中医医联体领域热点问题研究——基于知识图谱的可视化分析

揭示我国中医医联体领域的研究热点,为中医医联体建设的可持续发展提供建议。采用文献计量学、共词和聚类分析法,对中医医联体领域相关研究进行可视化分析。当前中医医联体领域研究热点主要有分级诊疗、双向转诊、互联网远程医疗、医疗资源整合、健康扶贫、效果评价。通过可视化分析发现在作者、机构合作网络、机制建设、效果评价方面还存在不足,后期应加强进一步研究。

高效液相色谱法测定抗病毒颗粒中连翘苷的含量

目的建立测定抗病毒颗粒中连翘苷的高效液相色谱法。方法色谱柱:Dikma Diamon-silTM(钻石),C18(5μm,250mm×4.6mm);流动相:乙腈:水(35∶65);紫外检测波长:250nm;流速:1.0ml/min;柱温:30℃。结果回归方程线性关系良好,回归方程为:y=649114x-27207,R2=0.9997,n=6,线性范围为:0.984～5.904μg,最低检出量为8.6μg。加样回收率为97.8%,其RSD为0.84%。结论该方法适用于测定抗病毒颗粒中连翘苷的含量,结果准确、可靠、重现性好,能有效地控制抗病毒颗粒的质量。

46例原发性女性生殖道恶性黑色素瘤的预后分析及PD-1单抗疗效初步评估

目的:分析生殖道恶性黑色素瘤患者的预后相关因素及PD-1单抗疗效评估。方法:回顾分析2005年10月~2022年7月云南省肿瘤医院收治的46例女性生殖道恶性黑色素瘤患者的临床特征及生存状况。结果:外阴黑色素瘤的5年生存率为57.1%,Ⅰ期、Ⅱ期患者的总生存期(OS)明显长于Ⅲ/Ⅳ期(78.5个月、未达到vs 15.0个月,P=0.003),术后使用辅助治疗的中位无复发生存时间(RFS)显著长于未辅助治疗组(50.9个月vs 5.3个月,P=0.003);阴道宫颈黑色素瘤的3年生存率为38.9%,阴道黑色素瘤局切组中位RFS及OS均低于根治组(RFS:4.5个月vs 11.0个月,P=0.073;OS:23.6个月vs 29.5个月,P=0.695);晚期女性生殖道黑色素瘤免疫治疗组中位RFS较未免疫治疗组延长(8.2个月vs 3.5个月,P=0.063),免疫治疗组中位OS未达到,未免疫治疗组中位OS为8.5个月,差异无统计学意义(P=0.320)。结论:外阴黑色素瘤预后最好,分期越晚,预后越差;Ⅰ、Ⅱ期外阴黑色素瘤术后加用辅助治疗可延长患者的无瘤生存期;肿瘤局限于阴道壁的阴道黑色素瘤,根治性手术治疗较局部肿瘤切除治疗获益更大;晚期女性生殖道黑色素瘤免疫治疗相较于其他治疗获益更大。

高血压病患者循环内皮微颗粒水平与动脉弹性功能关系的研究

目的:研究高血压病患者循环内皮微颗粒水平和动脉弹性功能的关系。方法:采用流式细胞仪技术测定高血压病患者(n=60,高血压组)和健康志愿者(n=32,对照组)血浆中CD31+/CD42-内皮微颗粒的水平,袖带震荡技术无创检测肱动脉与胫后动脉之间的肱踝脉搏波传导速度,评估二者之间的相关性。结果:与对照组相比,高血压患者循环内皮微颗粒水平显著升高[(972.6±116.2)比(1920.3±152.0)个/μl,P<0.001];高血压组患者肱踝脉搏波传导速度增快[(1369.3±147.3)比(1793.0±328.3)cm/s,P<0.001]。循环内皮微颗粒水平与肱踝脉搏波传导速度呈正相关(r=0.42,P<0.001),以肱踝脉搏波传导速度为因变量的多因素回归分析显示,循环内皮微颗粒水平是其独立影响因素。结论:高血压病患者循环内皮微颗粒水平升高且肱踝脉搏波传导速度加快,循环内皮微颗粒是肱踝脉搏波传导速度的独立影响因素,提示高血压病患者体内较高水平的循环内皮微颗粒加速了大动脉弹性功能减退。

高血压患者循环内皮细胞微颗粒水平的变化

目的研究高血压患者内皮细胞微颗粒水平的变化及其与血压的关系。方法采用流式细胞术检测26例高血压患者(高血压组)和30例健康志愿者(健康对照组)血浆中CD31+/CD42-内皮细胞微颗粒的水平,并比较其与血压的关系。结果与健康对照组比较,高血压组患者血浆中内皮细胞微颗粒水平明显增高[(1 900.7±226.4)个/μlvs(944.9±124.5)个/μl,P<0.001]。内皮细胞微颗粒水平与收缩压和脉压呈正相关(r=0.38,P=0.004;r=0.42,P=0.001)。结论高血压患者内皮细胞微颗粒水平增高,内皮细胞微颗粒水平与血压呈正相关。

小径聚氨酯人工血管内皮化种子细胞的体外诱导分化及种植

【目的】探讨体外诱导骨髓单个核细胞分化成为内皮祖细胞,为小径聚氨酯人工血管内皮化提供合适的种子细胞的可行性。【方法】收集健康成人骨髓单个核细胞,置于纤维连接蛋白预衬的DMEM培养基中,用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic- fibroblast growth factor,bFGF)加以诱导,通过荧光显微镜和免疫组化分析等方法观察和鉴定诱导后的细胞。将诱导分化的内皮祖细胞种植到聚氨酯小径人工血管表面,用扫描电镜观察。【结果】在VEGF、bFGF等诱导因子存在的条件下,骨髓单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典形的“纺锤样”梭形细胞,单层细胞贴壁生长融合时呈铺路石样排列,免疫组化示VWF和CD34抗体染色阳性。扫描电镜下,未种植细胞的聚氨酯小径人工血管表面呈典型的多孔蜂窝状结构,孔径大小比较适合内皮祖细胞爬行。种植细胞后,聚氨酯小径人工血管表面有大量的内皮祖细胞黏附、爬行及铺展生长,有时可见内皮祖细胞长入蜂窝状孔径内。【结论】体外诱导骨髓单个核细胞分化为内皮祖细胞可作为小径聚氨酯人工血管内皮化的种子细胞。

糖尿病患者动脉弹性功能的变化与监测

目的研究糖尿病患者动脉弹性功能的变化,探讨对糖尿病引起早期血管顺应性的改变作定量分析的方法。方法采用动脉弹性功能检测仪测定糖尿病组(30例)及正常对照组(30名)的大动脉弹性指数即容量顺应性(capacitivecompliance),又称C1,和小动脉弹性指数即振荡顺应性(oscillatorycompliance),又称C2。结果糖尿病组的C1[(103±12)mL/mmHg×10]与对照组C1[(114±17)mL/mmHg×10]比较差异无统计学意义(P>005);而C2[(31±05mL/mmHg)×100]较对照组C2[(77±16)mL/mmHg×100]明显降低,两组比较差异有统计学意义,P<005。结论糖尿病患者小动脉弹性明显降低。应用动脉弹性功能检测仪可对其进行监测。

切应力对内皮祖细胞t-PA基因表达和小径人工血管移植通畅率的影响

【目的】研究切应力对内皮祖细胞组织纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,t-PA)基因表达和种植内皮祖细胞小径聚氨酯人工血管移植通畅率的影响。【方法】诱导健康成人外周血的单个核细胞分化成为内皮祖细胞。种植内皮祖细胞到小径人工血管表面后,分为静态组、低切应力组(5dyn/cm2)、中切应力组(15dyn/cm2)和高切应力组(25dyn/cm2)4种不同处理组,用酶联免疫吸附法测定不同时间点培养液中t-PA的水平,并用荧光定量RT-PCR分析内皮祖细胞t-PA的基因表达。19只家犬随机分为2组,实验组10只用中切应力处理后内皮祖细胞种植的小径聚氨酯人工血管移植犬颈总动脉,对照组9只用未经切应力处理内皮祖细胞种植的人工血管移植。移植术后2个月,比较2组小径人工血管的移植通畅率。【结果】外周血单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典形的"纺锤样"梭形细胞,ac-LDL吞噬及lectin抗体荧光标记双阳性,FLK-1和VWF免疫荧光抗体染色均为阳性。流体切应力增加内皮祖细胞t-PA的产生,并上调内皮祖细胞t-PA的基因表达。行移植术后2个月,实验组10只人工血管均获通畅,对照组通畅率为55.6%。【结论】切应力处理可上调内皮祖细胞t-PA的基因表达,并改善内皮祖细胞种植后小径人工血管的移植通畅率,这为解决临床小径人工血管通畅率低提供了新的策略。

冠心病患者动脉弹性与血管舒张功能受损的关系

目的探讨冠心病患者动脉弹性和内皮与非内皮依赖性血管舒张功能的关系。方法采用高分辨率血管超声法检测30例冠心病患者(冠心病组)与健康体检非冠心病者30例(对照组)肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能及硝酸甘油介导的非内皮依赖性血管舒张功能;动脉弹性功能检测仪测定受试者的大动脉弹性指数(C1)和小动脉弹性指数(C2)。结果冠心病组与对照组的C1差异无显著性意义,但冠心病组的C2明显低于对照组,冠心病组内皮依赖性血管舒张功能与非内皮依赖性血管舒张功能均明显低于对照组;冠心病组C2不仅与内皮依赖性血管舒张功能呈正相关,且同非内皮依赖性血管舒张功能呈正相关。结论冠心病组C2降低,C2降低不仅同血管内皮功能的受损相关,而且也受非内皮因素的影响,提示C2反映总体血管舒张功能受损的程度。

内皮祖细胞移植修复大鼠颈总动脉内皮损伤

【目的】探讨内皮祖细胞修复动脉内皮损伤的作用。【方法】建立大鼠颈总动脉内皮损伤模型,16只大鼠随机等分为内皮祖细胞移植组和对照组。体外诱导大鼠外周血单个核细胞为内皮祖细胞。在动脉损伤后,将5-溴脱氧尿苷标记的内皮祖细胞注入损伤动脉段,14d后取损伤动脉段和对侧正常动脉段。采用病理学方法、免疫组织化学和图像分析技术评价内皮祖细胞的修复效果。【结果】内皮祖细胞移植组的损伤动脉段5-溴脱氧尿苷免疫组化为阳性。内皮祖细胞移植组损伤动脉段的新生内膜厚度较对照组明显减轻(43.5±5.5)μmvs(90.7±12.7)μm,P<0.05;内皮祖细胞移植组的再内皮化程度明显高于对照组77.8%±0.1%vs52.2%±0.1%,P<0.05。【结论】内皮祖细胞具有修复动脉内皮细胞损伤的作用,内皮祖细胞可作为心血管疾病细胞移植疗法的种子细胞。

外周血内皮祖细胞种植小径聚氨酯人工血管及流体切应力处理的实验研究

本研究收集健康成人骨髓单个核细胞,用血管内皮生长因子等加以诱导分化,通过荧光显微镜和荧光免疫标记等方法观察和鉴定诱导后的细胞。之后将诱导分化的内皮祖细胞种植到聚氨酯小径人工血管表面,予以15 dyn／cm2的流体切应力处理,并用扫描电镜观察。结果发现外周血单个核细胞诱导分化成为内皮祖细胞,ac- LDL及lectin抗体荧光标记阳性。扫描电镜下,未种植细胞的聚氨酯小径人工血管表面孔径大小比较适合内皮祖细胞爬行;静态种植细胞后,人工血管表面内皮祖细胞排列不整齐;切应力条件下种植细胞后,人工血管表面内皮祖细胞排列较为整齐。因此,在体外能将外周血单个核细胞诱导分化成为内皮祖细胞,内皮祖细胞是小径人工血管内皮化的理想种子细胞。流体切应力对小径聚氨酯人工血管表面内皮祖细胞的生长排列有着良好的机械塑形作用。

流体切应力与内皮祖细胞铜锌超氧化物歧化酶基因表达及活性

背景:流体切应力是调控内皮祖细胞的重要非药理学手段,但目前其对内皮祖细胞抗氧化功能的作用尚不清楚。目的:观察不同切应力对内皮祖细胞铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-superoxide dismutase,Cu/Zn-SOD)基因表达和活性的影响,以探讨流体切应力对内皮祖细胞抗氧化功能的调节作用。方法:健康成人外周血的单个核细胞诱导分化为内皮祖细胞,分为静态组、低切应力组、中切应力组和高切应力组4组进行观察。结果与结论:外周血单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典形的"纺锤样"梭形细胞,ac-LDL吞噬及lectin抗体荧光标记双阳性,FLK-1和VWF免疫荧光抗体染色均为阳性。各切应力组内皮祖细胞CuZn-SOD活性均高于静态组,并且切应力越大,内皮祖细胞Cu/Zn-SOD分泌水平越高。荧光定量RT-PCR表明,切应力处理能上调内皮祖细胞CuZn-SOD mRNA表达,并且切应力水平越高,CuZn-SOD mRNA表达越强。说明切应力能上调内皮祖细胞Cu/Zn-SOD基因表达,增强内皮祖细胞Cu/Zn-SOD活性,提高内皮祖细胞的抗氧化活性。因此,在生理范围内增加体外切应力,能上调内皮祖细胞的功能活性。

急性运动后健康人循环内皮祖细胞的动态变化及其与NO水平的关系

【目的】探讨急性运动后健康成人循环内皮祖细胞(EPC)数量和功能的动态变化及其与一氧化氮(NO)水平的关系。【方法】选择8例男性健康志愿者,动态观察急性运动前以及运动后30min、3h、6h、12h和24h循环内皮祖细胞数量和功能,同时检测运动前后血浆NO水平的变化。【结果】急性运动后30min,健康志愿者循环内皮祖细胞的数量和功能上升至最高峰,运动后3h已开始逐渐下降,运动后24h回落至正常水平,这种变化与血浆NO水平的动态变化趋势基本相似。血浆NO水平与循环内皮祖细胞数量和功能呈直线相关回归关系。【结论】急性运动上调健康成人循环内皮祖细胞数量和功能的维持时间较为短暂,可能与血浆NO水平的下降有关。提示需要长期运动锻炼以维持对健康成人循环内皮祖细胞数量和功能的上调作用。

运动条件下健康人循环内皮祖细胞的数量和功能

背景:运动条件对内皮祖细胞数量和功能是否会产生的影响目前尚无公识。目的:观察急性运动对健康成人循环内皮祖细胞数量和功能的影响。方法:健康男性成人志愿者12例参加急性平板运动锻炼(9.3±2.1)min。用流式细胞仪测定运动前后CD34和KDR双标阳性循环内皮祖细胞水平,ac-LDL及lectin荧光标记方法评估体外培养内皮祖细数量,检测内皮祖细胞的黏附、迁移和增殖能力,并测定运动前后血浆和内皮祖细胞分泌一氧化氮、血管内皮生长因子和粒-巨噬细胞集落刺激因子水平变化。结果与结论:流式细胞仪检测显示健康志愿者运动后循环内皮祖细胞水平较运动前增加(P<0.05)。荧光标记法证实运动后ac-LDL及lectin抗体双阳性内皮祖细胞数量较运动前增加(P<0.05),内皮祖细胞迁移和增殖能力明显增强(P<0.05),但黏附能力无明显变化。急性运动能明显增加健康志愿者的血浆一氧化氮水平(P<0.05),健康志愿者运动前后血浆一氧化氮水平和循环内皮祖细胞数量及功能的增加倍数呈明显的直线相关回归关系(P<0.05)。结果证实,运动可明显增加健康成人循环内皮祖细胞的数量和功能,其机制与其诱导一氧化氮释放增多有关。

内皮祖细胞种植对小径聚氨酯人工血管移植通畅率影响的研究

目的研究种植内皮祖细胞对小径聚氨酯人工血管移植通畅率的影响,探讨改善小径人工血管通畅率的新策略。方法诱导健康成人外周血的单个核细胞分化成内皮祖细胞。种植内皮祖细胞到小径聚氨酯人工血管表面后,用酶联免疫吸附法测定其分泌组织纤溶酶原激活物(t-PA)和一氧化氮(NO)水平。13只家犬随机分为两组,将实验组6只种植内皮祖细胞的小径聚氨酯人工血管和对照组7只未种植细胞的人工血管分别移植犬颈总动脉。移植2个月后,观察两组移植人工血管的通畅率。结果种植到人工血管表面的内皮祖细胞能持续分泌t-PA和NO等抗血栓物质。行置换术后2个月,实验组人工血管通畅率高于对照组,扫描电镜见实验组人工血管腔内形成完整融合的内皮细胞单层。结论内皮祖细胞种植能加快人工血管内皮化和增强其抗血栓能力,有效改善小径人工血管的在体移植通畅率。

超高效液相色谱法测定大豆异黄酮胶囊中异黄酮的含量

目的建立同时测定大豆异黄酮胶囊中6种异黄酮含量的超高效液相色谱法(HPLC)。方法采用AcquityUPLCTMBEHC18柱(1.7μm,2.1mm×50mm),流动相为甲醇-0.05mol/L乙酸胺(pH4.6),梯度洗脱,检测波长为260nm,流速为0.4ml/min,柱温为40℃,外标法测定。结果大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素和染料木素分别在0.02600～0.2600mg/ml、0.02625～0.2625mg/ml、0.02675～0.2675mg/ml、0.012650～0.12650mg/ml、0.012525～0.12525mg/ml、0.012750～0.12750mg/ml范围内线性关系良好(r≥0.9930),加样回收率(6例)分别为:98.5%、98.8%、98.2%、97.7%、98.0%、97.3%。结论本法快速、简便、准确、灵敏度高、成本低,适用于大豆异黄酮胶囊中异黄酮的含量测定及质量控制。

高效液相色谱法研究胆汁中美罗培南的药物浓度分布规律

目的:本文研究美罗培南在家兔胆汁中药物浓度-时间分布规律,为预防和治疗胆道感染用药提供参考和依据。方法:家兔麻醉后行胆囊造瘘术,留取空白胆汁,静脉注射美罗培南后分别在不同时间点采集胆汁标本。取空白胆汁加美罗培南对照品和流动相配成0.5～500.0μg/ml不同浓度的系列胆汁样品。采用外标法行药物色谱峰面积定量,以色谱峰面积对胆汁样品药物浓度进行线性回归分析。注射美罗培南后的家兔胆汁样品经预处理后用高效液相色谱仪测定峰面积,按标准曲线回归方程计算得出胆汁药物浓度,从而了解美罗培南的胆汁药物浓度-时间分布情况。结果:采用色谱条件下的流动相测定药物浓度,胆汁杂质峰、美罗培南药物色谱峰分离效果良好(r=0.9885)。家兔静脉注射美罗培南在胆汁中浓度远远超过其对革兰阴性杆菌的最小抑菌浓度(MIC),之后美罗培南的胆汁药物浓度随时间而迅速降低。用药后3h胆汁中的药物均被完全消除。结论:美罗培南在胆汁中能达到较高的有效杀菌浓度,可作为预防和治疗胆道感染的较佳的药物。由于消除速度较快,临床用药应缩短间隔时间。

适度培养大班幼儿数学逻辑思维能力

随着教育事业的不断发展,现今的幼儿教育及其重要性已经被人们越来越关注。幼儿时期的教育对一个人在个性、思想和价值观等方面的形成具有极大的影响,尤其是对幼儿的逻辑思维能力特别是数学逻辑思维的启蒙、后续发展等等都具有一定的基础性作用。本文就如何培养大班幼儿的数学逻辑思维能力提出几项做法。

流体剪应力调节内皮化小径聚氨酯人工血管抗血栓特性的体外研究

研究不同流体剪应力条件下,内皮化小径聚氨酯人工血管分泌一氧化氮(Nitrogen monoxide,NO)和前列环素(Prostaglandin I2,PGI2)水平的变化,从而为剪应力处理调节内皮化小径聚氨酯人工血管抗血栓特性提供实验依据。分离健康成人外周血的单个核细胞并诱导分化成内皮祖细胞,通过相差显微镜和免疫荧光标记等方法对诱导分化后的细胞进行形态学观察和鉴定。种植内皮祖细胞到小径聚氨酯人工血管表面后,将内皮化小径聚氨酯人工血管分为静态组、低剪应力组(5dynes/cm2)、中剪应力组(15dynes/cm2)和高剪应力组(25dynes/cm2)4个不同处理组,之后用硝酸还原酶法和酶联免疫吸附法测定不同时间点培养液中NO和6-keto-PGF1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-PGF1α)的水平。外周血单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光显微镜下呈典型的"纺锤样"梭形细胞,ac-LDL吞噬及lectin抗体荧光标记双阳性,FLK-1和vWF免疫荧光抗体染色均为阳性。流体剪应力增加种植人工血管表面内皮祖细胞NO和6-keto-PGF1α的产生,并且这种作用与剪应力大小呈正相关。因此,提高流体剪应力明显促进内皮祖细胞NO和PGI2等抗血栓物质的分泌,提示流体剪应力可改善内皮化小径聚氨酯人工血管抗血栓特性。

健康人外周血单个核细胞体外诱导分化内皮祖细胞

【目的】将外周血单个核细胞诱导分化为内皮祖细胞,为冠心病缺血心肌血管新生提供理想的种子细胞来源。【方法】收集健康成人外周血,通过 Ficoll 离心法获得外周血单个核细胞,置于纤维连接蛋白预衬的 EGM-2培养基中加以诱导,并通过相差显微镜和免疫荧光标记等方法对诱导分化后的细胞进行形态学观察和鉴定。【结果】在上述诱导分化条件下,外周血单个核细胞分化成为内皮祖细胞,倒置荧光微镜下呈典形的"纺锤样"梭形细胞,ac-LDL 吞噬及 lectin 抗体荧光标记双阳性,FLK-1和 VWF 免疫荧光抗体染色均为阳性。【结论】成人外周血单个核细胞在特定培养条件下可诱导分化成为内皮祖细胞,内皮祖细胞可作为冠心病缺血心肌血管新生的种子细胞。