减少外源性医院感染,保障患者安全。我院自2012年开始逐步实行物品在消毒供应中心（CSSD）集中清洗、消毒、包装、循环使用的管理模式。

不同方法清洗外来手术器械的对比研究

目前国内,外来手术器械虽然要求统一由消毒供应中心（CSSD）负责,其消毒灭菌质量有所提高,但由于其结构复杂和技术精密,同时又没有明确的清洗灭菌说明,CSSD对于如何保证其有效的清洁和灭菌存在盲区。此外,外来器械因价格昂贵,医院多采用租借的方式,在不同医院之间轮流使用,周转率高,为高危再生医疗器械,如清洗不彻底容易形成生物膜,导致消毒灭菌失败,引起交叉感染。

鱼骨图在分析影响妇科器械返洗率因素中的应用

清洗就是去除器械上的污染物,妇科器械的专科特点：使用后附有黏性很大的分泌物、胎脂、胎膜、血凝块等污染物,其二,种类繁多、形状复杂、结构特殊,带有关节、齿槽、细孔、盲管、螺丝、螺纹及各种型号吸引管等.如果得不到彻底的清除,将阻断灭菌因子对微生物的杀灭作用,导致灭菌失败.据研究资料显示,器械因清洗不彻底,压力蒸汽灭菌合格率维持在70％～95％,残余血阳性率为35.9％,可见器械的清洗至关重要.

生物膜检测卡在整体规范化清洗程序中的应用及分析

目前国内各大医院的消毒供应中心为了提高自身的清洗能力,大部分引进了先进的机器清洗,对清洗方式和方法的不断改进,目的在于提高器械清洗效果。使用后器械上残留的血液、脓迹、蛋白质、组织等人体有机物极易形成细菌生物膜,如清洗不彻底导致消毒或灭菌工作可能失败[1],引起医源性感染。

获得重构基因的简捷方法——重叠延伸PCR

目的 :构建 IFN- β信号肽序列与白细胞介素 18(IL- 18)成熟肽的重组嵌合分子。方法 :从 BAL B/ c鼠基因组 DNA扩增 IFN- β信号肽序列 ;由小鼠 Pro- IL- 18真核表达质粒获得 IL- 18成熟肽序列 ;以非对称 PCR技术得到IFN- β信号肽编码区的反义链和 IL- 18成熟肽正链 ;采用重叠延伸 PCR(SOE- PCR)产生具有 IFN- β信号肽与 IL- 18成熟肽的嵌合编码序列 ;定向连方式构建嵌合 IL- 18的表达质粒并测序。结果 :连续胶 PAGE表明非对称 PCR可分别扩增出两个靶序列的特异性单链 ,大小符合预期。IFN- β信号肽对称 PCR产物与 IL- 18非对称 PCR产物混合作为模板 ,进行重叠延伸 ;电泳分析可见清晰的嵌合片段 ;测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成 ,且无移码。结论 :重叠延伸 PCR是一种获得重构基因的简捷方法。

流式细胞术检测CIK的免疫表型和体外杀伤活性

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)的免疫表型和体外杀伤活性。方法:从健康人外周血分离淋巴细胞,经过IFNγ、CD3McAb、IL-2诱导并培养,获得大量的CIK。采用流式细胞术检测CIK的表型;以CFSE标记靶细胞来区分效应细胞,再以PI染色,用FACS检测靶细胞的死亡率。结果:CIK于第22天达到增殖高峰,并高度表达CD3、CD11a、CD54和HLA-DR;中度表达CD3/CD56、CD25、CD28、CD69和FasL;CD16表达不增加。CIK对肿瘤细胞K562、HL-60、Hela、SMMC7721和A375均表现出杀伤活性,其中对K562、HL-60、Hela 3种细胞的杀伤作用较强;而对SMMC7721、A375的作用不明显。结论:细胞因子IFNγ、CD3McAb和IL-2体外诱导的单个核细胞具有强大的增殖力和杀伤活性。

单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B基因疫苗的构建及细胞免疫学研究

目的:构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)糖蛋白BDNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答。方法:PCR扩增编码HSVⅠgB去除N端部分信号肽序列(39bp)的基因片段(2673bp),定向插入pcDNA3载体中,构建pcDNA3gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定。于BALBc小鼠注射免疫3次,观察小鼠CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,CFSEPI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性。结果:双酶切分析结果为目的基因(2.7kb)和线性质粒pcDNA3(5.4kb);PCR扩增结果为特异产物(2.7kb);测序结果与GenBankgB基因序列同源性达99.5%;CTL活性增强;BALBc小鼠脾CD4+T细胞增加。结论:经鉴定证实了HSVⅠgB基因疫苗的构建;HSVⅠgB基因疫苗可以诱导较强的细胞免疫应答,应用于预防HSVⅠ的感染具有良好的前景。

消毒供应室在等级医院评审中的质量管理与持续改进

等级医院评审标准条款遵循PDCA循环原理,通过质量管理计划的制订及组织实施的过程,实现医疗质量和安全的持续改进。从2012年10月份我院专门成立了三甲医院复审工作领导小组,专设等级医院复审工作办公室和专职人员进行资料归档及迎检工作,明确责任,制定了持续改进的实施计划,经过全院动员培训、措施实施、自我评审、自查整改等阶段,各项管理工作取得了明显的成效。

尿液HIV抗体检测在维吾尔族人群中的初步应用

目的:对维吾尔族人群的尿液中艾滋病病毒HIV-1抗体进行检测,初步探讨其应用价值。方法:用酶联免疫试剂盒同时对66例经CDC确诊的HIV感染者及30例无HIV感染者的血液和尿液标本进行HIV-1抗体检测,评价HIV-1抗体在尿液与血液中检测的一致性,并考察尿液检测法的诊断性能。结果:66例经确诊的HⅣ感染者血清HIV-1抗体全部阳性,相对应尿液中HIV-1抗体阳性59例,阴性7例;对照组30例的尿液HIV-I抗体阴性28例,假阳性2例。两种方法一致性良好(kappa=0.79),检出率差异无显著性(P值=0.09,P>0.05),尿液检测法对HIV诊断的敏感度为89.4%,特异度为93.3%,阳性预示值96.7%,阴性预示值80.0%。结论:维吾尔族人群HIV-1抗体在尿液与血液中的检测具有一致性,但尿液检测法在该人群中推广应用有待进一步考证。

单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B基因疫苗的构建及其诱导小鼠细胞免疫应答

目的：构建、制备单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B DNA疫苗，检测其诱导机体产生的细胞免疫应答效果。方法：利用PCR技术从HSV-1 SM44毒株基因组中扩增出编码HSV-1 gB14-507氨基酸序列的一段基因。定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中，构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt，并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。于BALB/c鼠注射免疫3次，抗体分析CD4＋、CD8＋T细胞亚群的变化，羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）/碘化丙碇（PI）双标记的流式细胞计数法检测CTL活性。结果：PCR及测序鉴定结果显示，插入的克隆基因与GenBank中HSV-1F株gB基因序列一致，证实了HSV-1 gBt核酸疫苗的构建；pcDNA3-gBt免疫组BALB/c鼠的CD4＋T细胞数较空质粒（pcDNA3）对照组和生理盐水对照组增加，CTL活性也较对照组明显增强，但是pcDNA3-gBt免疫组BALB/c鼠的CD8＋T细胞、CD4＋/CD8＋T细胞比值与对照组比较差异均无显著性（P〉0.05）。结论：HSV-1 gBt核酸疫苗诱导较强的细胞免疫应答。

纳米晶TiO_2光阳极修饰及光电子复合效应

对染料敏化纳米晶TiO_2薄膜太阳电池的光阳极进行了不同方法的TiCl_4修饰处理,测量了各种修饰处理下的TiO_2太阳电池的光电转换性能。通过准分子脉冲激光(λ=248nm)和氙灯辐照下的开路光电压V_∝随时间的衰减关系,分别研究了单色脉冲和多色连续光激发下的染料敏化TiO_2太阳电池的光电子复合效应,从中明确了TiCl_4修饰对染料敏化TiO_2太阳电池暗电流的调制所起的重要作用。

基于金属网的叠层染料敏化太阳能电池(英文)

本文提出了一种新型染料敏化太阳能电池的叠层结构设计,其中光阳极由导电玻璃上的第一层TiO2纳米薄膜和不锈钢网上的第二层TiO2纳米薄膜组成,不同染料间的负反应相比混染共敏方式少.此结构中引入的金属网,减少了导电玻璃的使用片数,从而减少入射光的损失;同时也解决了两层不同TiO2薄膜间的电连接性问题,并提高电子传输和收集效率.此叠层电池的光电转换效率达1.96%,短路电流为8.4mA/cm2,相比相同电池厚度的单层电池,效率提高约62%.通过阻抗谱分析了叠层电池内部的电子传输,给出叠层电池的等效电路图.此外,还发现电池厚度的增加及电子在不锈钢网表面的复合对光电性能有显著影响.

基于选择合并的空天地一体化网络中断性能分析

近年来,无人机通信在无线通信领域显示出广阔的应用前景。研究了基于无人机中继辅助的卫星通信系统中断性能。首先,在卫星和地面站存在直达径,而无人机中继采用译码转发的情况下,得到了经过选择合并后的系统的输出信噪比表达式;然后,针对卫星链路服从莱斯分布,而无人机中继链路服从瑞利分布,推导出系统的中断概率表达式;最后,通过计算机仿真验证了理论分析的正确性,为卫星通信在未来6G中的应用提供有益的探索。

新《环保法》与企业绿色创新:“倒逼”抑或“挤出”?

新《环保法》的调整旨在加强环境规制水平,但其是否能够发挥“波特效应”存在争议。为检验新《环保法》在驱动企业绿色创新方面的有效性,本文以2007—2016年中国A股上市公司为样本,利用双重差分法(DID)和手工搜集的绿色专利数据,实证考察新法实施对重污染企业绿色创新的影响。研究表明,新《环保法》能够发挥“波特效应”,即“倒逼”重污染企业进行绿色创新。其内在机理是:新《环保法》一方面通过引入可供公众监督的信息披露机制,提高企业环境信息透明度,从而减少隐瞒环境信息的机会主义行为并提高污染成本,进而“倒逼”重污染企业进行绿色创新;另一方面通过加强处罚力度直接增强企业环境违法行为的成本,从而“倒逼”重污染企业进行绿色创新。进一步研究发现,在国有企业、利润空间较小的低集中度市场、环境监管力度较轻的中西部地区和环境规制强度较弱的地区的样本中,新《环保法》对企业绿色创新的“倒逼”作用更为明显。因此,应积极推进环境信息披露制度的构建,细化和完善企业环境信息披露指南,从而加强公众监督的可行性。同时,有必要加强《环保法》执法水平,并在监管和执法中实行有针对性的差异化措施,将有限的执法资源向国有企业、低集中度市场、中西部地区、环境规制强度较弱的地区倾斜,从而在驱动企业绿色创新的同时降低政府的环境规制成本。本文研究结论不仅证实了新《环保法》在驱动企业绿色创新方面的有效性,为“波特假说”提供了经验证据,更为发展企业主体、市场导向的绿色创新体系提供参考。

强制社会责任披露能否驱动企业绿色转型?——基于我国上市公司绿色专利数据的证据

基于2008年企业社会责任(CSR)强制披露政策出台这一外生冲击事件构造准自然实验,利用手工搜集的绿色专利数据,通过PSM-DID的方法,从绿色创新的角度考察强制CSR披露对企业绿色转型的影响。研究表明,强制CSR披露通过加强企业规制合法性和规范合法性动机,驱动企业绿色转型;这种驱动作用在非国有企业、信息环境较好的企业和低集中度市场中更为明显。进一步研究发现,强制CSR披露能够通过驱动企业绿色转型来提高企业绩效。研究结论验证了强制CSR披露在驱动企业绿色转型方面的有效性,深化和丰富了强制CSR披露相关理论,对优化企业环境治理决策与驱动经济绿色发展具有重要指导意义。