虚寒呕吐模型的复制和吴茱萸汤的止呕作用研究

目的:为客观准确评价吴茱萸汤的止呕作用,本研究首次尝试顺铂致呕模型的基础上。方法:采用给予苦寒中药大黄的方式制备了病症结合的虚寒呕吐模型,并基于两种呕吐模型,分别从体质量、生化指标和脏器指数等机体生理生理病理状态,以及异食癖等行为学多个方面对吴茱萸汤的止呕作用进行了评价。结果:大鼠口饲大黄一段时间后表现出了明显的虚寒状态和一定程度的病理指标的变化,而对证给予吴茱萸汤后这种病理状态和病理指标均有较为明显的改善,而不具有虚寒状态的顺铂对照组大鼠给予吴茱萸汤治疗后反而加重了病理指标的变化;吴茱萸汤对两种呕吐模型均有显著的止呕作用(P<0.01),但对大黄加顺铂制备的虚寒呕吐动物模型的作用优于单纯顺铂制备的呕吐模型(P<0.01)。结论:该方法制备的病症结合模型比顺铂致呕模型更适于吴茱萸汤等中医复方治疗虚寒呕吐药效学的评价研究,本研究结果也从以方测证和方证相应的角度反映了该方法复制虚寒呕吐模型的可行性和合理性。

辛热药附子调节心血管作用和机制研究进展

已有研究证明温里药在强心、抗心肌缺血、抗心律失常、抗休克、降血压、降血脂、降血糖、改善血液循环等心血管相关病症方面疗效确切。近年来研究者对辛热药附子及其活性成分基于上述病证的作用及其分子机制进行了大量的研究。通过查阅近十几年相关中外文献,对该药及其成分治疗心血管相关疾病的研究概况进行系统综述,为后续相关的深入研究奠定理论和文献基础。

试论“膏浊”致病论

"膏浊"理论始于《黄帝内经》,尽管后世将其不断丰富完善,但仍支离破碎,尚未形成完整的理论体系。通过梳理"膏浊"的内涵与外延,"膏浊"的表现形式,以及"膏""浊"与"湿""痰""瘀"之间相互转化的关系,说明"膏浊"入血,变痰生瘀,阻滞血脉或络脉,是引起血脂异常、2型糖尿病、心脑血管疾病等多种慢性重大疾病的起始病因;耗气伤血,损脉伤脏,苛精罚神,变证百出,各种继发病变相继产生。现代研究也证实了肥胖与多重疾病的相互关联性。"膏浊"理论是中医病因学理论的重要组成部分,"膏浊"影响/决定了多种慢性重大疾病的发生发展方向和预后,值得进一步深入、系统研究。

GOD-POD法在3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗评价中的应用

目的:通过葡萄糖氧化酶-过氧化物酶(Glucose oxidase-peroxidase,GOD-POD)法检测脂肪细胞葡萄糖消耗,建立简便、经济的脂肪细胞胰岛素敏感性的评价方法。方法:诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,分别采用高浓度葡萄糖(25 mmol/L)、地塞米松(Dexamethasone,DEX)(1.0μmol/L)诱导脂肪细胞产生胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR),GOD-POD法测定糖浓度,动态观察诱导过程中细胞糖消耗,并计算胰岛素敏感性指数(Insulin sensitivity index,ISI);同时应用RT-PCR检测脂联素(Adiponectin)mRNA表达。结果:通过该方法检测,可以反映脂肪细胞对葡萄糖的摄取利用,以胰岛素刺激下较基础状态细胞葡萄糖消耗的增加量,计算出ISI,能够反映细胞对胰岛素的敏感性及抵抗程度。结论:GOD-POD法能够准确测定细胞总体葡萄糖消耗,可用于脂肪细胞糖摄取利用与IR评价,此方法操作简便、经济易行。

热性中药成分辣椒碱调节小鼠UCP1的分子机制研究

目的为进一步揭示热性中药的分子机制、诠释中药寒热药性理论的科学内涵,同时对能量代谢开关解偶联蛋白亚型1(UCP1)的表达调控作用进行研究。方法采用热偶技术对小鼠的核心温度和尾部皮肤温度进行了给药后的实时监测,温度的采集分析采用了热偶检测技术,UCP1的表达量分别采用了荧光定量PCR和Western blot的技术。结果辣椒碱给药后小鼠机体中心温度先降低后上升,尾部皮肤温度以升高为主,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01);UCP1的基因和蛋白的表达量均明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论上调UCP1的表达进而提高机体的能量代谢可能是辣椒碱作为辣椒的热性成分表征热性属性的生物分子机制之一。

基于TRPV1受体的桑菊饮止咳作用的分子机制研究

目的为了诠释桑菊饮治疗咳嗽的科学内涵,研究桑菊饮治疗咳嗽的分子机制。方法用辣椒素诱导小鼠咳嗽模型,分别设置正常组,模型组,桑菊饮高、中、低剂量治疗组,记录各组小鼠给药前后的咳嗽次数,采用荧光定量PCR及Western Blot技术对TRPV1的表达量进行测定,采用ELISA法检测小鼠三叉神经节组织中P物质的释放量。结果小鼠被辣椒素刺激后,咳嗽次数明显增加,TRPV1表达上调,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05),给予不同剂量的桑菊饮水煎剂治疗5 d后,高、中剂量组小鼠咳嗽次数减少,TRPV1表达下调,P物质含量降低,与模型组相比差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05),其中以中剂量组效果最佳,低剂量组效果不明显。结论下调TRPV1的表达而减少小鼠咳嗽次数可能是桑菊饮治疗咳嗽的分子机制之一。

基于熵值的冠心病基因网络模块划分方法评价与模块功能相似度分析

目的解决网络模块划分方法优选问题,并对划分结果进行功能解析和评价。方法利用多种常用模块划分方法,包括MCLi QUE,Cluster one,NCMine,PEWCC,Fuzzifier cluster,Community cluster,Connected component cluster,MCL cluster,MCODE cluster,Spectral clusters of protein sequences和AP等,对冠心病基因网络进行模块划分,通过网络结构熵值计算进行评价,优选出一种方法进行划分模块。基于基因功能富集分析对模块的通路功能进行富集,并利用杰卡德相似指数分析方法,对模块与总网络的功能进行比较和分析。结果用MCODE cluster方法划分出11个模块,网络熵值为4.33637,在几种方法中熵值最小,最适于冠心病基因网络模块的识别。基于基因功能富集分析和杰卡德相似指数分析方法,发现11个模块能涵盖冠心病相关通路中的38条,覆盖率达到73.1%。其中,模块3,4和7能用较少的基因富集到较多的功能。结论网络信息熵可以为模块划分方法的评价提供一种可行方案。划分后的模块可以代表原疾病网络的大部分功能,并在功能富集上有一定优势,对进一步简化和理解疾病网络具有实际意义。

代综方对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的作用研究

目的研究代综方(DZF)对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的作用及可能的调控机制。方法分化成熟的脂肪细胞给予不同浓度DZF或对照药物罗格列酮(Ros)干预48 h,检测培养上清中葡萄糖消耗量、甘油、游离脂肪酸(NEFA)浓度及胞内甘油三酯(TG)含量;应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测葡萄糖转运体4(GLUT-4)、脂滴包被蛋白(perilipin)、激素敏感性脂肪酶(HSL)的mRNA表达。结果 DZF使培养上清中葡萄糖消耗量增加(P<0.01)、甘油的浓度不同程度增加,但对NEFA无显著影响(P>0.05),DZF使胞内TG降低(P<0.01);对照组Ros增加葡萄糖消耗(P<0.01),增加胞内TG积累(P<0.05),对培养上清中甘油、NEFA无显著影响(P>0.05);DZF各组能不同程度上调GLUT-4、HSL的mRNA表达,显著下调Perilipin的mRNA表达(P<0.01);Ros能上调GLUT-4、HSL、Perilipin的mRNA表达。结论 DZF能促进脂肪细胞葡萄糖消耗和胞内TG分解,改善脂质合成与分解的动态平衡,其作用机制与Ros增加胞内TG积累不同。

经方治疗肝胆病临证体悟

根据方证对应原则,临证运用五苓散治疗脂肪肝,半夏泻心汤治疗乙型肝炎,大柴胡汤治疗胆囊息肉均取得一定疗效。

基于新型冠状病毒肺炎解读伤寒实质及寒温统一

既往研究认为,《伤寒论》为一切外感热病而设,为广义伤寒;且伤寒详于寒而略于温,温病详于温而略于寒,伤寒与温病为两种不同的理论系统,两者相辅相成,相得益彰,共同构成外感发热性疾病的两大证治体系。新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)虽属温病范畴,但运用《伤寒论》经方合方——“清肺排毒汤”等治疗取得显著疗效。有鉴于此,我们重新梳理伤寒与温病实质,以及两者之间的关系,认为:(1)《伤寒论》为狭义伤寒,伤寒本质可能为炎症,其六经辨证本质为人体对炎症反应不同阶段的描述,《伤寒论》为临床治疗急危重症的专著。(2)温病的本质同样可能为炎症,伤寒与温病同为感染性疾病导致的炎性损伤状态。(3)寒温存在能够统一的病理生理学基础,但因致病因素不同而致临床表现有所差别。伤寒的六经辨证,温病的卫气营血辨证与三焦辨证,同为人体对炎症反应的不同阶段的诊疗方法,但其背后蕴藏的方证辨证则为其共性特征。虽然辨病机的方法不同,但无论在病理生理还是方证辨证治疗上,伤寒与温病能够统一。因此,在新冠肺炎的中医认识上,不应拘泥于伤寒与温病的病名归属之争,可运用伤寒六经辨证与方证辨证进行治疗,且三阳合病为其重要病机。

《伤寒论》表里同病之临证体悟

表、里是疾病的相对病位概念,是人体患病之后,症状反映于体表、体内的概括性总结。《伤寒论》对表里同病的治疗已经形成了完整的理论体系,具体有如下3种：先表后里、表里同治,以及太阴里证较急时的急当救里、先里后表。

从薏苡附子败酱散证管窥辨疑难症方法

通过对薏苡附子败酱散证条文的分析,认为条文中存在三对矛盾的症状。从张仲景对这三对矛盾的处理——以矛盾的症状为突破口,从矛盾的现象中寻找诊疗思路,可以管窥其辨治慢性肠痈的思路,更可以学习其处理由多元病机衍化出来的多重矛盾复杂症候的思路,对诊治疑难病症具有较高的指导意义。

高效液相色谱法同时测定吴茱萸汤中5种活性成分的含量

目的建立吴茱萸汤中吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱、6-姜酚、芦丁5种活性成分含量同时测定的方法。方法采用HPLC法,色谱柱:COSMOSIL 5 C18-MS-II(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相:乙腈(0.1%磷酸A)-水溶液(0.1%磷酸B),梯度洗脱,流速1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长210 nm。结果吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱、6-姜酚、芦丁分别在0.0098~0.196、0.205~4.10、0.0026~0.052、0.039~0.78、0.017~0.34μg内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.9998、0.9999、0.9997、0.9996、0.9998,加样回收率分别为95.2%、98.8%、96.4%、99.9%、95.2%。结论该方法快速简便,重复性好,专属性强,可作为吴茱萸汤的质量控制标准和方法。

基于已上市中成药治疗气血两虚证的处方用药规律分析

目的探究已上市中成药治疗气血两虚证的处方及用药规律。方法收集已上市中成药,构成中成药数据库,筛选后得到治疗气血两虚证的中成药处方。应用古今医案云平台和Cytoscape 3.6.1对得到的中成药处方进行数据分析。结果得到中成药处方338种,数据分析。结果使用频次较高的药物有当归,熟地黄,黄芪,甘草,人参等。主要治法为益气养血,补气养血,益气补血,滋补肝肾等。提取出的基础方为四君子汤,当归补血汤,八珍汤。结论基于古今医案云平台对已上市中成药中治疗气血两虚证的中成药处方进行筛选分析,比较分析后发现用于治疗气血两虚证的药物中,不同中成药采用不同的药物配伍,但是黄芪,熟地黄,人参,当归等药物的配伍使用仍是较为核心的部分。同时在这些核心药物配伍的基础上依据不同临床表现,进行加减配伍,使在治疗气血两虚证的同时依据临床症状对症治疗。

冠心病从痰瘀论治探析及思考

冠心病是严重危害人类健康的常见病、多发病,近年来,我国人群的冠心病发病率及死亡率呈明显上升趋势。中医认为,痰浊、瘀血是冠心病的重要病理因素,痰瘀互结、痹阻心脉导致心脉不通是冠心病的主要病理基础,同时也与冠心病的诸多危险因素密切相关。临床研究表明,痰瘀互结是冠心病的主要证型。因此,在治疗上强调"痰瘀同治"的重要性,在临床应用中,又应据证立法,灵活应用。

基因组学与中医药研究

随着人类基因组计划的完成及后基因组时代的到来,功能基因组学已成为新的研究重点。基因组学研究的方法学内容与中医学许多方面有相似之处,决定了两者相互渗透的可能性。同时,基因组学的发展为中医药实现现代化提供了良好的契机。目前,基因组学与中医药研究主要集中于中医证候、中药、针灸等领域,并初步取得了一些进展,但存在的问题也值得众多中医药工作者进一步思考与探讨。