急性淋巴细胞性白血病细胞及其骨髓基质细胞粘附分子表达和粘附行为的探讨

分析了５８例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）患者和１０例正常人骨髓单个核细胞及其骨髓基质细胞上粘附分子的表达。发现与正常人相比，白血病细胞上表达的ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８、ＣＤ３４、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｄ和基质细胞上表达的ＣＤ５４，ＣＤ４９ｂ均有显著性改变（明显下降或显著增高）；同时，来自ＡＬＬ的基质细胞在粘附分子表达和粘附行为上亦不同于正常骨髓基质细胞，认为粘附分子的异常表达可能参与了ＡＬＬ的发病机制。

20例急性白血病患者血清可溶性白细胞介素6受体(sIL-6R_(80)KD)含量测定

急性白血病是造血细胞中止在某一分化发育阶段，并呈恶性克隆性增殖的疾病，这种分化障碍和恶性增殖与参与造血细胞分化发育和增殖的细胞因子异常分泌密切相关。已经证实，白细胞介素6(IL-6)参与了许多疾病的病理过程，是许多肿瘤的生长因子。由于可溶性白细胞介素6受体(sIL-6R80kD)可以与IL-6协同作用增强IL-6的生物效应，

八种粘附分子在急性淋巴细胞性白血病异常表达的研究

本文分析了３８名正常人和２５例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）细胞表面ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ５４、ＣＤ４４等的表达。与正常人相比，肿瘤细胞上表达的ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８和ＣＤ５４降低，ＣＤ４４升高；ＣＤ１１ａ在Ｂ－ＡＬＬ和混合型ＡＬＬ表达减弱，在Ｔ－ＡＬＬ增强。３例急性淋巴细胞性白血病骨髓基质细胞表面ＣＤ５４、ＣＤｗ４９ｂ表达亦降低。认为粘附分子可能参与了急性淋巴细胞性白血病的发病机制。

人粒细胞集落刺激因子cDNA的克隆及其在CHO细胞的表达

该文以PKCR6质粒为载体，构建了人体细胞集落刺激因子（hG－CSF）的次级克隆PKCR6－G－CSF，并成功转染CHO细胞，获得高表达、稳定分泌人G－CSF的转基因细胞，为扩大规模基因工程生产重组细胞因子奠定了一定的基础。

IL—4、γIFN及TNF对人骨髓瘤细胞系（U266、XG—7）与血管内皮细胞粘附效应的影响

５１Ｃｒ标记多发性骨髓瘤细胞系的方法，分析它们与血管内皮细胞间的粘附效应和细胞团子（ＩＬ－４、ｒＩＦＮ、ＴＮＦ）对该粘附的调控作用，并探讨这３种因子对正常血管内皮细胞粘附分子表达及可溶性因子分泌的影响．结果表明：（１）ＩＬ－４、ｒＩＦＮ、ＴＮＦ之间的联合应用可显著提高Ｕ２６６ＸＧ—７与血管内皮细胞的粘附能力．（２）ＩＬ—４、ｒＩＦＮ、ＴＮＦ可提高血管内皮细胞表面ＣＤ５４、ＣＤ４４的表达，并不同程度地促进了内皮细胞分泌ＩＬ—６、Ｇ—ＣＳＦ和ＴＮＦ等因子。提示这３种细胞因子可能有助于多发性骨髓瘤细胞的转移扩散．

流式细胞仪三标记法测定正常人功能性TCRV_β基因库水平

采用流式细胞仪的三标记（PE－，FITC－，PECy5－）直接检测技术，利用不同标记的二十一种特异性Vβ单抗，分为7组，构建了简便、快速检测功能性人TCR基因库的试剂盒；同时建立了外周血中该21种vβ的正常值，为临床监测疾病的转归提供手段。

抗人TCRVβ4单克隆抗体的制备及鉴定

本文采用RBL表达系统，克隆并较高地表达了人TCRβ4；同时，以阳性RBL－TCRVβ4细胞作为免疫原，免疫大鼠，获得了世界上第一株稳定分泌人V_β4的杂交瘤细胞株c14．24。该系统为制备Vβ单抗提供了另一可供借鉴的有效途径。

鼠抗人sIL-6R单克隆抗体的制备及sIL-6R检测方法的建立

以重组人ｓＩＬ－６Ｒ蛋白作为抗原，获得３株分泌特异性ＭｃＡｂ的杂交瘤株，分别命名为ＳＩ１０，ＳＩ１１和ＳＩ１２。３株ＭｃＡｂ均属小鼠ＩｇＧ１亚类。竞争抑制试验的结果表明，３株ＭｃＡｂ识别两个不同的抗原表位。将杂交瘤细胞注入同系小鼠腹腔诱生的ＭｃＡｂ腹水，经ｐｒｏｔｅｉｎＧ纯化后用生物素标记，建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ法，该法用于血清ｓＩＬ－６Ｒ的特异性检测，灵敏度为５０μｇ／Ｌ。

一株特殊功能的抗人CD40单克隆抗体的获得及其生物学特性分析

目的：研制功能性抗人ＣＤ４０单克隆抗体，从而探讨其对Ｂ细胞、ＤＣｓ表达的ＣＤ４０分子激发所产生的生物学效应。方法：采用细胞融合、单克隆抗体筛选、荧光标记、免疫印迹和竞争抑制等方法获得鼠抗人ＣＤ４０ｍＡｂ，以细胞增殖、分化抗原表达观察ＣＤ４０ｍＡｂ对Ｂ细胞和ＤＣｓ的作用效应。结果：经表型分析、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定和竟争抑制试验，证实５Ｃ１１是识别人ＣＤ４０分子的特异性单抗；５Ｃ１１与转导ＣＤ３２的Ｌ细胞（ＬＣＤ３２）联合ＩＬ－４能使扁桃体Ｂ细胞扩增并形成集落；５Ｃ１１能介导树突状细胞（ＤＣｓ）的扩增和分化成熟。结论：用５Ｃ１１与ＬＣＤ３２建立的ＣＤ４０培养体系，能使Ｂ细胞长期生存和增殖，为体外研究Ｂ细胞提供有效手段；５Ｃ１１诱导外周单核细胞分化成熟为树突状细胞，这一发现为体外大规模扩增可用于治疗的ＤＣｓ提供了新的手段，因而５Ｃ１１是一株具有特殊功能和重要应用价值的单克隆抗体。

系统性红斑狼疮治疗前后外周血共刺激分子表达的变化和意义

目的探讨共刺激分子表达水平在系统性红斑狼疮(SLE)患者治疗前后的变化及其意义。方法采用免疫荧光标记流式细胞仪检测技术,对SLE患者和正常人外周血单个核细胞膜表面的共刺激分子表达水平进行测定分析。结果①与正常人相比,SLE患者CD28分子表达显著降低(P<0.01),其中双标记CD4+CD28+、CD8+CD28+T细胞均显著减少(P<0.01),4-1BB分子表达显著增高(P<0.01);②患者CD28分子、CD4+CD28+及CD8+CD28+T细胞与SLE病情活动指数(SLEDAI)呈负相关(分别为P<0.01、P<0.01、P<0.05),4-1BB分子与SLEDAI呈正相关(P<0.01);③患者治疗后CD28分子、CD4+CD28+及CD8+CD28+T细胞随病情缓解而上升(P<0.01),4-1BB分子随病情缓解而下降(P<0.01)。结论共刺激分子表达异常在SLE发病机制中可能具有重要作用,其中CD28分子、4-1BB分子、CD4+CD28+及CD8+CD28+T细胞对监测病情活动和判断疗效可能具有重要意义。

白细胞介素11生物学活性检测方法的研究

采用Ｂ９－１１细胞检测正常人血清ＩＬ－１１水平，实验结果表明：①ｒｈＩＬ－１１能刺激Ｂ９－１１细胞，而正常人血清和普通全培养基不能刺激其生长，最后导致细胞死亡。②ｒｈＩＬ－６也能刺激Ｂ９－１１细胞增殖，用抗ＩＬ－６单抗ＢＥ－８能完全中和所加ｒｈＩＬ－６的活性，剩余的ｒｈＩＬ－１１仍然刺激Ｂ９－１１细胞增殖。

36例急性白血病患者血清IL—6、TNF活性分析

应用Ｔｈ－６依赖细胞株Ｂ６细胞增殖试验和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）依赖细胞株Ｌ细胞杀伤试验，分别检测了２０例急性髓性白血病，１６例急性淋巴细胞性白血病及２２例正常人血清ＩＬ—６、ＴＮＩ７水平。实验结果表明；正常人血清ＩＬ—６、ＴＮＦ水平低于５ｋＵ／Ｌ；急性白血病患者血清ＩＬ—６、ＩＮＦ水平显著增加（Ｐ＜０．０１），且与疾病的严重程度密切相关。

IL—6对辐射损伤小鼠WBC、Plt恢复和生存期的影响

ＩＬ—６对辐射损伤小鼠ＷＢＣ、Ｐｌｔ恢复和生存期的影响张雁云，张学光，张毅，郭玲，王江方苏州医学院免疫学研究室曹丽寅△下浙东△冯丽珍△△刘蓓岭，蒋冶棠，朱学东摘要检测ＩＬ—６对受致死性“Ｃｏ一Ｙ射线辐照的小鼠白细胞、血小板恢复的作用，并观察生存期。结...

CD40培养体系的建立及B淋巴细胞的体外培养

采用自行研制成的功能性抗人ＣＤ４０单克隆抗体、转导ＣＤ３２的Ｌ细胞（ＬＣＤ３２）和细胞因子建立体外研究人Ｂ淋巴细胞增殖、生长和分化的ＣＤ４０系统。方法：①流式细胞仪分析ＣＤ４０分子的表达；②在ＣＤ４０激发型单抗（克隆５Ｃ１１）与ＬＣＤ３２共培养中，加入ＩＬ－４及其它细胞因子，组成ＣＤ４０培养系统，观察人扁桃体来源Ｂ细胞的体外生存和增殖等生物学效应。结果：①ＣＤ４０分子表达于人外周血、扁桃体来源的Ｂ细胞及人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞株ＸＧ２和人Ｂ淋巴瘤细胞株Ｄａｕｄｉ；②用ＣＤ４０激发型单抗（克隆５Ｃ１１和２Ｇ１１）与ＬＣＤ３２细胞联合ＩＬ－４能使静止期Ｂ细胞体外长期生存和增殖。表明用激发型ＣＤ４０单抗５Ｃ１１和２Ｇ１１建立的ＣＤ４０培养体系，能使Ｂ细胞长期生存和增殖，为体外研究Ｂ细胞提供了有效的手段。

雷公藤多甙不同剂量对小鼠骨髓造血细胞体外增殖抑制效应的研究

不同剂量的雷公藤多甙（ＴⅡ）对小鼠骨髓造血干细胞（ＨＳＣ）体外增殖作用研究结果表明，ＴⅡ对小鼠ＨＳＣ体外增殖有明显的抑制效应，并与剂量密切相关，５０％的抑制率为０．５ｍｇ／Ｌ，随着ＴⅡ作用时间延长，抑制程度增加，提示临床用药需掌握剂量，长期运用需对机体造血功能进行监测。

肿瘤坏死因子a对辐射损伤小鼠外周血白细胞和骨髓C—kit^+细胞的影响

采用致死性５０Ｃｏ一Ｙ射线辐照的小鼠骨髓型放射损伤模型，测定其外周血白细胞、骨髓单个核细胞，应用流式细胞仪分析骨髓造血干／祖细胞，探讨肿瘤坏死因子ａ（ＴＮＦ。）对骨髓造血功能的辐射防护效应．结果表明：辐射前２４ｈ给予ＴＮＦ。处理组在辐照后第１２天，外周血ＷＢＣ、骨髓单个核细胞数量以及骨髓细胞中Ｃ一ｋｉｔ＋细胞百分率都显著高于未经ＴＮＦ。处理组（Ｐ＜０．０１）。提示ＴＮＦ可以保护机体骨髓造血细胞耐受辐射损伤。

急性白血病患者血清白细胞介素6和可溶性白介素6受体含量测定

采用生物学方法和ＥＬＩＳＡ，分别检测了２０例急性白血病患者和２０名正常人血清中ＩＬ－６和ｓＩＬ－６Ｒ８０ｋＤ水平。正常人血清ＩＬ－６水平低于５ｋＵ／Ｌ，ｓＩＬ－６Ｒ８０ｋＤ平均为５．００±４．６４μｇ／Ｌ。急性白血病患者血清ＩＬ－６、ｓＩＬ－６Ｒ８０ｋＤ水平明显增加（Ｐ＜０．０１），提示ＩＬ－６和ｓＩＬ－６Ｒ８０ｋＤ协同作用可能参与急性白血病的发病机制。

骨髓基质细胞对人多发性骨髓瘤细胞系自分泌白细胞介素6诱导作用的研究

研究了小鼠骨髓基质细胞对诱导人白细胞介素６（ＩＬ－６）依赖性多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞自分泌ＩＬ－６的作用。结果表明：人ＭＭ细胞系ＸＧ－１培养上清（ＳＮ＿１）没有可检测水平ＩＬ－６活性；小鼠骨髓基质细胞系ＭＦ－１培养上清（ＳＮ＿２）仅有低水平ＩＬ－６活性（１００Ｕ／ｍｌ）；ＸＧ－１细胞和ＭＦ－Ｌ细胞／上清共同培养上清（ＳＮ＿３，ＳＮ＿４）均含极高的ＩＬ－６活性（１０５０Ｕ／ｍｌ），并可被ＩＬ－６单抗ＢＥ－８特异性中和，而且不同浓度的ＳＮ＿３，ＳＮ＿４可以促进其他依赖外源性ＩＬ－６的人ＭＭ细胞系（ＸＧ－２，４，６）生长。鉴此证实了小鼠骨髓微环境基质细胞可以诱导ＭＭ细胞自分泌ＩＬ－６，后者可促进ＭＭ细胞生长。

MTT法定量检测白血病细胞株与基质细胞粘附率的方法

粘附率是用于标定相互作用的分子数量及其亲和力大小的定量指标。目前常用于定量检测粘附率的方法主要有同位素标记法、形态学计数法,它们各有优缺点,本文介绍一种简单易行的检测粘附率的方法──MTT法,它具有客观性、非放射性和可以定量等优点。