6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4对卵巢癌细胞干性的影响及其机制

目的:探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶4(PFKFB4)对卵巢癌细胞干性的影响及其机制。方法:利用慢病毒系统构建PFKFB4过表达的卵巢癌SKOV3和A2780稳定细胞系。采用Real-time PCR和Western blot检测干性相关转录因子SOX2、OCT4和NANOG的表达,成球实验检测细胞的成球能力,确定PFKFB4对卵巢癌细胞干性的影响;利用自噬激活剂雷帕霉素处理卵巢癌细胞,检测SOX2、OCT4和NANOG的表达及细胞的成球能力,评估自噬对卵巢癌细胞干性的影响;Western blot检测自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ和p62的表达,确定PFKFB4对卵巢癌细胞自噬的影响;生物信息学分析卵巢癌中PFKFB4与BNIP3表达的相关性;Real-time PCR和Western blot检测PFKFB4对BNIP3表达的影响。结果:过表达PFKFB4促进SOX2、OCT4和NANOG的表达和卵巢癌细胞的成球能力;雷帕霉素刺激增加SOX2、OCT4和NANOG的表达和卵巢癌细胞的成球能力;过表达PFKFB4增加卵巢细胞自噬水平,包括增加LC3B-Ⅱ蛋白表达、降低p62蛋白表达;生物信息学分析显示,卵巢癌组织中PFKFB4与BNIP3表达高度正相关;过表达PFKFB4增加BNIP3的mRNA和蛋白水平。结论:PFKFB4可能通过激活BNIP3介导的细胞自噬增强卵巢癌细胞的干性。

论股权代持中名义股东民事责任的承担

股权代持伴随着市场经济的发展以及政府投资优惠政策的出台应运而生。它为广大市场主体参与投资提供了新渠道,激发了市场活力、促进了经济增长。名义股东是股权代持中各方主体关系的交汇点,确定名义股东在股权代持中的民事责任十分必要。将股权代持的法律性质解释为委托代理,以此为基础将名义股东与各方主体间的关系分为3个层次。通过对不同层次关系和争议点的分析,确定名义股东承担民事责任的路径:名义股东与实际出资人之间尊重内部契约、公平分配责任;在公司内部以委托代理为基础进行类型化分析并衔接公司法特殊规则确定责任;在与公司外部第三人之间适用“内外有别”兼顾外观主义原则。

甘珀酸抑制eATP-P2X7R-NLRP3信号通路减轻慢性胰腺炎纤维化的实验研究

目的探讨细胞外ATP(eATP)-P2X7R-NLRP3信号通路在慢性胰腺炎(CP)胰腺纤维化中的作用以及ATP抑制剂甘珀酸(CBX)对CP的治疗作用。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机均分为5组:正常组,模型组,CBX低、中、高剂量组(分别为25、50、100 mg/kg)。造模结束后,CBX各剂量组小鼠分别腹腔注射相应剂量的药物。末次给药24 h后将小鼠脱颈处死。HE染色评估胰腺组织病理学改变;ATP化学发光法测定小鼠胰腺组织eATP水平;免疫荧光染色检测P2X7R、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测P2X7R、NLRP3、Caspase-1、缝隙连接蛋白(PAN-1)mRNA的表达。结果HE染色,光镜下可见正常组小鼠胰腺细胞分布紧密,排列规则,无纤维化及炎症细胞浸润。模型组细胞间隙增宽、腺泡萎缩、炎症细胞浸润且有大量胶原纤维生成,组织学评分较正常组显著升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组炎症细胞浸润及胶原纤维生成均减少,组织学评分降低。模型组小鼠造模后eATP水平较正常组显著升高(P<0.01),CBX中、高剂量组给药2周后,胰腺组织eATP水平均低于模型组。免疫荧光染色法和qPCR检测均显示,与正常组相比,模型组P2X7R、NLRP3、Caspase-1蛋白和mRNA表达升高(P<0.01);与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.05)。此外,qPCR检测结果还显示,模型组小鼠PAN-1 mRNA表达较正常组显著上调;与模型组相比,CBX中、高剂量组表达均下调(P<0.01)。结论CP病程中eATP水平显著增加并激活P2X7R,促进NLRP3炎性体组装,加重胰腺纤维化,CBX可下调P2X7R、NLRP3、Caspase-1,减轻胰腺炎症损伤及纤维化,从而发挥治疗作用。

清胰汤和姜黄素调整肠道微生态对重症急性胰腺炎的治疗机制

目的探讨清胰汤和姜黄素调整肠道微生态治疗重症急性胰腺炎(SAP)的机制。方法 40只SPF级健康Wistar大鼠,按照随机数字法分为4组,对照组、模型组、清胰汤组、姜黄素组,每组10只。通过注射牛磺胆酸钠(Na-Fc),诱发大鼠形成SAP模型,建模前清胰汤组、姜黄素组分别用相应中药汤剂灌胃1周。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠和胰腺组织病理变化,收集大鼠盲肠段粪便,16S rDNA测序技术分析4组大鼠肠道微生物菌群的变化。结果病理结果显示,模型组肠组织表现为肠壁水肿,肠黏膜上皮缺损、脱落等,上皮下间质空隙变宽,大量的中性粒细胞(PMN)等炎性细胞浸润等;胰腺组织表现为胰腺腺泡水肿、坏死,叶间隔增宽,大量的PMN等炎性细胞浸润等,而中药清胰汤和姜黄素组可减轻模型组中的胰腺损伤和肠黏膜受损程度(P<0.05)。肠道菌群微生态结果显示清胰汤或(和)姜黄素组可有效降低SAP大鼠厚壁菌门(包括梭菌纲、芽孢杆菌纲)、毛螺菌属数量菌群含量,升高拟杆菌门(包括拟杆菌纲、拟杆菌属)和乳酸杆菌属含量。结论中药清胰汤和姜黄素可增加SAP大鼠的肠道菌群的多样性和丰富性,调控微生物生态平衡,增加益生菌群的含量,降低有害菌群的定植能力,从而达到对肠道的保护作用。

重症胰腺炎急性肺损伤大鼠清胰汤灌胃治疗后肺组织炎症反应变化及其机制

目的观察重症胰腺炎急性肺损伤(SP-ALI)大鼠清胰汤灌胃治疗后肺组织炎症反应变化,并探讨其机制。方法将30只Wistar大鼠随机分为清胰汤组、模型组、对照组各10只。清胰汤组在实验前30 min给予清胰汤10 m L/kg灌胃,其余两组给予等量的生理盐水。清胰汤组与模型组在大鼠胆胰管内逆行注射牛磺胆酸钠制作模型;对照组仅在开腹后轻轻翻动胰腺,即关闭腹腔。24h后,颈部脱臼法处死大鼠,取出肺组织,固定,进行HE染色,镜下观察肺组织病理变化,并进行病理损伤评分。采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中的甲酰肽受体1(FPR1)、甲酰肽受体2(FPR2)mRNA,采用Western blotting法检测FPR1、FPR2蛋白。结果与对照组相比,模型组肺组织有明显肺血肿、肺淤血表现,大部分肺泡间隔明显增宽,肺泡腔部分融合成肺大泡,肺泡中大量PMN、巨噬细胞浸润,而清胰汤组炎症反应明显减轻。与对照组相比,模型组肺组织中可见明显肺泡水肿,大量中性粒细胞浸润,清胰汤组病例表现较模型组明显减轻。清胰汤组、模型组、对照组病理评分分别为(1.34±0.32)、(2.10±0.57)、(0.16±0.03)分,模型组肺组织病理损伤评分高于对照组(P<0.01),清胰汤组肺组织病理损伤评分低于模型组(P<0.05)。模型组肺组织中FPR1、FPR2 mRNA和蛋白相对表达量高于对照组,清胰汤组肺组织中FPR1、FPR2 mRNA和蛋白相对表达量低于模型组(P均<0.01)。结论清胰汤灌胃可减轻SP-ALI大鼠肺组织炎症反应,作用机制可能与FPR1、FPR2表达下调有关。

电力经营管理分析与辅助决策系统解决方案

信息化的系统管理在电力设计企业中起着非常重要的作用,由电力部门机构所形成的具有一定的保存价值的历史记录,该记录中包含着文字、图像、图表等不同形式的内容,能够为日后的电力发展提供很大的帮助。在电力设计企业的日常的管理工作中,各个部门的管理及核算工作,都会应用到。如果采用信息化的管理模式,能够对以往设计历史进行调取,为企业的发展做出贡献。文章对基于信息化系统的电力设计企业管理创新研究展开探讨。

超级愿望之零食屋

我是个超级零食狂，所以，我有一个超级愿望——建造一座美味的零食屋。零食屋。顾名思义屋子里所有的东西都是零食做成的：门,

电力市场环境下电网经营企业的风险管理

在我国市场经济的发展下,电力市场环境变得更加多元化,与此同时,电网企业之间的竞争也越来越大,这给电网经营企业的发展带来了一定的风险性,因此,电力市场环境下,电网经营企业的风险管理成为电网企业改革发展过程中所不可缺少的环节,相应的风险管理预测和防控策略对于电网企业的可持续发展有重要意义。

番石榴叶总黄酮对慢性胰腺炎小鼠纤维化的影响

目的：探讨番石榴叶总黄酮（total flavonoids from Psidium guajava leaves,TFPGL）对慢性胰腺炎（chronic pancreatitis,CP）小鼠纤维化的影响及其机制。方法：将50只C57BL/6小鼠随机均分为正常组,CP模型组,oxidized ATP（oxATP）组,TFPGL低、高剂量组。后4组小鼠腹腔注射雨蛙素50μg·kg^-1·h^-1（溶于200μL生理盐水）,每天6次,每周3 d,连续6周,建立慢性胰腺炎小鼠模型。6周后,oxATP组腹腔注射oxATP（15μg·kg^-1·d^-1,溶于200μL生理盐水）2周,TFPGL低、高剂量组分别予以TFPGL 0.186,0.372 g·kg^-1·d^-1灌胃2周。同时,正常组小鼠腹腔注射与模型组等体积、等频率的生理盐水。苏木素-伊红（HE）染色评估胰腺损伤程度;天狼星红染色检测胰腺组织胶原含量;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）,核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor 3,NLRP3）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1）的蛋白表达水平;酶联免疫吸附法测定胰腺组织中IL-1β（interleukin-1β）,IL-18水平。结果：与正常组比较,雨蛙素注射后胰腺损伤加重（P〈0.01）,Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平升高（P〈0.01）。天狼星红染色显示胰腺组织细胞周围胶原Ⅰ（ColⅠ）,胶原Ⅲ（ColⅢ）含量较正常组升高（P〈0.01）。与模型组比较,oxATP组及TFPGL低、高剂量组炎症损伤及纤维化程度均减轻,表现为天狼星红染色程度减轻（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平均降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：TFPGL可通过抑制P2X7R介导NLRP3炎性体信号途径活化显著减轻慢性胰腺炎模型小鼠的慢性炎症及纤维化程度。

柴胡桂枝汤减轻慢性胰腺炎神经性腹痛机制的探讨

目的:探讨柴胡桂枝汤(CHGZT)减轻三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠慢性胰腺炎(CP)神经性腹痛的初步机制。方法:50只雄性SD大鼠随机均分为5组,分别为假手术组、模型组、CHGZT低、中、高剂量组(4、8、16 g·kg^(-1))。假手术组轻轻翻动胰腺后即关腹,模型组采用向胰管内逆行注射2%TNBS-10%乙醇。CHGZT在造模后4周开始灌胃给药,连续2周。5组大鼠分别于术后6周进行Von Frey疼痛阈值检测;苏木素-伊红(HE)染色评估胰腺组织慢性炎症及纤维化病变;免疫组化法(IHC)检测PGP9.5蛋白表达,同时观察神经周围炎性改变;IHC及免疫荧光(IF)染色观察胰腺相关胸段脊髓后角离子钙结合蛋白-1(Iba-1)、嘌呤能受体P2X7(P2RX7)的定位及P2RX7和小胶质细胞的共表达。结果:与假手术组比较,模型大鼠胰腺组织腺泡萎缩评分、炎性浸润评分、纤维化评分显著增高(P<0.01),大鼠在不同力值疼痛反应值均明显升高(P<0.05,P<0.01),PGP9.5周围炎性浸润评分显著升高(P<0.01),模型组大鼠脊髓后角Iba-1与P2RX7表达均显著增强(P<0.01);与模型组比较,CHGZT高、中剂量组明显降低大鼠胰腺组织腺泡萎缩评分、炎性浸润评分、纤维化评分,明显降低疼痛反应值,明显降低PGP9.5周围炎性浸润评分(P<0.05,P<0.01),CHGZT高、中、低剂量组显著降低Iba-1及P2RX7表达(P<0.01)。结论:CHGZT可明显减轻CP模型大鼠腹痛程度,可能和通过抑制胰腺内神经炎症、降低相应脊髓后角小胶质细胞P2RX7活化有关。