四川野生朱砂莲的镇痛作用

目的 证实中草药朱砂莲的镇痛作用 .方法 利用昆明种小鼠 ,采用热板法和化学剌激法 .结果 用中、高剂量 (0 .8g/kg、1.6g/kg)的朱砂莲对小鼠有明显的镇痛作用 ,以 0 .8g/kg时为最强 .其镇痛效果 ,比 0 .2 g/kg的阿斯匹林强 ,比杜冷丁弱 ,但镇痛作用延续的时间比杜冷丁长 .结论 中草药朱砂莲有明显的镇痛作用 ,有深入研究和开发的价值 .

从尿中分离制备人表皮生长因子

目的探索从人尿中分离制备人表皮生长因子的工艺。方法通过超滤、蛋白质等电点沉淀、离子交换色谱和分子筛柱色谱等 ,从正常男性尿中分离、制备人表皮生长因子。结果从尿液 4 0L中 ,最后得到初步电泳纯 ,具有促细胞增殖活性的人表皮生长因子 2 .36mg。

Ras癌基因及nm23抑癌基因对细胞膜磷脂酶D活性的影响

目的 :研究ras癌基因和nm2 3抑癌基因的高表达对细胞膜磷脂酶D(PLD)活性的影响。方法 :用ras癌基因和nm2 3抑癌基因构建的重组质粒 ,分别转染人肝癌细胞株 772 1,建立了高表达ras癌基因和nm2 3抑癌基因的H ras 772 1和nm2 3 H 772 1细胞株 ,测定 772 1、mock细胞 (空载体转染的 772 1细胞 )、H ras 772 1和nm2 3 H 772 14种细胞中 ,细胞膜PLD酶活性和PLD酶蛋白表达量。结果 :在H ras 772 1细胞中 ,PLD酶活性比 772 1、mock细胞中PLD酶活性显著升高。nm2 3 H 772 1细胞中 ,酶活性却显著降低。但在二种细胞中 ,PLD酶蛋白的量未见显著变化。结论 :ras癌基因和nm2 3抑癌基因的高表达对PLD酶活性的影响 ,可能主要是通过影响PLD酶活性的调节因素来实现的。

小鼠颌下腺表皮生长因子的制备及纯化

目的 :探索表皮生长因子 (EGF)的制备及纯化方法。方法 :取小鼠颌下腺约 10g ,匀浆 ,离心取上清。盐析 ,离心收集沉淀。沉淀溶解于匀浆缓冲液中 ,上CM 纤维素柱。用不同盐浓度的缓冲液阶段洗脱 ,收集得A、B、C、D四个洗脱峰。用MTT法检测各峰EGF活性 ,用活性峰透析、浓缩 ,通过SephadexG 5 0柱。收集活性峰 ,浓缩 ,用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,真空冷冻干燥 ,得成品。结果 :小鼠颌下腺经匀浆 ,盐析 ,CM 纤维素柱及SephadexG 5 0柱 ,得具EGF活性、电泳为单一条带的蛋白质 ,其分子量约 6 0 0 0。得率为 1.44mg。 结论 :用盐析及层析法制备、纯化EGF 。

学院472名教职工血糖、血脂水平测定

研究测定本院472名教职工 (20～63岁 )的空腹血糖 (SG)、甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (T-CH)值。男性288人 ,女性184人。其SG、TG、T-CH的平均值 (mmol/L) ,均高于全国健康人群普查水平。男性高血清甘油三酯所占比例明显高于女性。血清总胆固醇不论男、女随年龄增大而升高的趋势明显。这在知识界可能具有普遍性。

Ras癌基因及nm23抑癌基因对细胞膜磷脂酶D活性的影响

目的 为研究ras癌基因和nm2 3抑癌基因的高表达对细胞膜磷脂酶D (PLD)活性的影响。方法 用ras癌基因和nm2 3抑癌基因构建的重组质粒 ,分别转染人肝癌细胞株 772 1,建立了高表达ras癌基因和nm2 3抑癌基因的H ras/772 1和nm2 3 H/772 1细胞株 ,测定 772 1、mock细胞 (空载体转染的 772 1细胞 )、H ras/772 1和nm2 3 H/772 1四种细胞中 ,细胞膜PLD酶活性和PLD酶蛋白表达量。结果 在H ras/772 1细胞中 ,PLD酶活性比 772 1、mock细胞中PLD酶活性显著升高。nm2 3 H/772 1细胞中 ,酶活性却显著降低。但在两种细胞中 ,PLD酶蛋白的量未见显著变化。结论 ras癌基因和nm2 3抑癌基因的高表达对PLD酶活性的影响 ,可能主要是通过影响PLD酶活性的调节因素来实现的。

32例肿瘤组织中p53基因突变的PCR-SSCP、银染色检测

目的 检测肿瘤组织中 p5 3基因的突变率 ,探索其在肿瘤发展过程中的作用 .建立PCR SSCP检测 p5 3突变的常规方法 .方法 检测 32例癌组织和癌旁组织 .用盐沉淀制备样品DNA ,以p5 3基因exon7设计引物 ,用PCR SSCP结合银染色显示结果 .结果 32例肿瘤标本检出阳性 9例 ,阳性率 2 8.1% .4例癌组织和癌旁组织均为阳性 .其中 2 2例胃癌 ,检出 4例阳性 (占 18.2 % ) ,双阳性者 2例 .结论 p5 3基因突变在肿瘤中具有普遍性 ,癌组织和癌旁组织双阳性者 ,与肿瘤的扩散有关 .该检测方法简便易行 ,有助于对 p5 3基因突变的扫描检测 .

化学发光酶免疫方法检测克伦特罗残留

建立了间接竞争化学发光酶免疫法(competitiveindirectchemiluminescentenzymeimmunoassy,icCLEIA)检测猪尿中残留克伦特罗(clenbuterol,CLB)的方法,并优化了竞争反应时间,Tween20含量,PBS离子强度与pH4个参数。优化后的icCLEIA检出限可达0.01μg/L,检测范围为0.04～25.8μg/L,ED50为0.54μg/L;尿样检测的平均回收率为98%～120%,批内与批间相对标准偏差(variationofcoefficent,CV)均小于10%。这些参数均优于目前广泛使用的ELISA方法,说明本CLEIA方法可替代ELISA法,用于实际尿样的检测。

氯霉素-BSA和氯霉素-OVA偶联物的制备与鉴定

目的:制备氯霉素(CAP)-牛血清白蛋白(BSA)及氯霉素(CAP)-卵清白蛋白(OVA)的偶联物并进行鉴定。方法:分别采用混合酸酐法和重氮化法制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,前者是将CAP先与琥珀酸酐反应生成CAP-半琥珀酸酯(CAP-HS),再进行混合酸酐反应。将反应产物CAP-HS与BSA结合,合成CAP-HS-BSA偶联物;后者是将CAP分子中的苯环上的硝基还原为氨基后,进行重氮化处理,然后分别与BSA和OVA连接,合成CAP-BSA和CAP-OVA复合物。结果:紫外图谱分析表明,CAP-BSA、CAP-OVA和CAP-HS-BSA的紫外最大吸收峰分别是262nm、213nm和275nm;计算得CAP与载体蛋白BSA、OVA及HS的偶联比分别为5∶1、12∶1和22∶1。结论:成功的制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,为免疫动物制备抗CAP的抗体奠定了基础。

动物源食品中磺胺二甲嘧啶人工抗原的合成研究

该文以丁二酸酐为间隔臂合成了人工半抗原,利用薄层层析法和高效液相色谱法进行半抗原的鉴定,通过活泼酯法合成了人工抗原,用Bradford法测定蛋白质含量,用紫外分光光度法测定偶联率。分析结果为:通过高效液相色谱法测定半抗原,显示合成成功,用紫外分光光度法测定其与BSA和OVAde偶联率分别为15和4。

食品中残留19-去甲睾酮免疫原的合成与鉴定

19-去甲睾酮(19-nortestosteroneNT),属于半抗原生物小分子,具有免疫反应性,但不具有免疫原性。本文中19-去甲睾酮经羧甲基羟胺肟化,质谱(MS)检验后,采用混合酸酐法将肟化产物与牛血清蛋白(bovineserumalbuminBSA)偶联,紫外分光光度法测定其交联率为24。用此合成产物进行动物体免疫,获得了NT的多克隆抗体。经间接酶联免疫测定,其抗血清的稀释度可以达到1:102400,证明诺龙免疫原的合成成功,为诺龙酶联免疫试剂盒的研究奠定基础。

己烯雌酚免疫原的合成及其抗血清制备

目的: 制备人工合成的己烯雌酚 (DES)的多克隆抗体。方法: 采用碳二亚胺法将DES与牛血清白蛋白 (BSA)交联, 经紫外扫描估算其交联比为 22, SDS- PAGE实验初步表明DES与BSA发生交联。用双向免疫琼脂扩散实验检测经DES -HS- BSA多次免疫新西兰白兔的抗血清。结果: 合成的DES- HS- BSA复合物, 具有免疫原性, 并产生了针对小分子DES的抗体。结论: DES免疫原的合成是成功的, 为其试剂盒的研制提供了条件。

抗β2-受体激动剂盐酸克伦特罗抗体的制备

目的 :制备抗盐酸克伦特罗 (clenbuterol,CL)抗体。方法 :采用重氮化方法 ,将其与牛血清蛋白 (BSA)和卵清蛋白 (OVA)交联 ,分别合成免疫抗原 (CL BSA)和包被抗原 (CL OVA)。结果 :兔抗血清中确证含有针对CL的抗体 ,效价为 1∶32× 10 5竞争ELISA法检测表明 ,CL标准液的浓度为 0 .1μg/L时 ,其阻断率已达 93.4 % ,5 0 %阻断率为 1.2 μg/L。结论

动物源食品中残留克伦特罗检测抗体的制备与应用

采用重氮化法将盐酸克伦特罗 (CL)与牛血清白蛋白 (BSA)交联 ,用紫外扫描和凝胶电泳对交联物鉴定后免疫新西兰纯毛白兔 ,制备抗血清。经鉴定 ,抗血清中含有针对CL的抗体 ,效价为 3.2× 10 5;以此抗体为基础 ,设计了间接酶联免疫法 ,该法的检出限为 0 .0 96ng/mL ,对加于尿液、血液和组织中CL的回收率为 80 %～ 12 0 % ;通过重复性、灵敏度、准确性等指标对该法进行了评估 ,并与高效液相层析 (HPLC)及国外进口试剂盒进行了比较 ,表明该法的各项参数均能满足实际检测的需要。

己烷雌酚人工抗原的合成与分析

采用LichrospherC18柱,以甲醇和水为流动相,流速0.3mL/min,甲醇从60%～100%线性梯度洗脱25min,液质联用,电喷雾(ESI),对己烷雌酚及其衍生物己烷雌酚单(双)丁酸乙酯基醚分别进行了分离和结构鉴定。以混合酸酐法将己烷雌酚单羧基丙基醚(HESMCPE)与载体蛋白偶联,形成完全抗原,并以紫外扫描分析完全抗原的偶联率。经计算,HESMCPEBSA偶联率为36。

丁丙诺啡用于妇科肿瘤手术后病人自控静脉镇痛的临床观察

目的评价丁丙诺啡在妇科肿瘤手术后病人自控静脉镇痛(PCIA)的效果和安全性。方法60例全麻下妇科肿瘤手术患者随机分为丁丙诺啡组和芬太尼组,每组30例,在手术后接受PCIA。术后24h、48h采用视觉模拟评分法(VAS)、Ramsay镇静评分法评估镇痛/镇静效果,并观察不良反应、记录患者对PCIA满意度。结果丁丙诺啡组术后24h、48hVAS评分、Ramsay评分均低于芬太尼组(P<0.05),两组患者满意度和不良反应发生率的差异无显著性(P>0.05)。结论丁丙诺啡在妇科肿瘤手术后PCIA的镇痛/镇静效果优于芬太尼,且使用安全。

高效液相色谱与质谱联用法分离鉴定己烯雌酚合成抗原

采用Lichrospher C-18柱,甲醇和水为流动相,流速0.3 mL/min,甲醇从60%～100%(体积分数)梯度洗脱25 min,液质联用,电喷雾(ESI),对己烯雌酚(DES)及其衍生物己烯雌酚-单(双)-丁酸乙酯基-醚进行了分离和结构鉴定.以混合酸酐法将己烯雌酚-单-羧丙基-醚与载体蛋白偶联形成完全抗原,并以紫外扫描分析了完全抗原的偶联比率.结果表明:在极性溶剂中,己烯雌酚和其衍生物存在着顺反异构转化现象,极性有机溶剂的溶剂化作用促使顺反异构体的转化.计算了DES-MCPE-BSA的偶联比率为10.