家蚕追寄蝇虾红素样精液蛋白酶EsSemp的基因克隆与特性分析

虾红素样金属蛋白酶广泛存在于各种昆虫中,参与受精繁殖、孵化及消化等生理功能。为鉴定家蚕追寄蝇生殖繁育相关基因,利用RACE技术克隆获得家蚕追寄蝇虾红素样精液蛋白酶基因全长cDNA序列,命名为EsSemp(GenBank登录号:OP777491),其全长为985 bp,ORF为771 bp,编码256个氨基酸残基。以染色体步移技术克隆获得EsSemp完整基因结构,由1个内含子和2个外显子组成。系统发生树结果显示,EsSemp与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)精液蛋白酶基因副本的产物CG15254高度同源。qRT-PCR结果显示,EsSemp在雄蝇副性腺表达较弱,在蝇蛆和成蝇的中肠和马氏管表达较强,在卵期0 h和卵后期大量表达,推测EsSemp参与了受精、孵化与消化代谢等过程。体外表达EsSemp蛋白,结果显示EDTA可抑制EsSemp酶活。以上研究结果为进一步阐明家蚕追寄蝇繁殖发育相关分子机制提供了参考,为开发家蚕蝇蛆病防治新途径提供了基础信息。

N-聚糖合成通路中内质网α-1,2甘露糖苷酶和α-甘露糖苷酶Ⅱ基因对家蚕胚胎滞育的调控作用

家蚕滞育是基因与环境协同作用的结果,其调控网络十分复杂,至今仍未完全阐明。为了解家蚕N-聚糖生物合成通路是否参与胚胎滞育调控,调查家蚕不同化性品系蛹期、胚胎发育早期以及滞育激素(DH)、蜕皮激素(20E)处理后BmN细胞中内质网α-1,2甘露糖苷酶基因(BmMAN1B)和α-甘露糖苷酶Ⅱ基因(BmMAN2)的转录水平。qRT-PCR结果显示:这2个基因在不同化性品系中的转录水平存在较大差异,蛹晚期的转录水平高于早期;分别用100 nmol/L DH和10 ng/mL 20E处理BmN细胞,BmMAN1B和BmMAN2的转录水平都极显著上调,提示2个基因与家蚕滞育密切相关。对BmN细胞和家蚕二化性品系秋丰165℃催青产非滞育卵组(QFLT)蛹期2 d雌蛹进行BmMAN1B和BmMAN2基因的RNA干扰,结果发现滞育相关基因BmDH、BmDHR-1、BmTRE2和BmSDH-2a等的转录水平发生了变化;当在个体水平进行BmMAN1B和BmMAN2基因的共同干扰时,382%的子代卵由非滞育转变为滞育。结果表明,BmMAN1B和BmMAN2在家蚕胚胎滞育中具有重要的调控作用。

生物质炭对设施大棚土壤改良和小白菜产量品质的影响

常年连作温室大棚存在土壤酸化、重金属积累等土壤问题,严重制约了农业可持续发展和农产品安全生产,亟需对存在土壤退化问题的温室大棚土壤进行治理。通过田间小区试验研究了施用玉米秸秆生物质炭对土壤的影响,以及对小白菜产量和品质的影响。结果表明,与对照相比,施用生物质炭土壤pH值提高了0.47~0.86,有机质含量提高了32.0%~65.6%,全氮含量提高了8.4%~19.3%,有效磷含量增加了38.9%~42.3%,有效态Cd含量降低了32.8%~47.7%。施用30 t·hm^(-2)生物质炭时,小白菜产量增加了18.8%,可溶性糖含量增加了27.8%。施用15和30 t·hm^(-2)生物质炭时,小白菜中硝酸盐含量分别降低了37.7%和44.7%,Cd含量分别降低了22.8%和60.5%。可见,高用量生物质炭能更有效地降低土壤有效态Cd含量和小白菜中Cd的含量。施用30 t·hm^(-2)生物质炭能更好地改良大棚土壤、提高小白菜产量和品质。

自我教育是提高大学生思想政治教育实效性的重要途径

自我教育是大学生思想政治教育的内在要求,是实现大学生思想政治教育最终目标的根本保证,是增强大学生思想政治教育实效性的必然选择,也是大学生心理发展的客观需要。思想政治教育工作者要根据思想政治教育的内在规律,通过树立典型、开展活动、参与管理等有效方法,引导大学生进行自我教育,切实提高大学生思想政治教育的实效性。

“和谐控制理论”与高校学生工作

"和谐控制理论"对高等学校教育管理特别是学生教育和管理工作具有重要的意义。其基本目标是低成本控制、高效率控制、主客体关系和谐控制、主客体目标同向控制;实现"和谐控制"的途径有:建立畅通的利益表达机制、强化"职业化、专家化"的高校辅导员队伍建设机制、发挥文化的资源作用和对人的行为调节作用、建立和谐的人际关系等。

当前高等教育体制改革的若干关键问题

在全面实现小康社会 ,进一步完善社会主义市场经济体制和科学发展高等教育的时代背景下 ,深化高等教育体制改革迫在眉睫。文章在回顾我国高等教育体制改革历程的基础上 ,对高等教育体制改革模式。

论当代大学生网络人格培养

网络人格是指人们在网络交往过程中表现出来的心理特征的总和。网络交往既有利于大学生人格独立性、平等性、个性化和开放性的形成与发展,同时又容易诱发产生大学生人格的虚伪性、变异性、封闭性和迷失性。应采取积极有效措施,构建规范的网络伦理,加强大学生"网德"教育,建立健全法规制度,强化网络的监督与管理,加强大学生心理健康教育,建立大学生健康人格教育网络系统,努力培养大学生健康的网络人格。

论和谐控制理论在高校学生工作中的应用

高校学生工作的和谐控制有六个方面的特征:教育管理方式上引导重于强制,教育管理内容上渗透重于灌输,教育管理过程上双向互动重于单向行动,管理控制方式上"自控"重于"他控",教育目标上目标同向重于目标吻合,教育目标实现上渐变重于突变。按照和谐控制的要求开展高校学生管理工作,有利于促进和谐校园建设,提高学生管理工作的水平,促进高等学校教育管理目标和学生成长成才目标的顺利实现。

人才安全问题研究

随着经济全球化进程的不断推进 ,人才安全已成为世界各国不得不面对的难题 ,只有在坚持正确的原则下采取有力措施去应对 ,才能符合经济社会发展的要求 。

和谐控制的教育管理层次探究

本文从高校学生工作"和谐控制理论"的视角,分析了高校学生教育管理五个层次的和谐,即理念和谐、目标和谐、制度和谐、心理和谐和关系和谐,这实现高校学生工作和谐控制的关键。

新时期思想政治教育的人文价值

思想政治教育最重要的人文价值就在于丰富和完善人性,促进人的全面发展。思想政治教育要通过关心人的多种需求,确立人的主体性;塑造人的独立人格,发挥人的创造性;提升人的道德境界,促进人的可持续发展来实现人的全面发展。

影响煤层气钻井完井工艺技术的几个问题

在步入煤层气商业化生产启动阶段,了解煤层气钻井完井工艺的特殊性,才能逐步完善煤层气钻井完工工艺。通过对钻井过程中煤层气钻井完井中常出现问题的分析,提出了相应的措施,对煤层气商业化生产具有重要意义。

家蚕不同化性品系间DNA甲基转移酶基因转录特性及胚胎早期甲基化水平差异分析

DNA甲基化修饰参与昆虫胚胎发育。家蚕是典型的胚胎滞育昆虫,为探明家蚕DNA甲基化在胚胎发育及滞育调控中的作用,以不同化性家蚕品系为材料,包括一化性品系安康4号(V^(1)AK4)和鲁一(V^(1)Lu1)、二化性品系秋丰(V^(2)QF)和P50(V^(2)P50)、有滞育多化性品系四海(V^(3)SH)、无滞育多化性品系Nistari(V^(3)Nistari),利用qRT-PCR技术分析家蚕甲基化酶基因BmDnmt在家蚕不同化性品系的表达水平,并利用免疫荧光法测定胚胎发育早期DNA甲基化水平。结果显示,在胚胎发育早期BmDnmt1和BmDnmt2在V^(1)AK4、V^(2)P50和V^(3)Nistari品系中表达水平较高,在V^(3)Nistari品系中BmDnmt1的表达水平显著高于V^(3)SH品系;在幼虫期,BmDnmt1和BmDnmt2在多化性家蚕卵巢或精巢组织中表达水平显著高于二化性家蚕,且它们在V^(3)Nistari中的表达水平显著高于V^(3)SH。采用免疫荧光法测定子代蚕卵的DNA甲基化水平,发现不同化性品系中DNA甲基化水平整体呈上升趋势,在产卵后96 h,多化性品系的DNA甲基化水平显著高于二化性品系。以上结果表明,BmDnmt在家蚕不同化性品系胚胎发育早期的表达水平和DNA甲基化水平均存在差异,推测家蚕幼虫期卵巢组织及胚胎发育早期的DNA甲基化水平与家蚕滞育性及化性有关联。研究结果为进一步解析DNA甲基化在家蚕胚胎发育和滞育中的调控机制提供了新的见解。

纳米丝素颗粒药物缓释剂的研制及在治疗小鼠溃疡性结肠炎中的药物控制释放作用

利用天然丝素良好的生物相容性和生物可降解性,制备纳米丝素颗粒作为药物缓释载体。通过磷酸盐缓冲液及乙醇综合处理1 mg/mL丝素蛋白溶液得到颗粒直径比较均匀的纳米级丝素颗粒。电子显微镜下观察到丝素蛋白在pH 8.0的磷酸盐缓冲液作用下其链状胶束结构发生聚集而将药物包裹,自组装形成规则的直径为200～600 nm的球形颗粒,完成与药物的结合,即药物的搭载。在pH 8.0的缓冲液中,单纯柳氮磺吡啶(SASP)药物粉末在1 h左右即将药量的90%释放出来,而加入纳米丝素蛋白的丝素载体药物2 h释放出约60%的药物量,使达到最高药物浓度的时间比单纯药物粉末延长,从而延长药物作用时间,有利于机体对药物的有效吸收利用。将丝素载体药物用于治疗人工诱导小鼠慢性溃疡性结肠炎,结果丝素载体药物治疗组小鼠6～12 h血液药物浓度和结肠组织中的药物浓度降低幅度要低于单纯SASP药物治疗组小鼠,证实了纳米丝素蛋白具有良好的载药、释药功能。

成庄矿2218掘进工作面应力状态电磁辐射监测

利用电磁辐射技术,准确测试了采掘工作面前方和巷道两帮侧的应力区分布,确定和评价了煤体瓦斯预抽的合理封孔深度。

夏秋茬大棚辣椒套种快菜高效栽培关键技术

辣椒生长前期,植株较小,而快菜生长时间短,播种采收简单,2种作物可以套种。该套种模式一方面可以提高土地利用率,减轻病虫为害和提高土壤养分;另一方面可增加种植效益,大棚套种辣椒每667 m^(2)产值达1.8万元,节本增效显著,全市该套种模式面积约733.33 hm^(2)。

改良的限盐DASH饮食对高血压和(或)糖尿病患者血压及血糖的影响

目的观察改良的限盐DASH饮食治疗餐对原发性高血压和(或)糖尿病患者血压、血糖的管理效果。方法53例原发性高血压和(或)糖尿病患者,均进行2周的强化限盐DASH饮食干预治疗。分析患者基本情况;比较患者干预前后血压、血糖水平;观察患者干预过程中血压、血糖变化及降压药和降糖药的使用情况。结果53例原发性高血压和(或)糖尿病患者,其中,原发性高血压患者17例,高血压合并2型糖尿病患者23例,2型糖尿病患者13例。将原发性高血压与高血压合并2型糖尿病患者设为高血压组(40例),2型糖尿病与高血压合并2型糖尿病患者设为糖尿病组(36例)。干预后,高血压组收缩压、舒张压分别为(124.3±15.4)、(70.4±9.0)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),低于干预前的(143.3±16.2)、(76.1±9.1)mm Hg,差异均具有统计学意义(P<0.05)。干预后,糖尿病组收缩压、舒张压分别为(117.7±16.1)、(67.9±7.7)mm Hg,低于干预前的(135.7±21.2)、(74.0±8.3)mm Hg,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与干预前相比,高血压组收缩压、舒张压分别降低了(19.0±17.8)、(5.7±7.6)mm Hg;糖尿病组收缩压、舒张压分别降低了(18.0±20.3)、(6.1±8.9)mm Hg。且随着干预时间的延长,血压呈逐渐下降的趋势。干预前,高血压组与糖尿病组分别有32、16例服用降压药的患者,干预结束时,高血压组有7例患者实现停用药物,4例患者服用药物减量,糖尿病组有4例患者实现停用药物,1例患者服用药物减量。干预后,高血压组餐后2 h血糖为(11.1±5.3)mmol/L,低于干预前的(16.7±6.9)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。干预后,糖尿病组餐后2 h血糖为(10.7±4.7)mmol/L,低于干预前的(16.6±5.8)mmol/L,差异有统计学意义(P<0.05)。随着干预时间的延长,餐后2 h血糖呈逐渐下降的趋势。干预前,高血压组与糖尿病组分别有21、31例服用降糖药的患者,干预结束时,高血压组有1例患者实现停用药物,1例患者服用药物减量,糖尿病组有1例患者实现停用药物,3例患者服用药物减量。结论改良的限盐DASH饮食可有效降低原发性高血压和(或)糖尿病患者的血压和血糖,提高管理的依从性。

财务共享形势下企业管理会计转型分析

目前,我国经济的快速发展,促进了各大企业的发展规模以及发展速度。作为企业管理中的重要环节,财务管理的结构优化渐渐被重视起来,企业在优化过程中根据社会实践经验提出财务共享模式。在此模式的推行下,不仅促进了企业的发展,更为企业增强市场竞争力奠定了坚实的基础。然而,在财务共享形式下,企业管理会计转型的发展遇到了一些有待解决的问题。鉴于此,本文针对财务共享模式下企业管理会计转型的发展方向、发展机遇进行简要分析,对其在发展过程中遇到的一些问题进行探究并提出相关的改善措施,希望可以为需要的企业提供帮助。

二化性家蚕滞育、非滞育和即时浸酸卵中糖代谢相关酶mRNA水平和活性的变化

【目的】探究家蚕Bombyx mori胚胎发育早期卵内糖代谢与滞育的关系。【方法】以家蚕二化性品种"秋丰"活化越年卵为材料,一部分于17℃暗催青,孵化后常规饲养,制备非滞育命运卵(ND);另一部分于25℃明催青,孵化后常规饲养,制备滞育命运卵(DD),再用盐酸溶液处理部分DD卵制备即时浸酸卵(IA)。在卵产下或浸酸后0,2,6,12,24,48,72和96 h分别取样,利用qRT-PCR测定家蚕卵中己糖激酶(hexokinase,HK)、磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFK)、山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase,SDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)和海藻糖酶(trehalase,TRE)5种糖代谢相关酶基因的mRNA表达水平,利用紫外-可见分光光度法测定家蚕卵中这5种酶的活性。【结果】家蚕糖酵解途径关键酶己糖激酶(BmHK)和磷酸果糖激酶(BmPFK),以及糖分解代谢关键酶山梨醇脱氢酶(BmSDH-1)和海藻糖酶(BmTRE)在ND和IA中的mRNA水平和活性均普遍高于在DD中的;而糖异生途径相关的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(BmPEPCK)在DD中的mRNA水平和活性均高于在ND和IA中的。【结论】结果提示,DD因胚胎滞育的需要,胚胎发育早期卵内糖代谢以能量和物质的贮存为主;而ND和IA由于胚胎发育进程较快,糖代谢以物质分解代谢为主。本研究初步揭示了家蚕卵内糖代谢与滞育的关系,有助于更好地理解家蚕滞育的分子机制。