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丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在健康人和系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的差异表达 被引量:3
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作者 王林纤 戴勇 +3 位作者 彭武建 孙保东 齐素文 涂植光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期148-151,共4页
目的分析丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平,探讨该蛋白检测在系统性红斑狼疮病情判断中的可能应用。方法实验分为3组:SLE稳定组、SLE活动组和健康对... 目的分析丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平,探讨该蛋白检测在系统性红斑狼疮病情判断中的可能应用。方法实验分为3组:SLE稳定组、SLE活动组和健康对照组,每组6例,分别收集其外周血单个核细胞,用相对和绝对定量的等量异位标签串联质谱技术对丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白进行鉴定和相对定量分析,用Western blot技术对该蛋白的表达水平进行较大样本的独立验证。结果基于质谱分析的蛋白组学结果表明,丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白在系统性红斑狼疮活动期患者外周血单个核细胞中表达显著下调(与正常人的相对比值为0.2906),且该蛋白的低表达为Western blot实验进一步证实。临床资料分析表明,该蛋白的表达水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数呈负相关(r=-0.607,P<0.05)。结论丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白可能参与SLE的发病,该蛋白有望作为系统性红斑狼疮的活动阶段特异性标志物。 展开更多
关键词 丝氨酸-苏氨酸激酶受体相关蛋白 系统性红斑狼疮 外周血单个核细胞 表达
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日本血吸虫雌虫抗原模拟表位的筛选及免疫保护性 被引量:4
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作者 王林纤 蔡春 +3 位作者 易新元 曾宪芳 唐连飞 罗永慧 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2004年第2期110-113,共4页
目的 筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。 方法 用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4... 目的 筛选日本血吸虫雌虫抗原的模拟表位 ,并探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。 方法 用日本血吸虫雌虫免疫兔血清IgG作配体对噬菌体随机 12肽库进行 3轮亲和筛选 ,随机挑取 18个噬菌体克隆用Dot ELISA检测其特异性 ,并对其中的 4个阳性克隆进行测序。分别在 0、2、4周用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,第 6周每鼠经腹部感染 40条日本血吸虫尾蚴 ,42d后剖杀冲虫 ,计数虫数和每克肝卵数。 结果 经 3轮筛选 ,特异性噬菌体富集了 2 0 0多倍 ,随机挑取的 18个克隆经Dot ELISA鉴定有 17个能与雌虫抗原免疫兔血清呈阳性反应。DNA自动测序的 4个序列与GenBank的已知序列均无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 2 6.5 7% ,减卵率为 65 .3 4%。 结论 采用噬菌体随机肽库技术可获得模拟日本血吸虫雌虫特异性抗原表位的短肽分子 ,这些短肽分子能诱导一定程度的保护性免疫。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 模拟短肽 噬菌体随机肽库 免疫筛选
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血吸虫DNA疫苗联合免疫研究进展 被引量:3
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作者 王林纤 易新元 蔡春 《中国热带医学》 CAS 2004年第2期287-289,共3页
本文从多个单价DNA疫苗的联合、单价DNA疫苗与细胞因子的联合、多价DNA疫苗的联合以及DNA疫苗与蛋白疫苗的联合 4个方面 ,对血吸虫病DNA疫苗联合免疫研究进行了综述。
关键词 DNA疫苗 联合免疫 细胞因子 蛋白疫苗 血吸虫病
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日本血吸虫Sj-Ts1基因的亚克隆表达与免疫保护效果测定 被引量:1
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作者 王林纤 陈欲晓 +7 位作者 周东明 蔡春 陈利玉 唐连飞 罗永慧 张顺科 曾宪芳 易新元 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第7期592-595,共4页
在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)Sj -Ts1融合蛋白并测定其免疫保护效果。将Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX - 5X - 3原核载体 ,转化入大肠杆菌ER2 5 6 6 ,并用IPTG对该重组菌进行诱导表达中。将此表达产物进行West... 在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)Sj -Ts1融合蛋白并测定其免疫保护效果。将Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX - 5X - 3原核载体 ,转化入大肠杆菌ER2 5 6 6 ,并用IPTG对该重组菌进行诱导表达中。将此表达产物进行WesternBlot分析后免疫小鼠 ,免疫剂量为 10 0 μg/次 /鼠。并设蛋白佐剂对照和PBS对照。免疫三次后进行攻击感染 ,计数虫负荷及肝卵负荷。在IPTG诱导下 ,亚克隆至 pGEX - 5X - 3的Sj-Ts1基因在大肠杆菌内高效表达融合蛋白SjGST -Ts1,用此融合蛋白免疫小鼠 ,能诱导产生 2 4 16 %的减虫率和 4 8 74 %的减卵率。Sj-Ts1基因亚克隆至 pGEX -5X - 3载体后可在大肠杆菌中高效表达 ,表达产物可诱导小鼠产生一定程度的抗Sj保护性免疫力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 Sj-Ts1基因 亚克隆 表达 免疫保护效果 测定
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人肺鳞癌来源肺癌干细胞原代培养:数量及功能变化 被引量:3
5
作者 刘哲亮 邬娇 +3 位作者 王林纤 陈跃军 吴冠宇 肖高明 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第32期5172-5176,共5页
背景:研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞,但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。目的:探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法,及其在原代培养过程中的数量和功能变化。方法:借助胶原酶消化... 背景:研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞,但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。目的:探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法,及其在原代培养过程中的数量和功能变化。方法:借助胶原酶消化法、密度梯度离心法和Hoechst33342染料外排法初筛SP细胞,将初筛细胞置于条件培养基分离培养,后续应用流式细胞分析及分选技术,进一步分离纯化肺鳞癌干细胞。实验结合CD133和CD44鉴定目标细胞,计数第1代和第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细胞数;检测第1代和第4代肺癌干细胞的单细胞克隆形成能力、平板集落形成能力和细胞球形成能力。结果与结论:传代培养第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细胞数明显增多,流式细胞检测结果显示,第4代和第1代的CD133+和CD133/CD44双阳性细胞表达率差异有显著性意义,第4代和第1代肺癌干细胞的CD44+细胞表达率差异无显著性意义。第4代细胞的单细胞克隆形成能力,平板集落形成能力和细胞球形成能力比均明显强于第1代肺癌干细胞。实验初步从肺鳞癌患者新鲜肺组织标本中分离培养并获取干细胞样肺鳞癌细胞,且在体外稳定快速扩增,为进一步研究肺鳞癌干细胞的异质性和耐药性奠定基础。 展开更多
关键词 干细胞 肿瘤干细胞 肺癌干细胞 原代培养 细胞鉴定 湖南省自然科学基金
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日本血吸虫Sj31核酸疫苗联合IFN-γ重组质粒诱导小鼠保护性免疫的研究 被引量:3
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作者 陈欲晓 易新元 +4 位作者 曾宪芳 唐连飞 王林纤 蔡春 袁仕善 《中国热带医学》 CAS 2004年第3期307-309,共3页
目的 探讨干扰素 γ重组质粒对日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗在小鼠抗血吸虫作用的影响。 方法 将小鼠干扰素 γ基因PCR扩增片段克隆入真核表达载体pCDNA3 1以构建重组真核表达质粒pCDNA3 1 IFN γ ,并与日本血吸虫组织蛋白酶B... 目的 探讨干扰素 γ重组质粒对日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗在小鼠抗血吸虫作用的影响。 方法 将小鼠干扰素 γ基因PCR扩增片段克隆入真核表达载体pCDNA3 1以构建重组真核表达质粒pCDNA3 1 IFN γ ,并与日本血吸虫组织蛋白酶B真核表达质粒VR10 12 Sj3 1一同免疫小鼠。小鼠分为 4组 ,其中实验组每鼠同时肌注VR10 12 Sj3 1及pCDNA3 1 IFN γ各 10 0 μg ,3个对照组分别为VR10 12 Sj3 1肌注 10 0 μg ,pCDNA3 1 IFN γ肌注 10 0 μg和载体VR10 12及pCHAN3 1肌注各 10 0 μg。共免疫 3次 ,每次间隔 2周。于末次免疫后两周免疫组化检测表达质粒在小鼠肌细胞的表达 ,于末次免疫后 3周经小鼠皮肤攻击感染 40± 1条日本血吸虫尾蚴。 45d后杀小鼠计算减虫率。 结果 VR10 12 Sj3 1及pCDNA3 1 IFN γ均在小鼠肌细胞表达 ,日本血吸虫Sj3 1核酸疫苗联合IFN γ重组质粒免疫可诱导小鼠产生 2 7 3 7%的减虫率 ,与日本血吸虫Sj3 1核酸疫苗单独免疫组比较减虫率显著 (P <0 0 5 )。 结论 IFN 展开更多
关键词 日本血吸虫 Sj31 核酸疫苗 IFN-Γ 重组质粒 小鼠 保护性免疫 组织蛋白酶B 干扰素-γ
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鞘内泵入吗啡和倍他米松治疗CIBP的机制研究 被引量:4
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作者 张先红 黄东 +7 位作者 杨金凤 杨弘彪 唐轶徇 刘景诗 黄玉梅 陈师 王林纤 彭海燕 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2015年第10期755-758,763,共5页
目的:研究鞘内连续注射吗啡联合倍他米松治疗癌性骨痛(cancer-induced bone pain CIBP)的机制。方法:癌性骨痛患者126例,随机分为2组:吗啡组Morphine(M组),鞘内泵入单纯吗啡;吗啡联合倍他米松组Betarmethasone(B组),鞘内泵入吗啡和倍他... 目的:研究鞘内连续注射吗啡联合倍他米松治疗癌性骨痛(cancer-induced bone pain CIBP)的机制。方法:癌性骨痛患者126例,随机分为2组:吗啡组Morphine(M组),鞘内泵入单纯吗啡;吗啡联合倍他米松组Betarmethasone(B组),鞘内泵入吗啡和倍他米松(1 mg/周),患者均行椎管内镇痛药物输注港皮下植入术。手术前、手术后第1、3、7天评定疼痛缓解程度、生存质量评分和SF-36量表,手术后第7天测定血浆内啡肽、血浆胃动素和脑脊液中前列腺素E2(PGE2)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)。结果:B组爆发痛的次数少于M组(P<0.05);静息卧床时两组疼痛都得到缓解NRS评分<2分,两组比较(P>0.05);B组下床活动后疼痛次数对比吗啡组明显减少(P<0.05);SF-36量表各维度比较B组生活质量有显著改善,日常生活能力得分有显著差异(P<0.05);术后第7天,血浆内啡肽水平,两组比较(P>0.05);血浆胃动素B组高于M组(P<0.05);脑脊液中PGE2、SP、CGRP浓度M组高于B组(P<0.05)。结论:鞘内泵入吗啡联合倍他米松对比鞘内泵入吗啡治疗癌性骨痛,爆发痛的次数减少,改善胃肠动力,提高了患者生存质量。脑脊液中PGE2、SP、CGRP浓度低于鞘内注射吗啡组,可减轻吗啡耐受,增强了镇痛效果。 展开更多
关键词 倍他米松 癌性骨痛 吗啡
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人肺鳞癌干细胞的体外分离培养和鉴定 被引量:1
8
作者 刘哲亮 邬娇 +3 位作者 王林纤 陈跃军 吴冠宇 肖高明 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第28期4526-4530,共5页
背景:研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞,但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。目的:探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法。方法:借助胶原酶消化法、密度梯度离心法和Hoechst33342染料外... 背景:研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞,但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。目的:探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法。方法:借助胶原酶消化法、密度梯度离心法和Hoechst33342染料外排法初筛SP细胞,将初筛细胞置于条件培养基分离培养,后续应用流式细胞分析及分选技术,进一步分离纯化肺鳞癌干细胞。实验结合CD133和CD44鉴定目标细胞,并计数第4代细胞CD133+、CD44+及CD133/CD44双阳性细胞的阳性率。结果与结论:接种后0.5 h细胞贴壁生长,培养第4天形成典型的细胞集落,第7天呈铺路石样外观,细胞数量级可达108。传代培养第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细胞数明显增多。说明实验初步从肺鳞癌患者新鲜肺组织标本中分离培养并快速扩增SP细胞,并从中获取更多更纯的干细胞样肺鳞癌细胞,为进一步研究肺鳞癌干细胞的异质性和耐药性奠定基础。 展开更多
关键词 干细胞 肿瘤干细胞 肺鳞癌 肺癌干细胞 原代培养 细胞鉴定 表型 诱导分化 流式细胞术 湖南省自然科学基金
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微阵列比较基因组杂交产前诊断8p23.1重复综合征胎儿的实验研究 被引量:1
9
作者 张艳亮 戴勇 +6 位作者 涂植光 李启运 王林纤 张丽 曾君 林秀华 刘士龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1700-1701,共2页
目的了解一完全性心内膜垫缺陷(endocardial cushion defects,ECD)和右手轴前六指畸形患儿的基因组拷贝数变化(copy number variations,CNVs),探讨微阵列比较基因组杂交(array—based comparative genomic hybridization,array... 目的了解一完全性心内膜垫缺陷(endocardial cushion defects,ECD)和右手轴前六指畸形患儿的基因组拷贝数变化(copy number variations,CNVs),探讨微阵列比较基因组杂交(array—based comparative genomic hybridization,array—CGH)在分子细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性。方法对胎儿及其父母进行常规G显带核型分析,运用array-CGH芯片对患儿进行全基因组高分辨率扫描和分析,实时定量PCR对array—CGH结果进行验证。结果常规G显带核型分析显示胎儿和父母的核型均正常。array—CGH结果显示8p23.1嗅觉受体/防卫素重复(ORDRs)之间存在大约1.43Mb的重复(位于10245882~11676699bp)。实时定量PCR证明array—CGH的结果是准确的。结论与传统的细胞遗传分析方法相比,array—CGH具有高分辨率、高特异性和高准确性等优点。 展开更多
关键词 微阵列比较基因组杂交 8p23.1重复 拷贝数变化 产前诊断
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日本血吸虫组织蛋白酶B DNA疫苗与IL-4真核表达质粒联合免疫诱导小鼠保护性的研究(英文) 被引量:1
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作者 陈欲晓 易新元 +5 位作者 曾宪芳 王林纤 唐连飞 张顺科 章洁 MCREYNOLDS Larry 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2004年第1期34-37,共4页
目的 观察日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗与IL 4真核表达质粒联合免疫小鼠的效果。 方法 将小鼠IL 4基因PCR扩增片段克隆入真核表达载体pcDNA3以构建重组表达质粒。小鼠分为 4组 ,每组 12只 ,实验组 (A)每鼠肌注组织蛋白酶BDNA疫苗和I... 目的 观察日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗与IL 4真核表达质粒联合免疫小鼠的效果。 方法 将小鼠IL 4基因PCR扩增片段克隆入真核表达载体pcDNA3以构建重组表达质粒。小鼠分为 4组 ,每组 12只 ,实验组 (A)每鼠肌注组织蛋白酶BDNA疫苗和IL 4表达质粒各 10 0 μg ,同时设立组织蛋白酶BDNA疫苗对照组 (B)、IL 4表达质粒对照组 (C)和空载体对照组 (D) ,共免疫 3次。 2周后用免疫组化检测表达质粒在小鼠肌细胞的表达 ,3周后经皮肤攻击感染小鼠 40± 1条日本血吸虫尾蚴。计算减虫和减卵率 ,观察免疫保护性。 结果 重组IL 4质粒和组织蛋白酶BDNA疫苗均在小鼠肌细胞表达。用重组IL 4质粒和组织蛋白酶BDNA疫苗联合免疫诱导小鼠产生 43 .2 0 %的减虫率和 76.63 %的减卵率 ,与组织蛋白酶BDNA疫苗单独免疫比较差异均有显著性 (P <0 .0 0 1,P <0 .0 5 )。 结论 联合IL 4表达质粒免疫可能提高日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗的抗血吸虫保护性免疫。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 DNA疫苗 组织蛋白酶B IL-4
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微阵列比较基因组杂交检测复杂染色体重排胎儿隐藏的基因组拷贝数变化
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作者 张艳亮 戴勇 +6 位作者 涂植光 李启运 张丽 王林纤 曾君 林秀华 欧阳志斌 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第22期2639-2642,共4页
目的:检测复杂染色体重排断裂点区域是否隐藏有亚显微拷贝数变化,确定重排的复杂性,探讨微阵列比较基因组杂交在分子细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性.方法:应用微阵列比较基因组杂交芯片对一被传统G显带和多色荧光原位杂交诊断为平... 目的:检测复杂染色体重排断裂点区域是否隐藏有亚显微拷贝数变化,确定重排的复杂性,探讨微阵列比较基因组杂交在分子细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性.方法:应用微阵列比较基因组杂交芯片对一被传统G显带和多色荧光原位杂交诊断为平衡复杂染色体重排(46,XX.t(4;5;15)(4pter→4q23::15q23→15qter;4qter→4q23::5p15→5qter;15pter→15q23::)dn)的胎儿进行全基因组高分辨率扫描和分析.结果:微阵列比较基因组杂交显示胎儿存在3个亚显微拷贝数变化:dup(5)(q13.2)(69274233-70622915,~1.35Mb),del(15)(q11.2)(18657188-20080135,~1.42Mb)和del(18)(p11.31-p11.23)(7069849-7567290,~0.49Mb),均定位于重排断裂点(4q23,5p15和15p23)以外的区域,与断裂点不相关.结论:被传统细胞遗传分析技术诊断为平衡染色体重排的病例会隐藏有亚显微拷贝数变化,且这些拷贝数变化并非一定定位于重排断裂点区域;对于检测和定位亚显微拷贝数变化,微阵列比较基因组杂交是一个非常强大和有效的工具. 展开更多
关键词 微阵列比较基因组杂交 复杂染色体重排 拷贝数变化 细胞遗传诊断 基因组
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应用代谢组学方法构建系统性红斑狼疮诊断模型 被引量:6
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作者 欧阳昕 文锦丽 +3 位作者 彭武建 王林纤 王红蕾 戴勇 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期2878-2881,2885,共5页
目的应用代谢组学的方法,分析系统性红斑狼疮(SLE)患者血清的代谢物特征并构建疾病血清代谢物诊断模型。方法应用600MHzNMR检测64例SLE患者和35例健康志愿者血清样本中代谢物的差异,采集代谢物指纹图谱。并结合模式识别分析方法构建SLE... 目的应用代谢组学的方法,分析系统性红斑狼疮(SLE)患者血清的代谢物特征并构建疾病血清代谢物诊断模型。方法应用600MHzNMR检测64例SLE患者和35例健康志愿者血清样本中代谢物的差异,采集代谢物指纹图谱。并结合模式识别分析方法构建SLE诊断模型。结果 SLE主要影响脂类、氨基酸及能量代谢。PCA及PLS-DA均可以显著区分SLE与健康对照组,PLS-DA模型的预测率Q2=0.393。且O-PLS-DA模型对诊断具有很高的特异性(97.1%)及敏感性(60.9%)。结论代谢组学技术结合模式识别分析方法有望成为临床诊断SLE及病情监测的新方法。 展开更多
关键词 代谢组学 系统性红斑狼疮 模式识别分析法 诊断模型
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联合检测HE4、CA125和CYFRA21-1在卵巢癌诊断中的应用 被引量:35
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作者 田峰 易梦璐 +1 位作者 齐素文 王林纤 《检验医学》 CAS 2014年第7期697-700,共4页
目的探讨血清人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)联合检测对卵巢癌诊断的临床价值。方法选择卵巢癌患者85例、卵巢良性肿瘤患者85例和健康妇女(正常对照组)85名,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HE... 目的探讨血清人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)联合检测对卵巢癌诊断的临床价值。方法选择卵巢癌患者85例、卵巢良性肿瘤患者85例和健康妇女(正常对照组)85名,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HE4水平,采用化学发光法检测血清CA125、CYFRA21-l水平,比较各组3项指标的检测结果并计算阳性率及联合检测的阳性率。结果卵巢癌组血清HE4、CA125和CYFRA21-1水平明显高于卵巢良性肿瘤组和正常对照组(P<0.01)。卵巢癌组HE4、CA125和CYFRA21-1的阳性率分别为88.24%、74.12%和77.65%,三者联合检测的阳性率为98.82%。结论 HE4、CA125和CYFRA21-1联合检测对卵巢癌具有良好的辅助诊断价值。 展开更多
关键词 人附睾蛋白4 糖类抗原125 细胞角蛋白19片段 卵巢癌
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鼻咽癌患者血清中VEGF-C和CYFR21-1的表达及其与淋巴转移的关系 被引量:4
14
作者 田峰 文道林 +1 位作者 齐素文 王林纤 《海南医学》 CAS 2011年第1期11-12,6,共3页
目的探讨鼻咽癌(NPC)患者外周血血清中血管内皮生长因子(VEGF-C)和细胞白蛋白19片段(CYFR21-1)表达水平和意义。方法运用酶联免疫吸附测定法定量检测35例鼻咽癌患者、30例鼻咽部良性疾病患者和30例健康人血清中VEGF-C含量;运用化学发光... 目的探讨鼻咽癌(NPC)患者外周血血清中血管内皮生长因子(VEGF-C)和细胞白蛋白19片段(CYFR21-1)表达水平和意义。方法运用酶联免疫吸附测定法定量检测35例鼻咽癌患者、30例鼻咽部良性疾病患者和30例健康人血清中VEGF-C含量;运用化学发光免疫分析法检测上述病例的CYFR21-1水平。结果鼻咽癌患者血清中VEGF-C和CYFR21-1表达水平与良性疾病对照组、健康对照组比较,差异有统计学意义[VEGF-C:(426.45±240.59)ng/Lvs(141.54±109.12)ng/L,(114.45±35.45)ng/L];CYFR21-1:(12.80±0.86)ng/mlvs(3.48±0.48)ng/ml,(3.12±0.80)ng/ml,P均<0.05)。VEGF-C和CYFR21-1在各类鼻咽癌中表达水平分别为:鳞癌为(512.02±151.45)ng/L和(12.80±0.87)ng/mL,腺癌为(402.87±240.16)ng/L和(10.80±0.86)ng/mL,未分化癌为(432.32±340.57)ng/L和(9.80±0.86)ng/mL]。VEGF-C和CYFR21-1的表达在淋巴结转移组均高于无转移组(P<0.05),且二者表达成正相关(r=0.756)。结论 VEGF-C和CYFR21-1在鼻咽癌患者血清中表达水平增高,且与鼻咽癌淋巴结转移相关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 VEGF-C CYFR21-1
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鼻咽癌组织中VEGF-C和VEGF-D的表达与淋巴转移的关系 被引量:4
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作者 田峰 文道林 +1 位作者 齐素文 王林纤 《吉林医学》 CAS 2011年第2期221-224,共4页
目的:检测血管内皮生长因子VEGF-C和VEGF-D在鼻咽癌中的表达与淋巴转移之间的关系。方法:免疫组化法检测VEGF-C和VEGF-D在35例鼻咽癌组织标本及20例正常对照组织中的表达,计数微淋巴管密度(MLD),分析VEGF-C和VEGF-D表达及MLD与临床病理... 目的:检测血管内皮生长因子VEGF-C和VEGF-D在鼻咽癌中的表达与淋巴转移之间的关系。方法:免疫组化法检测VEGF-C和VEGF-D在35例鼻咽癌组织标本及20例正常对照组织中的表达,计数微淋巴管密度(MLD),分析VEGF-C和VEGF-D表达及MLD与临床病理特征之间和淋巴转移的关系。结果:肿瘤组织中VEGF-C和VEGF-D的表达率分别是77%(27/35)和82%(29/35),肿瘤组织MLD(5.387±4.986)明显高于正常对照组织(1.901±1.455)(P<0.05)。VEGF-C和VEGF-D的表达成正相关关系(r=0.786)。结论:VEGF-C和VEGF-D在鼻咽癌中可能通过增加肿瘤周边区域的淋巴管新生,促进肿瘤经淋巴道转移。 展开更多
关键词 鼻咽癌 VEGF-C VEGF-D
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核酸疫苗VR1012/Sj31粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的研究
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作者 黄复深 易新元 +4 位作者 曾宪芳 唐连飞 张顺科 王林纤 Larry McReynolds 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2004年第3期140-142,共3页
目的 探讨日本血吸虫核酸疫苗VR10 12 /Sj3 1粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的保护力。 方法 将实验小鼠随机分为 5组 ,每组 12只。A组为单磷脂 (MPL)组 ,B组为VR10 12组 ,C组VR10 12 +MPL组 ,D组为VR10 12 /Sj3 1组 ,E组为VR10 12 /Sj ... 目的 探讨日本血吸虫核酸疫苗VR10 12 /Sj3 1粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的保护力。 方法 将实验小鼠随机分为 5组 ,每组 12只。A组为单磷脂 (MPL)组 ,B组为VR10 12组 ,C组VR10 12 +MPL组 ,D组为VR10 12 /Sj3 1组 ,E组为VR10 12 /Sj 3 1+MPL组。滴鼻免疫。在第 3次免疫后 2周 ,每只鼠经腹部感染 40± 1条尾蚴 ,45d后宰杀 ,观察减虫率和减卵率。在初次免疫前和攻击感染前尾静脉采血并收集粪便 ,ELISA检测血清内特异性IgA、IgG及粪内sIgA水平。  结果 与对照组相比 ,VR10 12 /Sj 3 1及VR10 12 /Sj 3 1加MPL滴鼻免疫均可引起小鼠血清IgG、IgA和粪内sIgA升高 ,且VR10 12 /Sj 3 1加佐剂滴鼻免疫组抗体的增幅 >不加佐剂组。VR10 12 /Sj3 1和VR10 12 /Sj3 1加MPL滴鼻免疫诱导小鼠产生的减虫率分别为 2 1.70 %和 2 8.82 % ,减卵率分别为 2 7.98%和 40 .72 %。二者的减虫率差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但减卵率后者显著高于前者 (P <0 .0 5 )。 结论 VR10 12 /Sj3 1滴鼻免疫可引起小鼠产生全身和粘膜免疫应答及部分抗攻击感染的免疫保护力。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 核酸疫苗 VR1012/Sj31 小鼠 粘膜免疫
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微阵列比较基因组杂交检测和分析一例46,X0,+der(?)胎儿的全基因组拷贝数变化
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作者 张艳亮 戴勇 +4 位作者 涂植光 李启运 任景慧 张丽 王林纤 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第2期144-150,共7页
目的检测和分析一例46,X0,+der(?)胎儿的全基因组拷贝数变化(CNVs),确定胎儿的核型,探讨微阵列比较基因组杂交(array-CGH)在临床细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性。方法对胎儿进行常规G显带染色体分析,应用array-CGH芯片进行全基因... 目的检测和分析一例46,X0,+der(?)胎儿的全基因组拷贝数变化(CNVs),确定胎儿的核型,探讨微阵列比较基因组杂交(array-CGH)在临床细胞遗传诊断中运用的可行性和优越性。方法对胎儿进行常规G显带染色体分析,应用array-CGH芯片进行全基因组高分辨率扫描和分析,RT-qPCR验证array-CGH的结果。结果G显带染色体分析显示胎儿的核型为46,X0,+der(?)。Array-CGH显示衍生染色体为Y染色体,且不存在CNVs;另外,共检测出了118个亚显微CNVs。RT-qPCR证明array-CGH的结果是准确的。结论与传统的细胞遗传分析方法相比,array-CGH具有高分辨率、高通量和高准确性等优点,为亚显微水平染色体畸变的检测提供了一种新型的强大的分析平台。 展开更多
关键词 微阵列比较基因组杂交 G显带染色体分析 拷贝数变化 细胞遗传分析
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重组白细胞介素-4增强日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗诱导小鼠的保护力 被引量:4
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作者 陈欲晓 王林纤 +4 位作者 唐连飞 张顺科 章洁 曾宪芳 易新元 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期65-68,共4页
目的探讨重组白细胞介素-4(IL-4)真核表达质粒增强日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗对小鼠的免疫保护效果。方法将小鼠IL-4基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1以构建小鼠重组IL-4表达质粒,并联合日本血吸虫组织蛋白酶B的表达质粒DNA(VR1012-Sj... 目的探讨重组白细胞介素-4(IL-4)真核表达质粒增强日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗对小鼠的免疫保护效果。方法将小鼠IL-4基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1以构建小鼠重组IL-4表达质粒,并联合日本血吸虫组织蛋白酶B的表达质粒DNA(VR1012-Sj31)肌注免疫小鼠,设重组IL-4表达质粒、组织蛋白酶B表达质粒和2种空载体质粒对照组。免疫组化检测IL-4和组织蛋白酶B在小鼠肌细胞内的表达,末次免疫3周后攻击感染,用减虫率及减卵率表示保护力。结果重组IL-4和组织蛋白酶BDNA均在小鼠肌细胞表达,重组IL-4和组织蛋白酶BDNA联合免疫小鼠,产生43.2%的减虫率和76.6%的减卵率,与组织蛋白酶BDNA单独免疫相比差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论重组IL-4能提高日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗的抗血吸虫保护力作用,具有佐剂的免疫效应。 展开更多
关键词 组织蛋白酶B 日本血吸虫 保护力 重组 真核表达载体PCDNA3.1 白细胞介素-4(IL-4) 疫苗诱导 免疫保护效果 BDNA疫苗 真核表达质粒 免疫组化检测 免疫小鼠 基因克隆 载体质粒 肌细胞内 攻击感染 细胞表达 单独免疫 免疫效应
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定量蛋白质组学技术构建系统性红斑狼疮疾病的蛋白质组差异表达图谱
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作者 王林纤 戴勇 +3 位作者 文锦丽 涂植光 张丽 齐素文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期153-160,共8页
目的:应用定量蛋白质组学技术对系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血单个核细胞中的"全组"蛋白进行鉴定和定量分析,获得SLE的蛋白质组差异表达图谱。方法:利用基于四重相对和绝对定量的等量异位标签结合多维液相色谱-串联质谱分析... 目的:应用定量蛋白质组学技术对系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血单个核细胞中的"全组"蛋白进行鉴定和定量分析,获得SLE的蛋白质组差异表达图谱。方法:利用基于四重相对和绝对定量的等量异位标签结合多维液相色谱-串联质谱分析SLE稳定期和活动期病人以及类风湿关节炎病人和健康人的外周血单个核细胞总蛋白,用肽质量指纹谱经数据库检索鉴定蛋白质,并比较这些蛋白的表达差异。结果:共鉴定了400多个蛋白质。其中,与健康对照组相比,SLE稳定组和SLE活动组共发现2倍以上表达差异的蛋白质44个,上调的9个,下调的35个;与类风湿关节炎疾病组相比,SLE稳定组和SLE活动组2倍以上表达差异的蛋白共有52个,上调的19个,下调的33个;SLE活动组与SLE稳定组相比,表达上调和下调的蛋白分别为17个和13个。结论:定量蛋白质组学技术可有效地用于人外周血单个核细胞蛋白鉴定和相对定量;采用该技术获得了SLE病人外周血单个核细胞的蛋白质组差异表达图谱;深入研究这些蛋白的分子机制将有助于进一步阐明SLE的发病机制,为SLE的诊断和治疗提供新途径。 展开更多
关键词 定量蛋白质组学 红斑狼疮 系统性 单个核细胞
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URG11基因介导Wnt/β-catenin信号通路调控EMT参与非小细胞肺癌转移的分子机制研究 被引量:1
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作者 刘哲亮 彭豪 +6 位作者 邬娇 李旭 吴冠宇 陈跃军 王林纤 郭慧 李跃进 《中国现代手术学杂志》 2021年第4期239-245,共7页
目的探讨URG11基因介导的Wnt/β-Catenin信号通路调控EMT参与非小细胞肺癌转移的分子机制。方法非小细胞肺癌细胞系A549经shRNA质粒转染48h,敲除URG11后收集细胞行后续实验。实验共分两组,分别为敲除URG11的A549细胞组(实验组)和未敲除U... 目的探讨URG11基因介导的Wnt/β-Catenin信号通路调控EMT参与非小细胞肺癌转移的分子机制。方法非小细胞肺癌细胞系A549经shRNA质粒转染48h,敲除URG11后收集细胞行后续实验。实验共分两组,分别为敲除URG11的A549细胞组(实验组)和未敲除URG11的A549细胞组(空白对照组)。采用Western blott测定β-Catenin及其下游基因cyclinD1、c-myc的蛋白表达,同时用RT-qPCR检测β-Catenin、cyclinD1和c-myc的mRNA表达。并用裸鼠成瘤模型评估URG11基因对NSCLC侵袭性生长的影响。结果①敲除URG11显著抑制Wnt/β-Catenin信号通路在NSCLC细胞中激活。Western blot蛋白质印迹分析显示β-Catenin、cyclin D1和c-myc的蛋白水平在敲除实验组中的表达显著低于对照组(DPI值分别为0.22±0.06 VS 0.77±0.21,0.61±0.09 VS 1.52±0.23,0.42±0.07 VS 0.84±0.14,P<0.05)。RT-qPCR结果显示β-Catenin、cyclinD1和c-myc的mRNA在对照组中的表达显著高于实验组(分别为3.52倍,2.58倍和2.19倍,P<0.05)。②敲除URG11显著减少异种移植肿瘤体在裸鼠体内侵袭性生长。通过裸鼠异种移植肿瘤模型动态观察了URG11对肿瘤的体内生长作用。与对照组相比,敲除URG11能显著抑制Balb/C裸鼠体内新生肿瘤的重量,第35天实验组VS对照组(0.21±0.04)g VS(0.58±0.08)g,P<0.05,平均抑瘤率为63.79%;同时敲除URG11能显著减少异种移植肿瘤的体积:第21、28、35天的新生瘤体体积,实验组VS对照组(258.33±0.24)mm^(3)VS(512.86±0.18)mm^(3),(414.59±0.17)mm^(3)VS(685.78±0.23)mm^(3),(423.21±0.36)mm^(3)VS(986.73±0.14)mm^(3),P<0.05。结论URG11导致的EMT与NSCLC的发生和进展密切相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 URG11 WNT/Β-CATENIN信号通路 基因敲除 EMT
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