荧光实时定量PCR定量水体中日本血吸虫尾蚴方法的建立

目的建立快速、高效、特异的定量水体中尾蚴的数量和检测水体中日本血吸虫尾蚴残余基因组DNA的方法,来评估水体受日本血吸虫尾蚴污染的程度。方法根据日本血吸虫基因组DNA中的3个多拷贝序列Sjrh1.0(序列号:U92488.1)、18S小亚基单位核糖体核酸基因(18SrRNA)序列(序列号:AY157226.1)和逆转录转座子SjR2的G55A序列(G55A)(序列号:AF412221.1),设计常规PCR引物和实时定量PCR引物,选取较好的靶序列建立SYBR GreenI实时定量PCR方法,绘制尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线,并对疫水中日本血吸虫尾蚴残余的基因组DNA进行检测。结果尾蚴数的对数与Ct值的标准曲线有良好的线性关系,相关系数r2为0.918 6,重复性良好。结论本方法特异性高,灵敏,可定量水体中尾蚴数,对疫水检测有一定的预警作用。

目标序列捕获二代测序技术在苯丙酮尿症基因诊断中的应用

目的评估目标序列捕获二代测序技术在苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)基因诊断中的应用价值。方法采用目标区序列捕获及第二代测序技术对9例经典型PKU患者的苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)基因进行检测;采用Sanger测序技术对患者及其父母基因突变型进行验证。结果 9例患者检测到PAH基因的12种致病性突变,包括7种错义突变(p.I65T、p.F161S、p.Q204C、p.R241C、p.L242F、p.R243Q和p.Q375E),2种无义突变(p.R111X和p.Y356X),3种剪接突变[c.442-1G>A(IVS4-1G>A)、c.1315+6T>A(IVS12+6T>A)和c.1316-2A>C(IVS12-2A>C)],以及3种非致病性的变异(p.Q232Q、p.V245V和p.L385L),致病性突变均来自患者父母。其中,2个致病性突变未见报道,分别为c.1316-2A>C和p.Q375E(CAA->GAA)。结论目标序列捕获二代测序可以准确检测出PAH基因突变,对遗传病因明确的疾病具有一定的临床应用价值。

泛素特异蛋白酶26基因多态性与男性不育关系的研究

目的泛素水平与精子数量的质量存在明显的相关。X染色体连锁的泛素特异蛋白酶26（USP26）基因在人类睾丸中特异表达，其变异与精子发生的关系存在争议。本研究旨在研究中国汉族男性USP26基因的多态性分布及其与男性不育的关系。方法用基因组DNA测序的方法分析221例不育男性（包括无精子症、弱精子症、少精子症和少弱精子症患者）和101正常生育男性的USP26基因全序列，分析其多态性和基因型在不同类型患者与生育对照之间的差异。结果本研究共发现6个变异位点：370—371insACA、494T〉C、508G〉A、576G〉A、1044T〉A和1423C〉T，对应的氨基酸改变分别为T123．124ins、L165S、G170R、E192E、F348L和H475Y。其中576G〉A（E192E）为同义突变，其氨基酸序列没有改变。508G〉A（G170R）为首次发现，其余5种变异在先前的研究中已有报道。与猕猴基因组比较发现370．371insACA和494T〉C为回复突变。576G〉A在正常生育组中高达78．2％，明显高于不育男性的49．1％（P〈0．01）；其余5个位点在不育和生育人群中没有明显差异（P〉0．05）。本研究共发现9种USP26基因型。在不育与生育人群的主要基因型有370insACA＋494C＋1423T、576A和576G型。576A和576G型在不育与生育人群中的分布存在明显差异（P〈0．01），而370insACA＋494C＋1423T型没有统计学差异（P〉0．05）。576A型在正常精子活力组明显高于低活力组（P〈0．05）；576G型在弱精子组明显低于正常生育男性对照（P〈0．01）；370insACA＋494C＋1423T型在不同精子密度和精子活力组间均没有明显差异（P〉0．05）。结论我国汉族人群中USP26基因370insACA＋494C＋1423T串突变与精子发生没有直接关系。USP26基因576G〉A位点的同义SNPs在不同精子活力组间有显著差异，576A可能有潜在的促进精子活力的作用。

刘少奇的领导思想及其现实意义

刘少奇在长期的领导实践中,形成了独特的领导思想理论。他指出领导者是有理论的引导者,指明群众路线是领导者与群众建立正确关系的路线,强调按民主集中制改革领导制度,认为领导者要不断加强自身的党性修养等,极大地丰富了党的领导思想理论,是毛泽东领导思想的重要组成部分。在新的历史时期认真研究刘少奇的领导思想仍具有重要的现实意义。

苯丙酮尿症患儿家庭护理过程中血清苯丙氨酸水平的影响因素分析

目的 分析苯丙酮尿症(PKU)患儿在家庭护理过程中血清苯丙氨酸(Phe)水平的影响因素,期望提高护理水平,从而有效控制患儿Phe水平。方法 通过新生儿疾病筛查鉴别PKU患儿,运用时间分辨荧光分析法随访PKU患儿的足跟血Phe浓度。建立PKU患儿档案,记录家庭一般信息。应用简易应对方式问卷评估家长对PKU患儿治疗态度。结果 父母对PKU患儿的护理态度直接影响患儿的Phe控制水平。父母护理态度越积极,对Phe控制水平越好(r=0. 358,P=0. 002);父母护理态度越消极,对Phe控制水平越差(r=-0. 253,P=0. 013)。通过多因素分析,户籍地、父母学历水平、家庭人均月收入、积极态度和消极态度都是患儿Phe控制水平的重要影响因素。结论 家庭护理对PKU患儿Phe控制水平受到父母文化水平、经济状况、治疗态度和户籍地多因素影响,加强对PKU患儿父母的宣传教育、经济补助、政府和社会支持是必要的。

检测水体日本血吸虫毛蚴PCR方法的建立

目的建立一种灵敏、特异的痕量检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法。方法取感染6～8w日本血吸虫的小鼠肝脏,碾磨后沉淀,孵化并利用间接连续离心法富集毛蚴,采用蛋白酶K-苯酚法提取毛蚴基因组DNA。登陆GenBank查询获得日本血吸虫保守序列18S小亚基单位核糖体脱氧核酸(18SrDNA)基因,利用引物设计软件PrimerPremier5.0和Oligo6自主设计一对引物,建立检测日本血吸虫毛蚴的PCR方法。梯度稀释血吸虫毛蚴基因组DNA进行PCR方法的灵敏性试验,设置阴性对照,PCR产物通过电泳鉴定。结果 PCR扩增日本血吸虫毛蚴得到特异性DNA片段,片段长度为463bp,阴性对照组无扩增产物。PCR法可检测出日本血吸虫毛蚴DNA的最低浓度为62.5pg/μL。结论建立的检测日本血吸虫毛蚴PCR方法灵敏、特异,具有一定的预警作用。

议论文的起承转合

起承转合是诗文结构的一般顺序。元范椁《诗法》云。“作诗有四法；起要平直，承要春容，转要变化，合要渊永．”不唯作诗如此，一般议论文往往也是遵循这一结构原则的。本文试根据笔者教学体会，结合议论文的一般结构，并以苏洵《六国论》为例，对议论文的起承转合谈一点粗浅的认识。

课堂教学的重点应该放在哪里

语文教学中常常出现这样的情形．学生傚的详细讲，重点讲，学生不懂的则简单讲．或不讲。这样讲不能满足学生的求知欲望，势必浪费学生的时间，阻碍学生智力的开发。

采血时间对新生儿先天性甲状腺功能减低症筛查结果的影响

目的 分析采血时间与新生儿促甲状腺素水平的关系及对新生儿先天性甲状腺功能减低症筛查结果的影响。方法 回顾分析2013年4月至2021年12月筛查的新生儿促甲状腺(TSH)水平,TSH水平检测结果来自于时间分辨荧光分析法的3种检测平台,包括半自动时间分辨荧光分析仪(Wallac 1420)、全自动时间分辨荧光分析仪(Wallac1235)和遗传学筛查系统(GSP)。当TSH水平位于截断值及以上,进行召回复查或进一步诊断,确诊患儿给予规范治疗并定期随访。结果 新生儿TSH水平和初筛阳性率在出生后3~6 d仍然偏高,第4天仍然达到最高,随后急剧下降,在出生后第7天趋于平稳。初筛阳性中患儿占比与新生儿TSH水平和初筛阳性率分布相反,随采血时间的延长有上升的趋势(RR=0.779,P<0.001)。在出生后第4天最低,随后急剧升高,在出生后第12天趋于平稳。结论 新生儿TSH水平受采血时间的影响,可能会导致过多的假阳性和假阴性,建议建立采血时间特异性的TSH截断值。

苏州市新生儿重症监护室新生儿29项遗传代谢病筛查的影响因素分析

目的分析苏州市新生儿重症监护室(NICU)新生儿促甲状腺激素(TSH)、17α-羟孕酮(17α-OHP)及串联质谱筛查结果,评估NICU新生儿遗传代谢病筛查的影响因素。方法选取2017年1月—2021年12月在南京医科大学附属苏州医院苏州市新生儿疾病筛查中心完成29项遗传代谢病筛查的NICU新生儿为NICU组,相同批次的其他新生儿作为对照组。所有新生儿均进行29项遗传代谢病筛查,检测指标包括TSH、17α-OHP、11种氨基酸、30种酰基肉碱、游离肉碱及琥珀酰丙酮。结果共确诊先天性甲状腺功能减退症(CH)94例,先天性肾上腺皮质增生症(CAH)6例,串联质谱筛查疾病60例。NICU新生儿中CH、CAH及串联质谱筛查疾病的发生率分别为1/144、1/239及1/180,均显著高于对照组(χ^(2)=33.33,P<0.05;χ^(2)=197.43,P<0.05;χ^(2)=32.96,P<0.05)。NICU新生儿TSH、17α-OHP及串联质谱筛查疾病的初筛阳性率分别为3.34%、14.46%及14.74%,均显著高于对照组(1.44%、0.74%及2.76%),差异均有统计学意义(χ^(2)=18.10,P<0.05;χ^(2)=1671.00,P<0.05;χ^(2)=375.40,P<0.05)。NICU组TSH和17α-OHP初筛阳性中真阳性率分别为20.83%和2.88%,均显著高于对照组(χ^(2)=10.81,P<0.05;χ^(2)=7.60,P<0.05)。不同性别新生儿TSH和17α-OHP初筛阳性率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同胎龄和出生体质量的新生儿TSH、17α-OHP及串联质谱初筛阳性率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论NICU新生儿TSH、17α-OHP及串联质谱筛查疾病的初筛阳性率均显著偏高,性别、胎龄及出生体质量是导致初筛阳性率偏高的独立因素。

C14∶1/C12∶1在新生儿筛查极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症中的应用价值

目的探讨非衍生化串联质谱法(MS/MS)中十四烯酰基肉碱(C14∶1)/十二烯酰基肉碱(C12∶1)在新生儿筛查极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)中的应用价值,并探索筛查VLCADD的最佳指标组合方案。方法回顾性分析2014年1月至2021年12月南京市新生儿疾病筛查中心和苏州市新生儿疾病筛查中心17例MS/MS筛查发现并经酰基辅酶A脱氢酶极长链(ACADVL)基因确诊的VLCADD患儿和423507名经MS/MS筛查正常的新生儿资料。采用受试者工作特征(ROC)曲线分别确定所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1筛查VLCADD的截断值。同时将不同指标单独或联合组成5个结果判读方案,分别为方案1(C14∶1/C12∶1)、方案2(C14∶1)、方案3(C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16)、方案4(C14∶1/C12∶1+C14∶1)和方案5(C14∶1/C12∶1+C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16),并计算各方案的检出率、假阳性率、阳性预测值,采用χ^(2)检验比较其筛查效率。结果所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1的截断值均为2.80。5个判读方案筛查VLCADD的检出率均为17/17。其中方案1假阳性率[26.15‰(11075/423524)]最高,阳性预测值[0.15%(17/11092)]最低。方案4(方案5)假阳性率最低,为[0.02‰(10/423524)],阳性预测值最高,为[62.96%(17/27)],与方案1、方案2、方案3比较,假阳性率(χ^(2)值分别为302.30、11191.50和32.06)和阳性预测值(χ^(2)值分别为102.51、3485.61和13.83)差异均有统计学意义(P均<0.001)。结论C14∶1/C12∶1是新生儿筛查VLCADD有效的辅助判读指标,推荐C14∶1/C12∶1+C14∶1为非衍生化串联质谱法判读VLCADD的最佳筛查指标组合。

江苏省苏州市苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变特点

目的探讨江苏省苏州市苯丙酮尿症(PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因突变特点。方法选择2008-2011年,于上海新华医院通过串联质朴技术、苯丙氨酸负荷试验及尿蝶呤检测确诊分型的江苏省苏州市内25例PKU患儿及其父母为研究对象,通过SNaPShot基因分型技术和二代测序(NGS)技术,检测25例PKU患儿及其父母的PAH基因的突变。采用Sanger测序验证上述2种测序的结果,并分析苏州市PKU患儿PAH基因突变特点。本研究遵循的程序符合南京医科大学附属苏州医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并与患儿监护人签署临床研究知情同意书。结果 SNaPShot基因分型技术、NGS技术检测本组受试者PAH基因突变结果与Sanger测序结果一致。25例PKU患儿中,运用SNaPShot基因分型技术,共检测出PAH基因的9种突变类型,分别为Exon7-R243Q、Exon6-Y204X、Exon7-R241C、Exon5-IVS4-1、Exon12-R413P、Exon3-R111X、Exon7-R261Q、Exon10-W326X及Exon11-Y356X,PAH基因突变检出率为58.0%(29/50)。其中10例患儿可通过SNaPShot基因分型技术检测到PAH基因纯合突变或复合杂合突变,家系分析可提供100%的基因诊断信息。对另15例不能提供100%基因诊断信息的PKU患儿运用NGS技术进行检测,在其中12例患儿中检测到PAH基因复合杂合突变,家系分析可提供100%的基因诊断信息;其余3例患儿仅检测到PAH基因单位点杂合突变。运用NGS技术发现了PAH基因的另外15种突变,包括突变频率为4%的A434D、V399V和Y325X。上述2种方法对PAH基因总突变的检出率为94%(47/50)。结论江苏省苏州市PKU患儿的PAH基因热点突变包括R243Q、Y204X、R241C、IVS4-1、R413P、R111X、A434D、V399V和Y325X。运用SNaPShot基因分型技术检测PAH基因突变,具有一定临床应用价值。

人乳头瘤病毒52型E 6和E 7基因突变与宫颈癌及癌前病变关系的研究

目的分析人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)52型E 6和E 7基因突变位点分布,评估基因突变与宫颈癌及癌前病变的相关性。方法收集2016年1月至2017年5月经HPV DNA检测为HPV 52单独阳性的DNA样本120例。应用Generunner V 3.01软件设计扩增E 6/E 7区域的1对PCR引物和Sanger测序的4条延伸引物。以HPV 52原型(Gen Bank Accession No.X 74481.1)作为参考序列,应用MEGA 5.05软件分析每个样本的碱基序列和蛋白序列的变异;应用SPSS 17.0进行一般线性相关检验和Fisher's检验或者Pearson Chi-square(χ~2)检验,分析E 6和E 7基因突变与宫颈病变的关系。结果在104例样本中,共发现HPV 52 E 6基因的16个突变位点和E 7基因的17个突变位点。HPV 52 E 6和E 7基因中不同突变位点的突变率差异无统计学意义(χ~2=14.829、12.548,P=0.464、0.766)。在HPV 52 E 6和E 7基因的33种突变中,无突变位点的突变率随着宫颈病变等级恶化有升高或降低的趋势(P>0.05)。HPV 52 E 6基因在CIN 1+样本中的突变频率(14.0%)显著低于正常样本中突变频率(34.4%),(OR=0.31,95%CI=0.11~0.85,χ~2=5.500,P=0.019)。E 7基因的突变频率在CIN 1+样本中的突变频率(16.3%)也低于在正常样本中的突变频率(27.9%),但差异无统计学意义(OR=0.50,95%CI=0.19~1.35,χ~2=1.908,P=0.167)。结论在单独感染HPV 52的条件下,E 6基因突变是阻碍宫颈病变和宫颈癌发生发展的因素。

苏州地区全自动荧光免疫分析仪(GSP^(TM))检测TSH的性能验证及新生儿TSH切值建立

目的评估全自动荧光免疫分析仪(Genetic Screening Processor,GSP^(TM))检测促甲状腺素的性能,并建立筛查新生儿促甲状腺素的切值。方法通过检测试剂盒自带标准品B/C/E 3个浓度样本、试剂盒自带高、低水平质控品,和Perkin Elmer公司的制备的6个浓度的线性样本,分析GSP^(TM)系统的精密度、正确度和线性范围。通过检测已经确诊的3261例新生儿疾病筛查标本(甲减患儿129例和正常对照3132例),运用受试者工作特征(ROC)曲线法建立本中心筛查新生儿促甲状腺素的初始切值。结果 GSP^(TM)筛查系统批内变异系数为4.59%~6.83%,均小于厂家声明的8.3%;批间变异系数为6.60%~7.46%,均小于厂家声明的8.5%。GSP^(TM)系统检测的高、低质控品浓度平均值分别为60.29μU/m L和14.63μU/m L,都在试剂盒声明的允许范围之内。线性标本的检测值和理论值的线性方程为y=0.8905x+1.1286,相关系数的平方(R2)为0.99961。GSP^(TM)系统TSH测定浓度值与1235系统的测定值之间呈现显著的正相关,Spearman r=0.772,P<0.001。ROC曲线下面积为0.999,P<0.001.TSH水平为7.13μU/m L时,Youden系数的值最大为0.998,灵敏度为100%,特异度为98.8%。结论GSP^(TM)系统对TSH的定量性能符合厂家声明的要求,应用于新生儿TSH水平筛查是可行的。本中心建立的GSP^(TM)筛查新生儿TSH的切值为7.13μU/m L。

中孕母血清可溶性Corin蛋白水平与子痫前期关系的研究

目的评估中孕期血清可溶性Corin蛋白水平与子痫前期的关系。方法选择建立孕产保健卡在做唐氏筛查时被确诊为子痫前期(PE)孕妇中孕期血清标本39例为PE组,正常中孕期孕妇对照血清标本90例为对照组。运用人Corin蛋白(CRN)酶联免疫分析试剂盒(TSZ,美国)检测两组孕妇血清中Corin蛋白的含量。运用Pearson检验分析Corin蛋白水平与子痫前期严重程度的关系,运用Student T检验比较不同组间Corin蛋白表达水平的差异。结果 PE组孕妇血清中Corin蛋白表达水平(682. 8±536. 4) pg/ml显著高于对照组孕妇的表达水平(438. 8±405. 4) pg/ml,差异有统计学意义(P<0. 05)。在PE组孕妇和对照组孕妇中,血清Corin蛋白表达水平与采血时间、出生体质量、舒张压和收缩压无显著线性关系(P>0. 05)。结论中孕期孕妇血清Corin蛋白表达水平是发生子痫前期的标志物。

2010年-2012年苏州地区新生儿先天性肾上腺皮质增生症筛查结果分析

目的使先天性肾上腺皮质增生症患儿在新生儿期得到有效治疗,了解苏州地区先天性肾上腺皮质增生症的发病率。方法采用时间分辨荧光免疫分析法检测新生儿滤纸干血片上的足跟血17α-羟孕酮(17α-OHP)浓度,17α-OHP浓度大于等于切值,则重采血复查,复查值仍大于等于切值,则为疑似病例。疑似病例再测静脉血电解质、促肾上腺皮质激素、睾酮、孕酮、雌二醇进行确诊。结果 2010年9月至2012年11月共筛查南京医科大学附属苏州医院、太仓市、吴江市和昆山市新生儿96 423例,确诊先天性肾上腺皮质增生患儿5例,其中3例得到有效治疗。CAH患儿的17α-OHP水平明显高于正常新生儿的17α-OHP水平。春季和冬季新生儿17α-OHP平均水平明显高于夏季和秋季。春季、夏季、秋季和冬季新生儿17α-OHP水平的95%分位值和99%的分位值分别为(21.75,32.33),(13.31,22.50),(15.18,24.43)和(22.42,33.93)。结论 DELFIA检测17α-OHP水平能够及时筛查出失盐型和单纯男性化型患儿。苏州市新生儿CAH的发病率为1/19285。CAH筛查切值在夏季和秋季应该有所降低,而在春季和冬季应该有所提高。

苏州地区GSP^(TM)检测17α-羟孕酮的性能验证及切值建立

目的评估全自动荧光免疫分析仪GSP^(TM)检测17α-羟孕酮(17α-OHP)的分析性能,并初步建立应用于先天性肾上腺皮质增生症(CAH)筛查的17α-OHP切值。方法通过检测试剂盒自带标准品B/D/E三个浓度、试剂盒自带高、低水平质控品,和试剂盒自带的A-E六个浓度的标准品,分析GSP^(TM)系统的精密度、正确度和线性范围。检测临床新生儿血片样本3063例,以99.5%百分位数的17α-OHP水平暂定为初始切值。结果 GSP^(TM)筛查系统检测B/D/E中17α-OHP批内变异系数为3.98%~5.97%,均小于厂家声明的8.7%;批间变异系数为4.32%~8.52%,均小于厂家声明的9.2%。GSP^(TM)系统检测的低、高质控品浓度平均值分别为20.65 nmol/L和140.67 nmol/L,都在试剂盒声明的允许范围之内。线性标本的检测值和理论值的线性方程为y=1.1196x-1.7049,相关系数的平方(R2)为0.9998。GSP^(TM)系统TSH测定浓度值与1235系统的测定值之间呈现显著的正相关,Spearman r=0.615,P<0.001。GSP^(TM)筛查系统检测结果99.5百分位数的17α-OHP水平为15.50nmol/L。结论GSP^(TM)系统对17α-OHP的定量性能符合厂家声明的要求,应用于新生儿CAH筛查是可行的。本中心初步采用的GSP^(TM)筛查新生儿CAH的17α-OHP切值为15.50nmol/L。

叶酸代谢相关酶基因多态性与先天性心脏病

先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）指胎儿在宫内发生心脏或大血管结构异常，所造成的心血管畸形^[1]，是先天畸形中最常见的一种。CHD根据血流动力学变化可分为三类：（1）无分流型（无青紫型）：即心脏左右两侧或动静脉之间无异常通路和分流，不产生紫绀，包括主动脉缩窄、肺动脉瓣狭窄及主动脉瓣狭窄等。

新生儿胎龄、出生体重与17α羟孕酮水平的多中心回顾性分析

目的 探讨新生儿出生胎龄、出生体重与17α羟孕酮水平的相关性,及其对先天性肾上腺皮质增生症筛查结果的影响.方法 研究对象为2010年8月至2013年11月江苏省吴江市、太仓市、张家港市、昆山市及苏州市区29家医院分娩的新生儿,有出生胎龄和出生体重记录的共118 050例,其中男62 490例、女55 560例;早产儿4 693例,足月新生儿113 300例,过期产儿57例;体重＜2500 g者4 172例,体重≥2 500 g新生儿113 878例.早产儿中早期早产儿（胎龄＜32周）189例,中期早产儿（胎龄≥32周且＜36周）2 277例,晚期早产儿（胎龄≥36周且＜37周）2 227例.滤纸干血片采用时间分辨荧光免疫分析法检测新生儿的足跟血17α羟孕酮浓度,回顾性分析新生儿胎龄、出生体重与17α羟孕酮水平的相关性,组间比较用非参数相关样本Wilcoxon检验,相关性分析采用Spearman检验.结果 经正态性检验,17α羟孕酮水平呈偏态分布,早期早产儿、中期早产儿、晚期早产儿、足月儿和过期产儿17α羟孕酮水平M（Q1,Q3）、第99百分位数依次降低,各组之间差异均有统计学意义[19.21（8.07,24.00）,12.35（6.81,18.00）,8.58（5.66,13.80）,5.60（3.57,8.51）,3.34（2.58,5.23）nmol/L;479.42,62.25,36.24,23.30,13.73 nmol/L;P均=0.000].超低出生体重儿、极低出生体重儿、低出生体重儿、正常出生体重儿、巨大儿17 α羟孕酮水平的M（Q1,Q3）、第99百分位数依次降低,各组之间差异均有统计学意义[5.24（3.24,8.96）,11.30（6.84,22.95）,8.50（5.28,14.90）,5.66（3.61,8.62）,5.38（3.40,8.11） nmol/L; 485.26,125.18,39.50,23.80,22.15 nmol/L;P均=0.000].新生儿17α羟孕酮水平与出生胎龄、体重均成负相关（r=-16.40、-10.10,P均=0.000）;并呈二项式分布,公式分别为y=0.105 5x2-2.457 6x＋ 17.689,R2=0.980 3和y =0.411x2-3.988x＋ 14.75,R2 =0.983.早产儿和足月儿中＜2 500 g者17α羟孕酮水平均显著高于体重≥2 500 g新生儿[11.20（6.01,18.90）比9.05（5.85,14.90） nmol/L,9.76 （4.32,10.35）比5.59（3.56,8.48） nmol/L,均P=0.000].结论 新生儿17α羟孕酮水平与胎龄、出生体重成明显负相关;为提高肾上腺皮质增生症筛查的准确度和灵敏度、降低复查率,新生儿17α羟孕酮的切值应根据胎龄、出生体重进行调整.

HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA和TCT检测在宫颈上皮内瘤变筛查中的应用

目的分析人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E 6/E 7 mRNA、第二代杂交捕获技术(hybrid Capture,HCⅡ)和薄层液基细胞学技术(thinprep cytology test,TCT)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)筛查中的效能,选择适宜的分流筛查方案。方法采用病例-对照研究设计,80例CINⅠ^+的病例样本为HCⅡ或TCT筛查阳性并经组织学诊断;132例正常或炎症标本包括:组织学诊断正常或炎症的标本;HCⅡ阴性,TCT阴性且HPV E 6/E 7 mRNA均为阴性的标本。检测方法分别为:TCT进行细胞学检测、用b-DNA技术检测其HPV E 6/E 7 mRNA和用HCⅡ检测HPV DNA。结果在212例正常或宫颈炎和CIN标本中,HCⅡ的阳性率(37.74%)显著高于HPV E 6/E 7 mRNA的阳性率(25.94%)(P<0.05);与TCT的阳性率(31.60%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。TCT的检出率高于HPV E 6/E 7mRNA的检出率,但差异无统计学意义(P>0.05)。HPV E 6/E 7 mRNA与HCⅡ的符合率最高,Kappa为0.733,P=0.000;其次为HC II和TCT的符合率,Kappa为0.564,P=0.000;HPV E 6/E 7 mRNA与TCT的符合率,Kappa仅为0.519,P=0.000。并且,在HCⅡ检测结果阳性的67例CINⅠ^+样本中,HPV E 6/E 7 mRNA检测或TCT检测结果皆为阳性。而在HCⅡ阳性的13例正常或炎症样本中,HPVE 6/E 7 mRNA+或TCT结果阳性仅有7例(53.85%)。结论在CINⅠ^+分流筛查方案中,HPV E 6/E 7 mRNA和TCT共同作为HCⅡ阳性分流筛查的方法,可有效降低HCⅡ的假阳性。