人胃癌肿瘤相关成纤维细胞的原代培养和鉴定

目的探讨人胃癌肿瘤相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)的培养和鉴定方法,并分析其与胃正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)在生物学特性和蛋白表达方面的差异,为其功能研究奠定基础。方法采用组织块法和酶消化法进行人胃癌CAFs和NFs的原代培养,通过酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察和多种蛋白的免疫细胞化学染色对其进行鉴定。结果获得纯化的人胃癌CAFs和NFs。胃癌CAFs呈长梭形,大小不等,生长密集,排列紊乱。除表达vimen-tin这一成纤维细胞的标记物外,还表达FAP、SMA,但不表达CK、desmin。结论只要给细胞创造良好的生长条件并规范操作,组织块法和消化法均可成功的培养出人胃癌CAFs和人胃NFs。胃癌CAFs与NFs在形态结构、生长方式和蛋白表达等方面均存在明显差异。

纤维母细胞活化蛋白和转化生长因子β1在胃癌中的表达及其临床意义

目的研究纤维母细胞活化蛋白(FAP)和转化生长因子β1(TGFβ1)在胃癌组织中的表达,并分析其与胃癌临床病理特征及淋巴结转移间的关系。方法采用免疫组化方法检测FAP和TGFβ1在42例胃癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果①正常胃组织中FAP(-);胃癌组织中FAP主要表达于肿瘤相关纤维母细胞胞质中,且弥漫型胃癌表达显著高于肠型胃癌(P<0.05),并与临床病理分期、浸润深度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05);②正常胃组织中TGFβ1为(-)或弱(+);胃癌组织中TGFβ1主要表达于瘤细胞胞质,在肿瘤间质纤维母细胞、血管内皮细胞和中性粒细胞偶有表达,且瘤细胞的表达强度与临床病理分期、浸润深度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05);③FAP在肿瘤相关纤维母细胞的表达与TGFβ1在肿瘤细胞的表达呈正相关(P<0.05)。结论从FAP表达与TGFβ1表达的正相关性,推测其可能是通过肿瘤-间质相互作用促进肿瘤演进。FAP特异性表达于胃癌间质纤维母细胞,与多项临床病理指标,尤其是淋巴结转移和肿瘤的病理分型有关,可以作为预测胃癌淋巴结转移和预后的免疫病理学指标,有望成为抗胃癌治疗的一个新的靶向分子。

胃癌间质中肿瘤相关纤维母细胞CD34和SMA的表达及意义

目的探讨胃癌间质中肿瘤相关纤维母细胞CD34和SMA的表达及与胃癌侵袭性的关系。方法应用免疫组织化学PV6000通用型二步法检测75例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中间质纤维母细胞CD34和SMA的表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果CD34在正常胃黏膜组织纤维母细胞中阳性表达率为80.0%（8/10）,而在胃癌组织纤维母细胞中仅6/75例呈阳性表达（8.0%）,两者比较差异有显著性（P〈0.01）。胃癌组织纤维母细胞中SMA阳性表达率为90.7%（68/75）,显著高于正常胃黏膜组（30.0%）（P〈0.01）。胃癌组织纤维母细胞中SMA表达与胃癌的Lauren分型及组织学分级无关（P〉0.05）,与临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）,Ⅲ-Ⅳ期强阳性率（75.6%）明显高于Ⅰ-Ⅱ期（26.7%）（P〈0.01）,有淋巴结转移组的强阳性率（78.7%）明显高于无淋巴结转移组（17.9%）（P〈0.01）。结论与正常组织中纤维母细胞相比,胃癌中纤维母细胞表现为CD34（＋）表达的缺失,而转变为SMA（＋）的肌纤维母细胞的特征,两者的联合检测将可能作为肿瘤相关纤维母细胞较特异的标记;肿瘤相关纤维母细胞与胃癌的侵袭转移密切相关。

胃癌中肿瘤相关纤维母细胞蛋白表达改变及意义

目的：探讨胃癌中肿瘤相关纤维母细胞（tumor-associated fibroblasts，TAFs）蛋白表达的改变及与胃癌侵袭转移的关系．方法：应用免疫组织化学方法检测75例胃癌组织及10例正常胃黏膜组织中纤维母细胞CD34，平滑肌肌动蛋白（SMA）和转化生长因β1（TGF-β1）的表达，分析蛋白表达改变的机制及与胃癌临床病理特征的关系．结果：胃癌组织CD34，SMA和TGF-β1中的阳性表达与正常胃黏膜组织纤维母细胞中的表达（8．0％vs80．0％， x^2 =28．220；90．7％VS30．0％， x^2 =19．401；89.3％VS30．0％， x^2 =17．486；均P〈0．01）；SMA和TGF-β1均与与肿瘤浸润深度、临床分期和淋巴结转移有关（均p〈0．05），且两者的表达密切相关（r=0．555，P〈0．05）．结论：胃癌细胞可能通过分泌TGF-β1作用于间质，促进CD34（＋）纤维母细胞转变为SMA（＋）的肌纤维母细胞，从而发挥其促进肿瘤浸润转移的作用．

胃癌细胞SGC-7901对骨髓来源的间充质干细胞作用的研究

目的建立胃癌细胞SGC-7901与骨髓来源的间充质干细胞相互作用的体外模型,检测其对间充质干细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,分析处于肿瘤微环境中的间充质干细胞生物学特性的改变。方法原代培养骨髓来源的间充质干细胞,传代培养胃癌细胞SGC-7901,建立间充质干细胞与胃癌细胞SGC-7901相互作用的体外模型,分析胃癌细胞SGC-7901对间充质干细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果 (1)胃癌细胞SGC-7901对间充质干细胞的增殖无影响(P>0.05)。(2)胃癌细胞SGC-7901可显著提高间充质干细胞的侵袭及迁移能力(P<0.05)。结论胃癌细胞SGC-7901对间充质干细胞有很强的趋化性,但对其增殖并无影响。

周细胞的研究进展

周细胞是一种多能细胞,可以向骨、软骨等组织分化;具有收缩能力,从而调节微环境的灌流量和通透性;还能和内皮细胞相互作用,参与血管形成和创伤愈合。周细胞的功能失调和许多微血管疾病以及肿瘤的扩散相关。一直以来,对周细胞的存在以及功能有所忽略,最近才对其有一定的认识。本文就周细胞的定位、结构、标记物、功能、相关的信号通路以及在肿瘤中所起的作用做一简单的介绍。

骨髓来源的间充质干细胞对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

目的研究骨髓来源的间充质干细胞对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响,为胃癌的治疗与研究提供新的思路及方法。方法原代培养骨髓来源的间充质干细胞,传代培养胃癌细胞SGC-7901,间充质干细胞及5-Fu对胃癌细胞SGC-7901增殖能力的影响采用MTT比色法。结果 24 h内,与MCM组及DMEM相比,MSC组胃癌细胞SGC-7901的吸光度降低较显著(P<0.05);与DMEM相比,24 h后MCM组胃癌细胞SGC-7901吸光度开始降低,该现象可延长至72 h(P<0.05)。加入5-Fu后,与DMEM组相比2,4 h后MCM组SGC-7901吸光度降低较显著(P<0.05);但随着时间的延长至72 h,两组间的差异消失(P>0.05)。结论骨髓来源的间充质干细胞可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖,并协同5-Fu对胃癌细胞SGC7-901的增殖起抑制作用。

胃肠道类癌组织中胃泌素、生长抑素等表达与淋巴结转移相关性的研究

目的探讨胃肠道类癌组织胃泌素、生长抑素、5-羟色胺、胰高血糖素的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法对36例消化道类癌组织中4种激素蛋白的表达进行检测。结果36例类癌组织中胃泌素表达的阳性率随肿瘤组织分化程度的降低而上升(P<0.05),并与肿瘤的淋巴结转移有相关性(P<0.05);生长抑素的表达与肿瘤的分期相关,在淋巴结转移的肿瘤中表达率显著降低(P<0.01);5-羟色胺、胰高血糖素的表达与肿瘤的分化和淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论胃泌素、生长抑素可能与细胞膜上相应受体结合,促进或抑制肿瘤细胞增殖。对胃泌素、生长抑素等激素蛋白的检测可用来预测类癌的生物学行为。

口腔鳞癌及癌前病变组织P16蛋白表达的研究

目的探讨P16蛋白表达与口腔鳞癌发生、发展的关系。方法应用免疫组化方法检测了25例口腔鳞癌及58例增生性病变和14例正常口腔黏膜上皮组织中P16蛋白的表达。结果P16蛋白表达的阳性率分别为侵袭性鳞癌20.0%,原位癌53.3%,重度不典型增生83.3%,中度不典型增生62.5%,轻度不典型增生66.7%,单纯增生80%,正常黏膜组织64.3%。结论P16蛋白表达的缺失可能与口腔鳞癌的发生、发展有关。

Wistar大鼠骨髓间充质干细胞的原代培养和鉴定

目的探讨大鼠骨髓来源的间充质干细胞的培养和鉴定方法,为其功能研究奠定基础。方法采用全骨髓贴壁法进行骨髓来源的间充质干细胞的原代培养,通过酶消化法进行人工纯化,通过形态学观察、细胞周期测定及其自然分化实验进行鉴定。结果获得纯化的大鼠骨髓来源的间充质干细胞,该细胞呈长梭形或多角形,大小不等,生长密集,排列呈流线型。结论只要给细胞创造良好的生长条件并规范操作,全骨髓贴壁法可成功培养出稳定的大鼠骨髓来源的间充质干细胞。

人脑星形胶质细胞瘤血管内皮生长因子表达、血管生成及细胞增殖活性的研究

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)在星形细胞瘤中的表达,探讨VEGF与肿瘤血管生成和细胞增殖的关系。方法SP免疫组化法对64例星形细胞瘤的VEGF和PCNA表达进行观察。CD31单克隆抗体免疫组化染色显示微血管,用微血管计数(MVC)测定肿瘤血管生成。结果VEGF蛋白主要分布在高级别胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞,低级别胶质瘤呈低表达,且与PCNA的表达成显著正相关(r=0.991,P<0.01);高级别胶质瘤MVC显著高于低级别胶质瘤。结论VEGF可能参与胶质瘤血管生成,对胶质瘤的恶性进展起促进作用,PCNA较能客观地反映肿瘤的恶性程度。

试论《都柏林人》中双重叙事结构的艺术张力

经典叙事学认为,《都柏林人》的叙事在故事层面,如人物、环境、情节的设置都具有传统小说特点。但在传统叙事结构掩藏下,它还存在着叙事逻辑层面断裂特点,构成了双重叙事结构。双重叙事结构的对比衍生出强烈的现实矛盾和深厚的文化内涵,具有极强的艺术张力。

P27^(kip1)、Ki-67蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究P27kip1、Ki-67在胃癌中的表达及与肿瘤分期的关系。方法SP免疫组化法对72例胃癌的P27kip1和Ki-67表达进行观察。结果P27kip1在胃癌中呈散在表达(36.1%),其阳性表达率显著低于正常粘膜(P<0.01);Ki-67阳性表达率50%,其表达率与肿瘤进展程度密切相关;P27kip1与Ki-67之前阳性表达呈现负相关。结论P27Kip1表达的缺失与胃癌的发生发展密切相关,Ki-67能客观反映肿瘤的恶性程度,与肿瘤预后有一定的相关性。

肿瘤相关纤维母细胞与肿瘤发生发展的研究进展

肿瘤相关纤维母细胞是肿瘤间质中的主要细胞成分,对恶性肿瘤的形成、分化、免疫逃逸和浸润转移有着重要的调节作用,本文就肿瘤相关纤维母细胞与肿瘤发生发展的研究进展作一综述。

ANRIL对胃癌细胞增殖的影响

目的:研究在胃癌细胞系SGC-7901中,ANRIL对其增殖的影响,并探讨该作用是否与TGF-β/Smad通路相关。方法:采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术对SGC-7901细胞中的ANRIL基因、TGF-β1基因分别进行干预,并对ANRIL基因及TGF-β1基因进行联合干预;应用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测各实验组中细胞增殖能力的变化;采用Western blot法检测各实验组中TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达情况。结果:胃癌细胞系SGC-7901经转染24 h、48 h后,siANRIL组OD值明显低于NC组、MOCK组及BLANK组(P<0.05)。siANRIL+siTGF-β1组、siTGF-β1组OD值高于NC组、MOCK组及BLANK组(P<0.05)。siANRIL+siTGF-β1组OD值介于siANRIL组与siTGF-β1组之间(P<0.05)。siANRIL组TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达高于NC组、MOCK组及BLANK组(P<0.05)。在siTGF-β1组及siANRIL+siTGF-β1组中TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达低于NC组、MOCK组及BLANK组(P<0.05)。siANRIL+siTGF-β1组TGF-β1蛋白和p-Smad蛋白的表达介于siANRIL组与siTGF-β1组之间(P<0.05)。结论:在胃癌细胞系SGC-7901中,ANRIL对其细胞增殖发挥促进作用,且ANRIL可能是通过TGF-β/Smad信号传导通路发挥促进作用的。

新时代大学生道德意志培养路径探析

新时代大学生进入一个机遇与挑战并存的新征程,必然会面临许多道德难题和抉择,培养和坚守道德意志就显得异常重要。对于道德意志的培养,首先要提高新时代大学生对道德意志的认识,把握好道德意志的主要表现形式;明辨新时代大学生道德意志的现状;最后要针对现状来优化新时代大学生道德意志培养的路径。

论历史发展的鲜明特征

历史不仅仅是对人类社会的事件和行动的有系统的记录、诠释和研究,也不仅仅具有“当时”的意义,而且具有“此在”的价值。不同的人具有不同的历史观,从分析马克思和黑格尔两人不同的价值观中我们会获得不同的启示和不同的历史意义,要学会用辩证客观的态度把握两者不同的历史观,正确认识历史就要看到历史自身所具有的属人的、自由的、扬弃的、发展的特征,看到历史的发展是一个不断辩证否定的过程,是一个获得自由的过程,是一个在否定过程中保存并不断发展的过程,更要看到历史所产生的价值。

论激励法在高校思想政治教育中的运用

激励法的运用在高校思想政治教育中蕴含着重要的作用,不仅能够调动大学生的积极性和主动性,增强大学生的自尊性和自信心,并能够挖掘其内在潜力,提升思想政治教育的实效性。不过在高校思想政治教育过程中仍然存在着一些问题,需要不断优化激励法在高校思想政治教育中的运用。

历史视域下新时代大学生发展路径探析

正确认识历史,新时代大学生要看到历史所产生的价值,即指引新时代大学生不断在否定自己本性,否定给定存在物,否定自己天性的过程中敞开自己,超越自己,发展自己,活出自我;对此新时代大学生也要自觉的推动历史的前进和发展,即要正确看待和把握历史终结的问题,认识到发展也会有一个终点站,一位著名学者曾经说过:“按照马克思历史运动的辩证发展思想,历史虽然永远都处于辩证的否定过程中,永远都在寻求一种能够被否定的给定存在,但是一旦寻找到永恒的给定存在,这将意味着历史的终结。”但是在没有达到这个终点站之前我们就要在辩证否定中推动历史不断向前发展,用人生的厚度来增强历史的厚度。

论选题类型、方法与选题途径

选题是论文写作的第一步,研究者要走好第一步,扣好“论文”的第一粒扣子。选题从不同的视角和标准划分,会有不同的类型,可以从学科关系角度进行界定和划分。此外选题要掌握科学、有效的研究选题方法可以有效帮助研究者高效率的深入挖掘和选择科研题目,对此作者提出发掘法、兴趣法、应急法和超越法。另外作者从研究选题的来源出发,对选题的四条途径展开分析,即从实践需要中选题、从理论研究中选题、从纵横比较中选题、从已有成果中选题,旨在为研究者顺利定题提供一些方法途径,提供一些参照和借鉴,希望能够助力研究者旗开得胜,收获满意的选题。