慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTLs的KIR表达研究

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血中HBV特异性CTL细胞表面杀伤细胞抑制性受体(KIR)的表达情况。方法利用MHC-Ⅰ-肽-五聚体(pentamer)技术结合流式三色分析技术,直接离体情况下检测(directex vivo)慢性乙型肝炎患者不同HBV特异性CTL细胞表面KIR的表达情况。结果在慢性乙型肝炎患者,KIR阳性的CD8+T细胞明显增加;KIR阳性的HBcAg(18-27)特异性CTL、HBeAg(335-343)特异性CTL、HBp(575-583)特异性CTL的百分比分别为12%、20%、35%。结论慢性乙型肝炎患者不同HBV特异性CTL表达KIR,这可能与慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL功能低下密切相关。

慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达研究

目的检测慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达情况。方法利用MHC-Ⅰ-肽五聚体（pentamer）技术结合流式多色分析技术，直接离体情况下（direct ex vivo）检测慢性乙型肝炎患者3个HLA-A2限制性的HBV表位特异性CTL表达CD28的情况。结果在22例HLA-A2^＋患者中，检测出HBcAg（18—27）特异性CTL有13例，频率为0．05％-0．16％；CD28^＋的HBcAg（18—27）特异性CTL的百分比为40％（23％-61％）。检测出HBeAg（335—343）有8例，频率为0.05％-0．24％；CD28%＋的HBeAg（335—343）特异性CTL的百分比为43％（36％-60％）。检测出HBp（575—583）特异性CTL有9例，频率为0．05％-0．19％；CD28^＋的HBpAg（575—583）特异性CTL的百分比为61％（45％-70％）。结论不同HBV抗原表位特异性CTL的CD28表达情况不同。

医学人文教育在血液净化学临床带教中的应用和体会

血液净化中心的工作具有高技术性、高风险性和高职责性的特点,同时它也是医疗事故和医疗纠纷频发的科室。在血液净化学临床带教过程中对医生进行人文教育,从而学会尊重生命、富有同情心和爱心,这不仅促进了医患关系和谐发展,减少医疗纠纷和医疗事故的发生,而且促进了临床医生自身的和谐发展,更好地为患者服务。

40例鼻烟窝部人工动静脉内瘘术的手术效果分析

目的观察40例鼻烟窝部动静脉内瘘术的效果。方法选择腕关节下鼻烟窝部桡动脉和头静脉做为自体动静脉内瘘的吻合血管,采用外科血管缝合法或钛轮钉动静脉内瘘吻合法。结果40例人工内瘘术中,钛轮钉动静脉内瘘吻合6例(15%),外科血管缝合法34例(85%),吻合成功率100%。术后第2天发生内瘘堵塞2例,内瘘成功率95%。结论鼻烟窝动静脉内瘘制作简便,保留了近端血管以备重建内瘘,能满足常规血透的血流量,可以作为维持性血液透析患者的首选的永久性血管通路。

慢性乙型肝炎患者外周血T细胞KIR表达研究

目的:检测慢性乙型肝炎患者外周血T细胞表面KIR的表达情况。方法:采用三色流式细胞术检测慢性乙型肝炎患者外周血CD4+T细胞和CD8highT细胞表面KIR分子表达,并与正常外周血比较。结果:慢性乙型肝炎患者外周血中CD8highT细胞KIR表达明显高于对照组CD8highT细胞。正常外周血CD4+T细胞几乎不表达KIR,慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+T细胞表达KIR。结论:慢性乙型肝炎患者T细胞表面KIR表达明显增加。

双滤过血浆分离清除高敏肾移植受者体内群体反应性抗体的临床疗效观察

目的观察双滤过血浆分离（DFPP）清除高敏肾移植受者体内群体反应性抗体（PRA）的疗效。方法使用Plasauto iQ全自动血液净化仪和EC-20W血浆成分分离器对26例高敏肾移植受者进行双膜滤过治疗，每周2次，共治疗4周，检测治疗前后患者的PRA水平，同时观察患者体内免疫球蛋白和白蛋白变化情况。结果9例患者PRA转阴（〈10％），15例患者PRA降至可接受肾移植范围（〈40％），2例患者PRA水平仍高于40％。DFPP治疗前PRA水平为（61．3±15．2）％，治疗后下降至（22．2±12．7）％，差异有统计学意义（P〈0．05）；治疗后IgG、IgM均显著下降（P均〈0．05），而IgA、白蛋白水平改变不明显。结论DFPP能够有效清除高敏肾移植受者体内的PRA，同时保留自身蛋白质。

汶川大地震导致挤压综合征呈现急性肾损伤的血液净化治疗

2008年5月12日四川汶川发生里氏8．0级地震，造成重大人员伤亡。抗震救灾期间，第三军医大学新桥医院肾内科收治了6例挤压综合征导致的急性肾损伤患者，因治疗及时合理，6例患者肾功能全部恢复。本文就6例患者的血液净化治疗进行总结。

大鼠金属蛋白酶组织抑制物-1反义基因片段TA克隆载体的构建

目的 构建含大鼠金属蛋白酶组织抑制物 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase 1,TIMP 1)反义基因片段TA克隆载体 ,为进一步研究TIMP 1在肾组织纤维化中的作用奠定基础。方法 本实验利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,从提取的大鼠肾组织总RNA中特异地扩增含 313bp的TIMP 1cDNA片段 ,并将其克隆到TA载体。结果 用限制性内切酶鉴定 313bp的TIMP 1cDNA片段插入方向 ,测序结果证实扩增片段为目的片段。结论 成功地构建了含大鼠TIMP

大鼠金属蛋白酶组织抑制物-1反义基因TA载体构建及其在肾小球系膜细胞表达的实验研究

目的 :构建能在真核细胞表达的含大鼠金属蛋白酶组织抑制物 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase 1,TIMP 1)反义基因片段的TA克隆载体 ,并在体外培养的肾小球系膜细胞表达 ,为进一步研究TIMP 1反义基因片段抑制肾组织纤维化的作用奠定基础。 方法 :用RT PCR法扩增大鼠TIMP 1cDNA片段 (313bp) ,并将其反向克隆到真核表达载体pCR 3.1中 ,用脂质体将大鼠TIMP 1反义基因片段导入培养的大鼠肾小球系膜细胞 ,半定量RT PCR法检测系膜细胞TIMP 1表达的变化。 结果 :①用限制性内切酶鉴定TIMP 1cDNA片段插入方向 ,测序结果证实扩增片段为目的片段 ;②导入TIMP 1反义基因后 ,肾小球系膜细胞内TIMP 1表达明显减少。 结论 :①成功地构建了含大鼠TIMP 1反义基因片段的TA克隆载体 ;②该载体能在体外培养的系膜细胞中表达 ;③TIMP 1反义基因片段能有效地阻抑培养的大鼠系膜细胞中TIMP 1的表达。

354例不明原因消化道出血患者的诊断及病因分析

目的评价双气囊电子小肠镜及胶囊内镜对不明原因消化道出血的诊断价值、安全性及耐受性。方法2006年10月至2008年11月,354例患者因黑便或便血就诊。其中152例接受双气囊电子小肠镜检查,202例接受胶囊内镜检查。结果双气囊小肠镜病变检出率为82.24%(125/152),胶囊内镜病变检出率为71.78%(145/202)。双气囊小肠镜组病变检出率显著高于胶囊内镜组(P<0.05)。双气囊小肠镜组病因诊断准确率(85.1%)显著高于胶囊内镜组(31.2%)(P<0.01)。除2例患者未完成胶囊内镜外,其余所有患者均顺利完成检查,未发生并发症,也未出现麻醉并发症或麻醉意外。结论双气囊电子小肠镜和胶囊内镜对不明原因消化道出血有较高诊断价值,是安全、可靠的检查手段,但双气囊小肠镜组的病变检出率及诊断率均显著高于胶囊内镜组。

血液透析联合血液灌流对维持性血液透析患者微炎性因子及钙磷代谢的影响

目的:探讨血液透析联合血液灌流对维持性血液透析患者微炎性因子及钙磷代谢的影响。方法:选取在本院接受维持性血液透析治疗的患者共116例,将其随机分为观察组和对照组,各58例。其中对照组采取血液透析治疗,观察组采取血液透析与血液灌流联合治疗。观察并比较两组治疗前后炎性因子水平变化及钙磷代谢改善情况。结果:观察组治疗后白介素-6(IL-6)、超敏C-反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血磷、成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)、全段甲状旁腺素(iPTH)水平与对照组比较明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);而血红蛋白(HB)、血清白蛋白(Alb)及血钙、血清1,25-(OH)2D3水平与对照组比较明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:血液透析联合血液灌流对维持性血液透析患者具有更好的临床疗效,可以有效地改善患者的微炎症状态,维持其钙磷代谢平衡,进而提高患者的生活质量和生存率,值得大力推广和应用。

PAI-1和TIMP-1基因在肾小管间质纤维化中的表达及HGF的干预作用

目的研究纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)和组织基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因表达与梗阻性肾病小管间质纤维化(TIF)进展的关系及肝细胞生长因子(HGF)的干预作用。方法60只Wistar大鼠随机分为4组正常大鼠组、假手术组、单侧输尿管梗阻组和HGF治疗组,分别于模型3d、7d、14d、21d处死大鼠。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测PAI-1和TIMP-1mRNA表达水平;底物酶谱法检测肾脏MMP2、9活性的变化,测定肾组织羟脯氨酸含量判断纤维化程度。结果梗阻肾组织PAI-1和TIMP-1mRNA表达显著高于对照组,并伴有明显的梗阻肾MMP2,MMP9活性低于和羟脯氨酸含量高于对照组,而21dHGF治疗组PAI-1和TIMP-1mRNA表达明显下调,MMP2,MMP9活性高于和肾组织羟脯氨酸含量少于对照组。结论PAI-1、TIMP-1mRNA表达增高是小管间质ECM降解减少的主要原因之一,也是造成TIF加重的重要因素,而HGF可拮抗这一进程,减轻小管间质纤维化。

双气囊电子小肠镜对不明原因消化道出血的诊断价值

目的评价双气囊电子小肠镜对不明原因消化道出血的诊断价值和安全性及耐受性。方法2006年10月至2007年9月,在异丙酚静脉麻醉辅助下,对76例不明原因消化道出血患者施行双气囊电子小肠镜检查。结果76例患者中发现病变63例,病变检出率为82.9%。包括单发或多发性小肠溃疡17例,非特异性炎症9例,钩虫病7例,息肉病6例,血管畸形6例,憩室病4例(其中美克尔憩室3例),克罗恩病4例,间质瘤4例,高分化腺癌3例,十二指肠溃疡2例,蛔虫1例,未见明显异常13例。所有患者均顺利完成检查,未发生出血、穿孔等严重并发症,也未出现麻醉并发症或麻醉意外。结论双气囊电子小肠镜对不明原因消化道出血具有较高病变检出率和病因诊断准确率,是一种安全、可靠的检查手段。

Smad7基因转染拮抗TGF-β_1对培养肾小管细胞的影响

目的 探讨Smad7基因转染对TGF β1 诱导的小管细胞生长阻滞 ,细胞凋亡和FN分泌的影响。方法 采用Tfx 5 0脂质体将小鼠Smad7转染入原代培养的肾小管细胞 ,用MTT法观测小管细胞的增殖、流式细胞仪观测其细胞周期的变化 ;ELISA法测定小管细胞FN的分泌。结果 培养基添加TGF β1 ( 10ng ml) 48h后 ,小管细胞增殖能力明显下降 ,停滞于G1 期的细胞数增多 ,细胞分泌的FN量也明显增高 ,相反 ,Smad7基因转染后可明显拮抗TGF β1 对小管细胞的上述作用。结论 Smad7基因转染可明显拮抗TGF β1 对小管细胞的影响 。

SR-A受体参与抑制LPS刺激RAW264.7产生炎症因子

目的探讨清道夫受体A能否抑制LPS刺激RAW 264.7产生炎症因子。方法LPS诱导小鼠巨噬细胞株RAW 264.7 SR-A受体上调后,用LPS再次刺激,观察SR-A受体的上调能否抑制RAW 264.7对LPS的反应,最后采用遗传互补实验观察转染SR-A受体后能否抑制LPS活化NFκ-B。结果LPS刺激SR-A受体已上调的RAW 264.7产生的炎症因子明显下降,而遗传互补实验证实SR-A受体确实能抑制LPS通过TLR4活化NFκ-B。结论SR-A受体参与负调控LPS对RAW 264.7的活化,防止过强的炎症反应。

IFN-γ上调的单核细胞表面MHC-I类链相关分子促进NK细胞活化

目的:研究IFN-γ诱导上调表达的单核细胞MHC-I类链相关分子(MICs)分子对NK细胞的活化作用。方法:采用密度梯离离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC),以免疫磁珠法从PBMC中特异性分选单核细胞及NK细胞,以细胞因子IFN-γ、TNF-α刺激单核细胞后,再将单核细胞与NK细胞共培养,以流式细胞术(FCM)检测NK细胞表面CD69分子及胞内IFN-γ表达,以51Cr释放试验检测NK细胞对K562细胞的杀伤效应。结果:IFN-γ上调人单核细胞表面MICs表达;IFN-γ刺激的单核细胞能促进异体NK细胞CD69及胞内IFN-γ表达,能增强NK细胞对K562细胞的杀伤效应;单核细胞的这种效应至少部分依赖于IFN-γ上调的MICs分子,因为用抗MIC抗体封闭或用细胞小室阻断细胞接触,可以明显地抑制NK细胞的活化。结论:IFN-γ上调人单核细胞表面MICs分子介导了NK细胞的活化。

巨噬细胞特异表达共刺激分子VSIG4对实验性肾间质纤维化的影响

目的:探讨巨噬细胞特异表达共刺激分子VSIG4与实验性小鼠肾间质纤维化的关系。方法:SPF级雄性C57B6(VSIG4-/-及VSIG4+/+)小鼠共40只,其中VSIG4-/-肾小管间质性肾炎模型组(n=20)和VSIG4+/+肾小管间质性肾炎模型组(n=20),两个模型组下分别设术前7d及单侧输尿管梗阻后3d、7d、14d4个时相点,每个时相点各5只。模型组行左输尿管结扎。采用自动生化分析仪检测小鼠血肌酐、尿素氮水平。于术前7d、术后第3、7、14天观察肾小管损害及肾间质炎性细胞浸润程度,免疫组化技术观察病变肾组织TGF-β1和MMP-2的表达。结果:①血肌酐及尿素氮水平在两个模型组间无统计学意义。②与VSIG4+/+肾小管间质性肾炎模型组相比,VSIG4-/-肾小管间质性肾炎模型组肾间质炎性细胞浸润和肾小管损害程度明显加重(P<0.05),肾组织TGF-β1表达明显升高(P<0.05),MMP-2表达显著降低(P<0.01)。结论:VSIG4-/-的小鼠肾间质炎性细胞浸润、肾小管损害加重,病变肾组织TGF-β1的表达上升和MMP-2的表达下调。提示VSIG4在抑制肾小管间质损伤的病理进程中发挥作用。