弓形虫感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及机制研究

为探究弓形虫RH株速殖子体外感染对小鼠睾丸间质细胞睾酮分泌的影响,构建了弓形虫与小鼠睾丸间质细胞共培养试验模型。将纯化后的弓形虫虫体与细胞按照0∶1、1∶5、1∶1、5∶1、10∶1、20∶1的比例共培养6 h,筛选最佳的弓形虫和细胞共培养比例。在弓形虫与细胞比例为20∶1条件下,共培养3 h、6 h、9 h和12 h,筛选最佳共培养时间。同时,使用瑞氏-吉姆萨染色液对细胞进行染色,观察共培养情况下细胞状态。培养结束,ELISA检测细胞上清的睾酮浓度,Western blot检测细胞内睾酮分泌相关蛋白StAR、CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的表达水平。结果表明,弓形虫与细胞共培养6 h,当弓形虫与细胞比例高于5∶1时,睾酮分泌量显著增加(P<0.05)。弓形虫与细胞比例为20∶1时,睾酮分泌量随培养时间的延长而增加,且感染组明显高于对照组(P<0.05)。染色结果发现,弓形虫1 h内即可进入MLTC-1细胞,12 h细胞内出现大量空泡,60 h左右细胞大量破裂。Western blot结果显示,共培养12 h时,感染组CYP11A1、3β-HSD和CYP17A1的蛋白表达量较对照组显著降低(P<0.05)。说明弓形虫可在短时间内进入MLTC-1细胞并通过影响类固醇激素合成酶的表达来刺激睾酮的分泌,但随着时间的延长,弓形虫会抑制相关酶的表达,抑制细胞的正常功能。

一例鸡尾鹦鹉鸟肠球菌感染的临床报道

为探究临床具有神经症状的宠物鸡尾鹦鹉(Nymphicus hollandicus)的死因,对1只死亡鸡尾鹦鹉的心、肝、脾和肾等脏器进行病原菌分离纯化、革兰氏染色和生化鉴定,采用PCR方法对16S rRNA进行分子生物学鉴定,并对分离致病细菌进行体外药敏试验,采用RT-PCR方法检测NDV、IBV和CIAV。结果显示:分离细菌光镜下形态均为革兰氏阳性球菌,能够发酵乳糖和麦芽糖等糖类;根据16S rRNA同源性比对,该菌与鸟肠球菌(Enerococcus avium)菌株MT_604783.1的同源性达到99.8%,可确定分离菌株为鸟肠球菌;分离菌株对哌拉西林(PRL)和米诺环素(MIN)2种抗生素中度敏感,对其余18种抗生素存在不同程度的耐药;3种病毒检测结果均为阴性;动物回归试验结果显示分离菌株对雏鸡具有弱致病性,能够导致肺和心等多脏器出血病变。鸟肠球菌感染是本例鹦鹉发病死亡的重要原因。