甘草查尔酮A通过调控PI3K/AKT信号通路诱导肺鳞癌细胞周期阻滞

目的探究甘草查尔酮A(LCA)对肺鳞癌细胞增殖和周期的影响及相关分子机制。方法通过MTT实验检测不同浓度LCA处理48 h对H226细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC50);不同浓度LCA(0、10、20及40μmol/L)处理H226细胞48 h,通过流式细胞术检测LCA对细胞周期的影响,通过Western blot检测LCA对细胞周期相关蛋白CyclinD1,以及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2和CDK4表达的影响,并探究PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达情况;选取雄性BALB/c-nu裸鼠构建皮下移植瘤模型,随机分为两组(对照组和LCA处理组),腹腔注射LCA 24 d后取肿瘤测量瘤体体积及质量,从体内水平探究LCA的抗肿瘤作用。结果MTT实验结果表明,与空白组比较,随着LCA浓度的增加,细胞存活率明显降低,48 h的IC50为28.3μmol/L;流式细胞术的结果表明LCA处理可以使细胞周期阻滞在G1期(P<0.05),Western blot的结果显示,LCA处理后,CyclinD1、CDK2和CDK4的表达均降低(P<0.05);PI3K和Akt的表达无明显变化,但是它们的磷酸化水平(p-PI3K和p-Akt的表达)显著降低(P<0.05);裸鼠荷瘤实验表明,LCA可使肿瘤体积和质量明显减小(P<0.05)。结论LCA可以抑制肺鳞癌的增殖并诱导细胞周期阻滞,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。

甘草查尔酮A通过Akt/ERK信号通路抑制骨肉瘤增殖

目的 探究甘草查尔酮A(licochalcone A,LCA)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法 体外培养骨肉瘤HOS和U2OS细胞,通过MTT实验检测不同浓度LCA处理不同时间对HOS和U2OS细胞增殖的影响;加入终浓度分别为对照组(含0.1%DMSO的培养液)、5、10及20μmol·L^(-1)的LCA处理细胞48 h,流式细胞术检测LCA对HOS和U2OS细胞凋亡的影响,通过Western blot检测LCA对细胞凋亡相关蛋白cleaved PARP1、Bcl-2、Bax以及Akt和ERK蛋白表达水平的影响;通过裸鼠荷瘤实验从体内水平探究LCA的抗肿瘤作用。结果 MTT实验结果表明,LCA可抑制骨肉瘤HOS和U2OS细胞的增殖,并且呈时间和剂量依赖性;流式细胞术的结果表明,LCA可引起细胞凋亡。Western blot结果显示,ERK和Akt的磷酸化被抑制,cleaved PARP1和Bax的表达量升高,Bcl-2的表达量降低。裸鼠荷瘤实验表明,注射LCA后肿瘤体积明显减小(P<0.05),肿瘤的质量明显减小(P<0.01)。结论 LCA可以抑制骨肉瘤细胞的增殖并诱导凋亡,其作用机制可能与抑制Akt/ERK信号通路有关。

神经生长因子不同给药方式对坐骨神经吻合后修复与再生的影响

背景:神经生长因子对神经损伤后的修复有促进作用,但目前对不同用药方式的优劣性尚有争议。目的:观察鞘膜内与局部应用神经生长因子对兔坐骨神经吻合后修复与再生的影响。方法:将24只新西兰大白兔坐骨神经切断后再缝合,分别向兔鞘膜内或损伤局部注射30μg神经生长因子或等量生理盐水结果与结论:坐骨神经损伤后12周,鞘膜内注射神经生长因子组损伤坐骨神经鞘膜增厚,神经纤维排列较整齐,与正常神经纤维差异不大;且其神经干传导速度、有髓神经纤维数目、髓鞘厚度也明显高于其他组(P<0.05),损伤局部注射神经生长因子组次之。说明神经生长因子具有促进外周神经吻合后修复与再生的功能,鞘膜内应用优于局部注射。

甘草查尔酮A对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的探讨甘草查尔酮A(LCA)对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法将人骨肉瘤细胞分为空白组(LCA浓度为0μmol/L)、5μmol/LLCA组、10μmol/LLCA组、20μmol/LLCA组和40μmol/LLCA组。应用相应浓度的LCA干预5组细胞,干预24、48及72h后,分别检测5组人骨肉瘤细胞增殖的抑制率。干预48h后,检测5组细胞的凋亡率,以及B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果空白组、5μmol/LLCA组、10μmol/LLCA组、20μmol/LLCA组、40μmol/LLCA组细胞增殖抑制率依次升高(均P<0.05),且各浓度LCA组细胞增殖的抑制率均有随时间增加的趋势(均P<0.05)。10μmol/L、20μmol/L、40μmol/LLCA组的细胞凋亡率依次升高,且均高于空白组(均P<0.05)。与空白组相比,20μmol/L、40μmol/LLCA组Bcl-2蛋白表达降低,10μmol/L、20μmol/L、40μmol/LLCA组Bax蛋白表达升高。结论LCA可以抑制人骨肉瘤细胞的增殖,且呈浓度及时间依赖性,并诱导其凋亡,亦具有一定的浓度依赖性,其分子机制可能与调控Bcl-2和Bax蛋白的表达有关。

神经生长因子在周围神经损伤再生的作用及临床应用

神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对神经系统的正常分化、发育、成熟、维持功能和存活、损伤修复等均具有重要的生物学作用。近年来,随着科学家对NGF的进一步研究,其机制被逐步阐明,并应用于临床。在此,就NG对周围神经损伤的作用及及临床应用作一综述。

案例教学法在本科生骨科实验教学中的应用评价

文章选取桂林医学院2014级临床本科班共80人作为研究对象,按要求随机分为实验组和对照组,其中实验组采用案例教学法(case-based learning,CBL),对照组采用讲授教学法(lec ture-based learning,LBL)。通过两组学生的出科考试成绩和满意度调查比较两种教学方法的效果。实践证明,案例教学法能够提高学生在骨科见习过程中的学习效率。

胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架移植对大鼠坐骨神经长距离缺损的修复作用。方法建立大鼠左侧坐骨神经8 mm缺损模型,并随机分为3组,分别给予GDNF基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖多孔支架移植(GDNF-Sch组)、施万细胞复合胶原-壳聚糖多孔支架移植(Sch组)和自体神经移植(对照组),每组6只。分别于术后第3、6、12周行坐骨神经功能指数(SFI)检测,并在术后第12周解剖暴露桥接段坐骨神经行再生神经形态学和电生理检测,并测量胫前肌湿重。结果术后6和12周,3组大鼠术侧SFI间差异有统计学意义(P均<0.05),随着治疗时间延长,GDNF-Sch组SFI恢复情况更接近于对照组,明显优于Sch组。术后12周,GDNF-Sch组和Sch组的感觉神经传导速度明显低于对照组(P<0.05),两组间差异无统计学意义(P>0.05);GDNF-Sch组和Sch组的感觉神经波幅也明显低于对照组(P<0.05),GDNF-Sch组则明显高于Sch组(P<0.05);GDNFSch组和对照组的运动神经传导速度和波幅均明显高于Sch组(P均<0.05),但两组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。术后12周,对照组、Sch组和GDNF-Sch组大鼠桥接侧胫前肌湿重分别为(0.360±0.020)、(0.250±0.018)和(0.310±0.025)g,均明显低于对照侧(0.440±0.031)、(0.420±0.024)和(0.430±0.027)g(P均<0.05);GDNFSch组和对照组桥接侧胫前肌湿重均明显高于Sch组(P均<0.05),但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GDNF基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架能够显著增强大鼠坐骨神经长距离缺损的修复作用,这种修复效果与自体神经移植术相似。

项目驱动法在医学本科生临床能力辅助教学中的应用

"项目驱动教学法"为临床医学能力教学提供了新思路。笔者以"自我康复及手法推拿防治颈椎病的社区保健应用"课题为基础,尝试在医学本科生能力教学中应用项目驱动教学法。此法对扩大学生的知识面,提高学生对知识的融会贯通能力、动手能力和交流沟通能力都有独到之处。非常适合于实践性和操作性很强的医科教学,为培养创新型高级医学人才提供了新的途径。

金属颗粒引起人单核细胞内氧化应激水平变化研究

目的金属假体以其良好的性质在关节置换中得到广泛应用。文中探讨金属假体使用过程中产生的金属颗粒刺激对人单核细胞内氧化应激水平的影响。方法抽取15名健康志愿者外周血,离心后吸取单个核细胞,将细胞进行体外培养,分别加入将钴颗粒、铬颗粒、铁颗粒、钛颗粒形成钴、铬、铁、钛颗粒组,并使颗粒浓度最终约达到20×109个/mL。对照组加入等渗盐水。分别在刺激后6、12、24、36、48h检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽氧化物酶(GSH)含量。结果单核细胞与金属颗粒共培养6、12、24、36、48h后,经统计学分析各颗粒组MDA、ROS水平均高于对照组水平(P<0.05)。钴、铬、铁颗粒组MDA、ROS水平均高于钛颗粒组(P<0.05);各颗粒组SOD、GSH水平均低于对照组(P<0.05)。钴、铬、铁颗粒组SOD、GSH水平均低于钛颗粒组(P<0.05)。结论金属颗粒能导致体外培养的单核细胞细胞内氧化应激水平升高,降低细胞内的抗氧化物酶水平,钴、铬、铁颗粒的诱导活性强于钛颗粒。氧化应激在金属颗粒介导的骨溶解中可能起到了关键作用。

外源性神经生长因子对雪旺细胞中NF-κB mRNA表达的影响

目的：观察外源性神经生长因子（NGF）对雪旺细胞（SCs）中核转录因子κB（NF-κB）mRNA表达的影响。方法体外培养SCs，用S-100免疫组化染色鉴定细胞纯度。取第4代优质细胞，随机分为实验组（ NGF）、阻断组（NGF＋anti-NGFR）、对照组（PBS），提取各组总mRNA，分别用紫外分光光度计、1．5％琼脂糖凝胶电泳观察结果，通过实时荧光定量PCR检测NF-κB mRNA的表达。结果体外培养的SCs与倒置显微镜下观察到的活体细胞形态一致，S-100免疫组化染色显示，SCs纯度达到91％。紫外分光光度计观察A260/A280为1．8～2．2，1．5％琼脂糖凝胶电泳可见28、18 s两条清晰条带，证实提取的mRNA质量良好。实时荧光定量PCR检测发现，与对照组、阻断组相比，实验组NF-κB mRNA的表达显著增高（P均＜0．01）。结论外源性NGF可以上调SCs中NF-κB mRNA的表达。

3D打印技术结合PBL教学法在骨科教学中的应用

PBL（problem based learning）教学法是一种以学生为主体的教学模式,与传统的教学模式不同,它是以问题讨论为核心,学生为主体,在教师引导下,以小组讨论为主要形式,围绕某个复杂的问题或临床病例进行讨论和学习的过程,通过探讨隐藏在问题背后的知识,揭示、解决问题,达到提高自主学习能力,培养创造性思维方式的目的[1-2]。

项目驱动教学法在临床教学中的应用

项目驱动教学法是一种以学生为中心的教学方式,我们通过应用项目驱动教学法进行临床教学的研究,结果发现这种方法不仅有利于提高学生的主动性,而且培养了学生独立解决问题的能力。

3D打印联合CBL在复杂胫骨平台骨折教学中的应用

目的探讨3D打印联合CBL教学法在复杂胫骨平台骨折教学中的应用效果。方法选取2019年1月—12月在我院骨科临床实习的80名本科生进行调查,采用随机数字表法分组,试验组40名学生在复杂胫骨平台骨折教学中应用3D打印联合CBL教学方法,对照组40名学生采取传统教学模式。对两组学生的出科考核和教学满意度进行评价。结果试验组学生的学习兴趣、临床思维能力、操作考核和教学满意度的评分明显高于对照组(P<0.05)差异有统计学意义;两组学生的理论考试成绩(P>0.05)差异无统计学意义。结论在复杂胫骨平台骨折教学中应用3D打印联合CBL教学法不仅能显著提高学生的学习兴趣和综合能力,而且能提高教学满意度。

新辅助化疗联合保肢手术治疗四肢骨肉瘤的临床研究

目的研究新辅助化疗联合保肢手术治疗骨肉瘤的临床效果。方法根据既往治疗骨肉瘤方法的不同,将56例患者分为对传统保肢组(A组)和现代保肢组(B组),各28例。A组用采用传统保肢方案,即保肢手术+术后化疗方案进行;B组采用现代保肢方案,即新辅助化疗+保肢手术+术后化疗方案进行。化疗方案均采用CTX+VCR+MTX+ADM方案,比较两组转移/复发率、术后1年、2年及3年生存率、肢体功能、临床疗效情况。结果比较两组的转移/复发率及3年后的死亡率,B组低于A组(P<0.05);肢体功能优良率及临床疗效,B组高于A组(P<0.05)。结论新辅助化疗联合保肢手术能够降低骨肉瘤患者转移/复发率、死亡率,改善肢体功能,提高临床疗效。

矩形柄人工髋关节置换治疗老年股骨转子间粉碎性骨折

目的总结采用矩形柄人工髋关节假体置换治疗老年股骨转子间粉碎性骨折的疗效。方法 2008年1月-2010年3月,采用矩形柄人工髋关节假体置换治疗老年股骨转子间粉碎性骨折36例。男16例,女20例;年龄75～93岁,平均81.2岁。均为跌倒致伤。骨折按Evans分型:Ⅲ型25例,Ⅳ型11例。均有不同程度骨质疏松,合并心血管及呼吸系统疾病26例,糖尿病4例。受伤至手术时间为3～9 d,平均5.4 d。结果术后切口均Ⅰ期愈合,无下肢深静脉血栓形成等并发症发生。33例获随访,随访时间12～36个月,平均19.7个月。X线片示假体位置良好,无下沉、松动、脱位、髋内翻。末次随访时根据Harris评分标准,获优20例,良8例,可4例,差1例,优良率84.8%。结论矩形柄人工髋关节假体置换治疗老年股骨转子间粉碎性骨折,股骨近端骨折块成形复位容易,有良好的抗旋转作用和即刻稳定性,能维持假体的前倾角,术后卧床时间短,利于早期功能锻炼,近期临床疗效满意。

尿液中C2C水平对膝关节骨关节炎的诊断价值

目的探讨尿液中C2C水平与膝关节骨关节炎(KOA)患者病变程度的关系。方法收集90例KOA患者(KOA组)和20例非KOA患者(正常对照组)的尿液标本及膝关节正侧位影像学资料,采用Kellgren-Lawrence放射学分级标准对KOA组的影像学表现进行分级:Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组和Ⅳ级组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测尿液中C2C水平。结果 KOA组尿液中C2C水平高于正常对照组(P<0.001)。C2C水平Ⅳ组>Ⅲ组>Ⅱ组>Ⅰ组和正常对照组(P=0.000)。结论 C2C升高水平与KOA的影像学分级平行,两者呈高度正相关性。C2C可作为区分KOA严重程度的标志物,也可作为评价药物及手术治疗KOA疗效的参考指标,但其作为早期诊断的价值有限。

Flow-through嵌合ALTP急诊修复四肢Gustillo III C型损伤

目的探讨Flow-through嵌合股前外侧穿支皮瓣(ALTP)急诊一期修复四肢Gustillo III C型损伤的临床疗效。方法2010年1月至2017年12月,采用Flow-through嵌合ALTP急诊修复四肢Gustillo III C型损伤患者17例。其中男16例,女1例;年龄19~55岁,平均32.4岁。创面范围16 cm×8 cm^45 cm×30 cm。旋股外侧动脉降支Flow-through吻合受区动脉以重建肢体血供,股外侧肌瓣填塞深部死腔,皮瓣和筋膜瓣覆盖浅表创面。供区皮肤直接闭合6例,腹部取皮植皮11例。结果术后采用门诊结合微信、电话随访,时间5~60个月,平均21.8个月。皮瓣成活15例,2例失败并截肢。6例采用皮瓣和筋膜瓣修复,11例采用皮瓣、筋膜瓣和肌瓣修复。术后4例皮瓣一期愈合;11例患者皮瓣边缘出现坏死,其中1例换药后瘢痕愈合,其余10例患者二期植皮愈合。所有患者供区未出现并发症。结论急诊Flow-through嵌合ALTP在重建肢体血供的同时实现创面三维立体修复,是修复四肢Gustillo III C型损伤的有效方法之一。

高压氧结合推拿治疗椎动脉型颈椎病患者的临床疗效及血液流变学变化

目的:探讨高压氧(HBO)结合推拿治疗椎动脉型颈椎病(CSA)的临床疗效及血液流变学变化。方法:选取2018年1月至2019年1月桂林医学院附属医院收治的CSA患者110例,采用数字表法随机分为观察组和对照组,每组55例。对照组给予常规的中医推拿治疗,观察组在对照组治疗基础上给予HBO治疗,观察治疗前后2组患者的临床疗效、血液流变学、颈椎活动度及血浆神经肽Y(NPY)和尾加压素Ⅱ(UⅡ)水平的变化。结果:治疗后观察组总有效率(94.55%)显著高于对照组(81.82%)( P<0.05)。观察组治疗后血液流变学指标收缩期峰值血流速度、椎动脉-基底动脉平均血流速度均显著快于对照组( P<0.05)。观察组治疗后颈椎前、后、左、右移动的活动度均显著高于对照组( P<0.05)。2组治疗后血浆中NPY及UⅡ水平较治疗前均显著降低( P<0.01),并且治疗后观察组NPY及UⅡ水平显著低于对照组( P<0.05)。 结论:HBO结合推拿治疗CSA主要通过提高颈椎活动度、改善血液流变学及下调血浆NPY、UⅡ水平,提高患者的临床疗效。