无精子症睾丸穿刺活检的临床病理分析

目的探讨分析无精子症患者睾丸穿刺活检的病理改变类型及其临床意义。方法将200例无精子症患者睾丸穿刺组织做切片HE染色,光镜下观察。结果完全性精母细胞停滞54例(27%),混合性萎缩50例(25%),精子发生不全34例(17%),生殖细胞发育不全29例(14.5%),不完全性精母细胞停滞22例(11%),生精小管玻璃样变6例(3%),普遍纤维化4例(2%),精子发生正常1例(0.5%)。结论 199例(99.5%)无精子症患者病因为睾丸性原因,其中80%通过治疗及生殖辅助技术可能实现生育。

肠型白塞氏病临床病理分析

目的分析肠型白塞氏病的临床病理特征,以期减少误诊和漏诊。方法将11例肠型白塞氏病患者的病变肠组织做病理切片苏木精-伊红染色(HE染色),光镜下观察。结果镜下病理改变为溃疡伴淋巴细胞性、中性粒细胞碎屑性、坏死性小血管炎。结论肠型白塞氏病是一种少见疾病,口腔溃疡为必发症状,多有消化道症状,病理特点为溃疡伴小血管炎,溃疡周围黏膜下淋巴组织增生,无溃疡处组织无明显血管炎改变。

小肠血管瘤的临床病理分析

目的总结小肠血管瘤的临床及病理组织学特征,以减少误诊和漏诊。方法对11例小肠血管瘤患者的病变小肠组织做切片HE染色,光镜下观察,同时复习相关文献。结果海绵状血管瘤7例,毛细血管瘤1例,混合型3例。空肠段4例,回肠段7例。10例单发,1例多发。11例均有慢性消化道出血史。术前7例拟诊血管瘤,误诊4例;11例患者手术治疗,痊愈。结论小肠血管瘤是一种少见的小肠良性肿瘤,其诊断非常困难并且容易误诊,手术切除病灶为最佳治疗方法。

神经营养因子Neurturin在Vero细胞中的表达及其生物学活性研究

目的探讨Neurturin(NTN)基因转染Vero细胞后的表达情况,为恒河猴帕金森病(PD)基因治疗打下基础。方法将表达载体pcDNA3-hNTN转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对表达的人NTN蛋白进行了体外生物学活性测定。结果pcDNA3-hNTN质粒转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆且有目的蛋白hNTN表达,表达的hNTN在体外能够促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,并能促进体外培养的胚胎中脑多巴胺能神经元的存活。结论获得了能稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,其表达的hNTN对体外培养的中脑多巴胺能神经元具有保护作用,为移植并进行PD猴基因治疗动物实验打下了基础。

甲状腺乳头状癌与交界性病变的差异蛋白质组学研究

目的:分析和鉴定甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)与交界性病变的差异表达蛋白,筛选新的蛋白标志物。方法:收集2013年4月至2015年2月云南省第一人民医院手术切除的甲状腺标本118例。实验组分别为PTC 43例(含经典型40例、滤泡亚型3例)、交界性病变33例(具有PTC样细胞核及乳头状结构,而缺乏包膜、血管侵犯,未发生转移的病例。其中8例合并非典型腺瘤),对照组为癌旁正常甲状腺组织42例。每组用10例冰冻样本提取总蛋白进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE),经PDQUEST 7.3图像分析软件检测3组的表达差异点,利用基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOFMS)和Swiss-Prot数据库对差异蛋白进行鉴定,选择其中6种差异表达蛋白用118例样本通过免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色进行验证。结果:3组样本两两比较共发现24个蛋白差异点,通过质谱分析鉴定出18种差异表达蛋白。IHC染色显示6种蛋白keratin,typeⅡcytoskeletal 8(CK8)、keratin,typeⅠcytoskeletal 18(CK18)、60 k Da heat shock protein(HSP60)、actin,cytoplasmic 2(γ-Actin)、14-3-3 protein beta/alpha(14-3-3β/α)和14-3-3 protein epsilon(14-3-3ε)定位于细胞浆;在PTC中6种蛋白的表达均高于正常甲状腺组织(P<0.001),同时CK8、CK18、HSP60和γ-actin的表达高于交界性病变组(P<0.01);在交界性病变中,除CK8无明显变化外,其它5种蛋白的表达均高于正常对照组(P<0.001)。结论:蛋白质组学分析有助于发现新的PTC和交界性病变的蛋白标志物,IHC染色进一步确认这些蛋白在组织细胞中的表达模式,更有利于PTC的早期病理诊断。

H3F3A基因突变及H3.3 G34W蛋白表达在骨巨细胞瘤中的诊断意义

目的探讨H3F3A基因突变及H3.3 G34W蛋白表达在骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCTB)中的情况及其诊断意义。方法收集34例GCTB和40例富含破骨样巨细胞的肿瘤(软骨母细胞瘤10例,富于巨细胞骨肉瘤3例,甲状旁腺功能亢进2例,动脉瘤样骨囊肿10例,非骨化性纤维瘤15例)。采用免疫组化EnVision两步法检测H3.3 G34W蛋白表达,采用荧光PCR-毛细管电泳测序法检测H3F3A基因突变。并对两种方法的特异性和敏感性进行对比分析。结果34例GCTB中32例(94.1%)表达H3.3 G34W,40例非GCTB中仅1例(2.5%)软骨母细胞瘤部分表达H3.3 G34W。34例GCTB中33例检出H3F3A突变(97.1%),其中31例(91.2%)为p.G34W,1例为p.G34V,1例为p.G34L突变。40例非GCTB均未检出H3F3A突变。结论H3F3A基因突变及H3.3 G34W蛋白在GCTB的诊断中均具有较高的特异性和敏感性。基因突变检测可以检出GCTB某些罕见突变类型。

丙型肝炎并肝细胞肝癌临床病理分析

目的分析丙型肝炎并肝细胞肝癌的临床病理特征,以期减少误诊和漏诊。方法将12例丙型肝炎并肝细胞肝癌患者的病变肝组织做病理切片、HE染色及免疫组化检测,光镜下观察。结果 12例肝细胞癌中:6例中-低分化,4例中分化,2例低分化。12例周围肝中:8例呈完全分割型结节性肝硬化,2例早期肝硬化,2例纤维增生致小叶结构紊乱。12例经免疫组化检测HCV阳性者11例。其中,10例癌及癌旁组织点灶状阳性,1例癌及癌旁散在阳性,1例癌组织弥漫阳性,周围肝灶状阳性。结论丙型肝炎肝组织多呈中度炎症反应,早期即可发生肝纤维化,肝功能血清酶学改变可与病理改变程度不一致,并发肝细胞肝癌分化较差,易侵犯血管,恶性度高。

卵巢低级别浆液性肿瘤中KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF突变及其与患者临床病理特征和激素表达的相关性分析

目的探究卵巢低级别浆液性肿瘤中KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF的突变状态及其与临床病理特征、激素表达水平之间的关系。方法收集2017年1月-2021年4月在云南省第一人民医院行手术治疗的低级别浆液性肿瘤(包括23例普通型浆液性交界性肿瘤、27例微乳头型浆液性交界性肿瘤和14例低级别浆液性癌)患者的组织标本进行回顾性分析。采用扩增阻碍突变系统-聚合酶链反应技术检测人类KRAS、NRAS、PIK3CA及BRAF基因的突变状态;采用免疫组化检测肿瘤组织中雌激素、孕激素受体的表达状态;分析基因突变状态与临床病理特征、激素表达水平的相关性。结果64例肿瘤组织中共检测出36例突变,其中KRAS突变21例、BRAF突变12例、PIK3CA突变2例、NRAS突变1例。KRAS、BRAF突变常见于≤35岁的年轻女性。在KRAS突变亚型中,G12S、G12D突变常见于微乳头型浆液性交界性肿瘤(P<0.05),G12C、G12R、G12V、G12A、G13C突变常见于普通型浆液性交界性肿瘤(P<0.05),G13D突变仅在低级别浆液性癌中检出。BRAF突变均见于疾病早期阶段。免疫组化结果显示,雌激素受体和孕激素受体阳性率均为76.6%(49/64),普通型浆液性交界性肿瘤与微乳头型浆液性交界性肿瘤的阳性率相似,但均明显高于低级别浆液性癌(P<0.05)。KRAS G13D突变与孕激素受体低表达明显相关(P<0.05)。结论各基因突变之间相互排斥。KRAS突变是卵巢浆液性肿瘤的致癌驱动因子,不同突变亚型与组织学类型、孕激素受体表达状态有关。BRAF突变率随着疾病进展而逐渐降低,与多种良好预后相关的临床病理特征有关,可能对疾病的进展有保护作用。PIK3CA、NRAS突变率较低。

超声检查和分子检测对意义不明确甲状腺结节诊断的研究进展

甲状腺结节在人群中检出率较高,术前确定结节良恶性尤为重要。超声引导下细针穿刺细胞学检查(ultrasonographyguided fine needle aspiration cytology,US-FNAC)可鉴别大多数甲状腺结节的良恶性,但细胞学结果判读的影响因素繁多,在甲状腺细胞病理学Bethesda报告系统中有15%~30%结节被诊断为意义不明确的细胞非典型病变/滤泡性病变(atypia of undetermined significance/follicular lesion of undetermined significance,AUS/FLUS)。AUS/FLUS结节一直是令病理和临床医生感到棘手的问题,其细胞组织结构异型性较小,不能诊断为可疑滤泡性肿瘤、可疑恶性肿瘤或恶性肿瘤。随着各种检测方法的进步,人们对AUS/FLUS结节的认识逐渐清晰。本文就超声检查和分子检测在AUS/FLUS术前诊断中的临床应用和价值作一综述。

骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病的研究进展

帕金森病是一种中枢神经系统退行性疾病,尽管目前对于帕金森病的研究发展迅速,但是传统的药物治疗只能相应缓解症状,不能阻止疾病的进展,而手术治疗相对危险,且副作用大。骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病目前已成为这一领域的研究主题之一,由于骨髓间充质干细胞不仅具备多向分化潜能和自我更新能力,还可以作为基因载体治疗帕金森病,是现代神经生物学研究的热点之一,具有广阔的应用前景。该文就骨髓间充质干细胞移植治疗帕金森病的研究进展作一综述。

tRF和tiRNA在疾病中的研究进展

对下一代测序数据的深入分析,揭示了许多具有不同功能的小分子非编码RNA。近年来,来源于tRNA衍生的小分子RNA(transfer-RNA derived small RNAs,tsRNAs)引起了广泛关注。tsRNAs主要有2种类型,即tRNA半分子(tRNA-derived stress-induced RNA,tiRNA)和t RNA衍生片段(tRNA-derived fragment,tRF)。它们根据在前体或成熟tRNA转录物的切割位置不同而产生。这些tRF和tiRNA的核苷酸组成、生物发生和功能具有异质性。新的研究表明,tRF和tiRNA不仅是tRNA降解的碎片,而且在许多特定的生理和病理过程中起调节作用。本文综述tRF和tiRNA的类型,提出tRF和tiRNA的生物学功能和作用机制的新概念,重点介绍tRF和tiRNA在人类疾病中的潜在应用,并提出目前存在的问题和未来的研究方向。

表达神经营养因子Neurturin的骨髓间充质干细胞的构建及体外活性检测

研究神经营养因子Neurturin(NTN)在由于神经元损伤而造成的神经退行性疾病中对神经元的保护和修复作用。利用重组腺病毒载体将NTN基因转入恒河猴骨髓间充质干细胞(rMSC),通过RT-PCR、IF及Western blot方法检测NTN的转录和表达,并采用鸡胚背根神经节体外培养实验和胚胎大鼠中脑多巴胺能神经元存活实验对NTN进行体外活性检测。结果表明NTN在rMSC中稳定表达和分泌,并具有体外生物学活性,为由于神经元损伤造成的神经退行性疾病的干细胞移植治疗奠定了一定的基础。

嵌合Neurturin在恒河猴脂肪间充质干细胞中的表达及定向诱导作用

该研究通过重组腺病毒传递嵌合型Nerve growth factor(NGF)/Neurturin(NTN)至恒河猴脂肪间充质干细胞(rhesus adipose mesenchymal stem cells,rASCs)中,评价嵌合型NGF/NTN在诱导该细胞为神经元细胞中的作用,为进一步探讨ASC-NTN体内修复帕金森氏病猴模型潜能提供实验基础。用带有NGF/NTN嵌合基因的重组腺病毒感染rASCs,通过RT-PCR、免疫荧光及ELISA检测重组NTN在rASCs的表达及产物定位,在外源化学诱导剂协同作用下对rASCs进行诱导。rAd-NGF/NTN感染rASCs后检测到NGF/NTN转录产物,表达产物可分泌到细胞外,分泌出的NTN蛋白在体外能够促进鸡胚背根神经节长出神经突起,维持胎鼠中脑神经元的存活。rASCs在内外源性诱导因素诱导下可向神经元样细胞分化。利用rAd-NGF/NTN可将NGF-NTN传递至rASCs中并表达,rASCs能够被定向诱导为具有分泌NTN作用的神经元样细胞。这些研究结果为将来rASCs-NTN移植进入帕金森氏病猴模型进行帕金森氏病治疗提供了重要依据。

勃氏甜龙竹水对高血脂大鼠肝脏的病理学影响

为从肝脏的病理组织学改变的角度研究甜龙竹水对高血脂大鼠肝脏病理变化的影响,用高脂饲料饲喂清洁级雄性SD大鼠,建立高血脂大鼠模型,分别在建模过程中和饲喂8周成功建模后,饲喂甜龙竹水和立普妥,预防和治疗高血脂的发生,并设立空白对照组.取各组大鼠肝脏,制作冰冻切片及石蜡切片,进行油红O、HE和Masson染色,光镜下检查肝脏的脂肪变性分度、炎症分级、纤维化分期.结果显示:竹水预防高血脂组,比建模成功后饲喂竹水治疗组的肝脏脂肪变性程度明显减轻,表明甜龙竹水对高血脂相关肝脏病变的发生有预防作用;同时,竹水治疗组比对照模型组的肝脏病变更轻,表明甜龙竹水对高血脂肝脏病变发生后有一定的治疗作用.本研究发现为甜龙竹水作为保健功能食品的开发提供了科学依据.

tRF的主要功能及研究方法

非编码RNA(ncRNA)是指不编码蛋白质但具有重要功能的RNA。转运RNA的衍生片段(tRF)是一类新兴的ncRNA,越来越多的研究发现它在许多方面发挥着重要作用,而不是简单的降解产物。比如,tRF可以控制基因表达水平,调节转录和翻译;且tRF与细胞的自我更新、增殖、分化密切相关。因此,tRF可能会导致多种疾病,如癌症、神经退行性疾病、免疫系统紊乱等。该文则主要介绍tRF的分类、主要生物学功能以及分子学生物和生物信息学研究方法。

tRNA衍生片段与恶性肿瘤

转运RNA(tRNA)是蛋白质翻译的衔接分子,tRNA衍生片段(tRNA-derived fragments,tRFs)有5种类型:tRF-1、tRF-2、tRF-3、tRF-5及i-tRF(中间体tRF),tRFs在众多恶性肿瘤中呈异常表达,且与患者预后不良相关。此外,tRFs通过调节细胞周期和参与癌症转移机制影响肿瘤细胞的生物学进程,展现出成为肿瘤预后标志物的潜力,深入研究tRFs在恶性肿瘤中的作用机制有助于肿瘤早期诊断和靶向治疗。本文综述了tRFs参与的生物过程、在不同肿瘤中作用机制及当前临床研究中的新进展,为后续tRFs研究提供新的见解。

YRNA:在癌症与非癌症中的研究进展

YRNA是40年前发现的一类高度保守的小分子非编码RNA,但它们的功能仍在调查中。新的研究表明,YRNA为人类细胞核中染色体DNA复制的重要因素。随着测序技术的发展,越来越多的研究提供更多关于YRNA的信息。本文综述了YRNA分子的类型、总结了YRNA分子的生物学功能,介绍了YRNA和YRNA衍生的小RNA(YRNA-derived small RNAs,YsRNAs)的研究现状,以及在包括肿瘤在内的若干疾病发生过程中的作用和潜在意义,并提出了未来研究的新视角,为YRNA的研究提供参考。