大肠杆菌中插入表达信号肽提高吡咯喹啉醌产量的研究

本文将载体pET-22b的信号肽基因pelb插入pET-28a-pqq的T7启动子和pqq基因之间,得到重组工程菌E.coli BL21(pET-28a-pelb-pqq),发酵生产吡咯喹啉醌(PQQ)。结果表明PQQ最高产量可达40.73 mg/L,比对照菌E.coli BL21(pET-28a-pqq)提高了24.36%。此外,工程菌和对照菌前3 h发酵的单位菌体产量及单位菌体产率均较高,且此后呈下降趋势。而E.coli BL21(pET-28a-pelb-pqq)在21h后的PQQ产量及生物量均增加,推测PQQ产量与菌体生物量之间存在同促关系。

紫外线—氯化锂诱变选育吡咯喹啉醌高产菌

以K.pneumoniae为出发菌株,通过紫外线和氯化锂诱变筛选PQQ高产菌。结果表明,当紫外照射时间为45 s时,致死率为85%;当氯化锂剂量为0.3%时,致死率达85%。紫外诱变所得菌株U1和U2的PQQ产量分别是出发菌株的2.7倍和6倍。氯化锂诱变所得菌株L1的PQQ产量是出发菌株的5倍。紫外线和氯化锂复合诱变所得菌株F1的PQQ产量是出发菌株的1.4倍。紫外诱变所得菌株U2经连续传代15次,其PQQ产量仍能达到原代菌的95%,表明该菌能稳定生产PQQ。该研究为进一步提高PQQ产量奠定了基础。

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆与原核表达

以筛选得到的鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)基因组DNA为模板,PCR扩增了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因,构建了克隆载体pET-28a-PEPC。将测序结果正确的重组子转化到大肠杆菌BL21中,获得重组菌BL21-pET-28a-PEPC。经IPTG诱导,该重组菌实现了PEPC的高效表达,并且生长速度明显快于对照菌大肠杆菌BL21,可作为宿主用于构建碳固定工程菌。

心有多大 舞台就有多大——一次化学课外活动的感悟

一、活动的背景 为顺应新课程改革的要求，有效地激发我校学生学习化学的兴趣，并将所学化学基础知识应用于实际生活，解决生活中的实际问题，从而提高学生应用知识的能力，我校生化组开展“生物、化学与生活”系列活动。

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