氟中毒对神经细胞损伤及自噬的影响

目的探讨氟中毒对小鼠小胶质细胞株BV2和小鼠来源神经母细胞瘤细胞株N2a及小鼠大脑皮质神经细胞损伤及自噬的影响。方法8周龄清洁级雄性C57BL/6J野生型小鼠,随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量10.0 mg/L)和高氟组(饮水含氟量50.0 mg/L),每组10只喂养12周;BV2及N2a正常培养后分对照组、低氟组(培养基含氟量1.0 mmol/L)和高氟组(培养基含氟量1.5 mmol/L);采用CCK8检测不同浓度氟处理下BV2和N2a细胞增殖活力变化,氟离子选择电极法检测造模小鼠尿、血、骨氟含量变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BV2、小鼠大脑皮质中小胶质细胞活化标志物离子钙结合衔接分子1(Iba-1)的表达变化及N2a细胞、BV2细胞和小鼠大脑皮质中自噬相关微管相关蛋白1轻链3(LC3)及自噬受体蛋白P62蛋白(SQSTM1/P62)的表达水平;线粒体动力学及自噬融合分裂相关蛋白线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、动力相关蛋白1(Drp1)、张力蛋白同源物诱导的假定激酶1(Pink1)及E3泛素连接酶(Parkin)的表达水平。结果CCK8结果显示,1.5 mmol/LNaF处理的BV2、N2a细胞增殖活力明显下降(P<0.001,);低氟组小鼠氟斑牙发生率为60%,高氟组小鼠氟斑牙发生率为80%;与对照组比较,染氟组小鼠尿、血、骨氟含量明显上升(P<0.001);蛋白免疫印迹结果显示,与对照组比较,高氟组的小鼠大脑皮质和BV2的小胶质细胞活化标志物Iba-1表达水平显著升高(P<0.001,P<0.01),高氟组的小鼠大脑皮质和BV2及N2a细胞自噬相关蛋白LC3、Parkin、Pink1表达量显著增加(P<0.05)、P62水平显著下降(P<0.01);线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2水平显著增加(P<0.001),分裂蛋白Drp1无明显变化。结论氟中毒可导致线粒体损伤、破坏线粒体融合分裂平衡并引起细胞自噬,为阐明氟中毒神经系统损伤与细胞自噬之间相互关系提供新思路。

星形胶质细胞来源外泌体对氧糖剥夺再复氧后PC12细胞线粒体功能损伤的保护作用

外泌体可以改善由缺氧缺血引起的神经细胞损伤,但星形胶质细胞来源的外泌体(astrocyte-derived exosomes,As-exo)与线粒体功能、线粒体相关内质网膜(mitochondrial associated ER membrane,MAM)的功能及线粒体自噬是否相关目前尚未明确。本研究旨在探究星形胶质细胞来源外泌体对氧糖剥夺再复氧(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)后PC12细胞线粒体功能、MAM以及线粒体自噬的调控作用。超速离心法提取星形胶质细胞培养基上清中的外泌体并对其进行鉴定。利用活细胞工作站观察到荧光标记后的外泌体在24 h时即在PC12细胞内出现明显的富集现象,同时在激光共聚焦扫描显微镜下观察到外泌体与线粒体出现共定位现象;采用Seahorse细胞能量代谢分仪检测线粒体压力变化:与Control组相比,OGD/R组的基础呼吸、质子漏、最大呼吸和ATP相关呼吸都有明显降低(P<0.05或P<0.01),OGD/R+exo组与OGD/R组相比4项指标都升高且差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);线粒体和内质网共定位结果表明,MAM受到氧糖剥夺再复氧伤害时,结构出现距离减小的聚合现象,而As-exo处理后MAM聚合现象减弱;流式结果表明,As-exo,一定程度恢复由氧糖剥夺损伤带来的线粒体膜电位降低和ROS升高;Western印迹结果显示,As-exo能显著抑制由OGD/R引起的线粒体自噬相关蛋白张力蛋白同源物诱导的假定激酶1(PTEN induced kinase 1,PINK1)和Parkin蛋白(parkin RBR E3 ubiquitin protein ligase,Parkin)升高,加入As-exo可降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达量,升高P62蛋白的表达水平,降低OGD/R引起的线粒体自噬水平。由此可见,OGD/R处理能引起PC12细胞的线粒体功能紊乱、MAM结构改变及线粒体自噬增加,As-exo处理后能改善细胞的线粒体功能、减弱MAM的形成和降低线粒体自噬,从而具有预防缺血性脑卒中再灌注损伤的治疗潜力。

血清脂蛋白(a)水平与脑梗死的相关性研究

目的 研究血清脂蛋白 (a)与脑梗死之间的关系。方法 对 5 4例脑梗死患者的血清脂蛋白 (a)及其它血脂成份、血压、心电图等进行了监测 ,并与 5 8例性别、年龄匹配的正常人进行对比分析。结果 脑梗死组血清脂蛋白 (a)为 (36 3± 10 1)mg/L ,对照组为 (2 2 6± 94)mg/L ,两者差异显著 (P <0 .0 5 )。血清脂蛋白 (a)与三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白 (HDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、载脂蛋白A1、载脂蛋白B10 0 等无相关性。脑梗死组的血压、心电图等监测结果均有明显异常 ,与对照组比较差异显著。结论 高脂蛋白 (a)血症是引起脑梗死与动脉粥样硬化的独立危险因素。

一个乡办企业的成功之道

厦门工程机械制动器厂,是厦门工程机械厂的主要定点厂,属该市集美区东孚乡的一个乡办企业。这个厂在建厂10年的历程中,由一个设备简陋、产值小、利润低的乡农械厂转轨生产后,现在厂区建筑面积扩展到1万多平方米,拥有固定资产(原值)232万元,比10年前增加近11倍。 厦门工程机械厂是生产出口机械装载机的大型企业,这里介绍的厦门工程机械制动器厂是为共生产零部件的挂钩厂,主产内外钳与装载机操纵系统的手、脚制动器。

正常与氧糖剥夺再复氧培养的星形胶质细胞来源外泌体miRNA测序分析

本研究通过高通量测序技术,分析正常培养和氧糖剥夺再复氧(oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)培养星形胶质细胞来源外泌体的差异微小RNA(microRNA,miRNA)。采用超速离心法提取正常组和OGD/R组星形胶质细胞培养基上清的外泌体,透射电镜观察到提取的外泌体呈典型囊泡状,包膜完整,含有低电子密度的物质;纳米颗粒追踪技术(NTA)检测到星形胶质细胞外泌体大小为100.5±31.1 nm,占比为96.8%;免疫印迹检测显示,提取物中有外泌体标志性蛋白肿瘤易感蛋白(tumour-susceptibility protein,TSG101)、热休克蛋白60(heat shock proteins 60,Hsp60)、ALG-2相互作用蛋白X(ALG-2-interacting protein X,ALIX)的表达。与正常组相比,OGD/R组共有41个miRNA发生显著改变,其中20个miRNA显著升高,21个miRNA显著降低(P<0.05)。基因本体功能(GO)分析显示,差异靶基因主要参与蛋白质糖基化、脂质代谢过程、磷酸化作用、高尔基体、内质网、内吞体、细胞质囊泡和细胞突起等生物学过程;京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析发现,差异靶基因主要与丁酸代谢、β-丙氨酸代谢、脂肪酸降解、线粒体自噬和P53信号通路等代谢途径和信号通路有关。通过对正常组和OGD/R组的星形胶质细胞来源的外泌体miRNA测序并进一步施行靶基因功能富集分析,为后续研究星形胶质细胞外泌体对氧糖剥夺再灌注神经元发挥的保护作用的具体机制提供了一定的研究基础。

努力开拓特区农行存款业务新路子

农业银行厦门市分行,近二年在“外向型、多功能、综合性”办行方向指引下,立足特区,依托闽南,积极开展国际、国内业务,在特区众多金融机构中站稳脚跟。全行上下深刻认识到:无论货币政策有何变动,存款始终是制约全行业务的重大因素,要坚定不移地把资金组织工作放在业务工作的首位。为了广开筹集存款的渠道,本文从剖析现状入手,就存款业务的发展趋势、开拓的构思作初步探索。 一、现状和问题 厦门农行自1979年恢复以来,资金实力不断壮大,各项存款平均每年增长33.41％,截至1989年6月底,各项存款余额30374万元,其中储蓄存款余额13783万元,占存款总额的45.4％;

咏史怀古

钱明锵水龙吟·步徐步云先生《纪念辛弃疾逝世八百周年》原玉塞笳吹月声哀,(?)邅未遂戡夷志。归田释位,买牛卖剑,权侔俗子。进退存亡,行藏用舍,丈夫无泪。纵躬耕陇亩,犹思报国,平戎望,何曾已?幽怨愁情怎寄?掞天才、词雄飚起。纵横六合,扫空千古,名垂青史。一代英贤,万民标格,埋身蒿里。问人龙托迹,瓢泉谬幸,喜乎悲矣!