血小板糖蛋白特异性抗体在骨髓增生异常综合征患者中的表达及其意义

本研究探讨血小板糖蛋白特异性抗体在骨髓增生异常综合征(MDS)患者发病中的作用。采用改良的MAIPA法检测血浆血小板糖蛋白特异性抗体(抗GPⅡb/Ⅲa抗体和抗GPⅠb/Ⅸ抗体)。若患者的OD值大于正常OD值的均数+3倍标准差则为阳性。结果表明:MDS组总阳性率为16.67%(5/30),ITP组总阳性率为46.67%(14/30),两者之间差异有显著性(P<0.05)。结论:部分MDS患者的糖蛋白特异性抗体为阳性,这表明部分MDS患者的血小板减少与免疫因素有关;血小板糖蛋白特异性抗体所致的血小板破坏在MDS患者的血小板减少中可能具有一定作用,这为MDS患者的免疫抑制剂治疗提供了新的依据。

血小板糖蛋白特异性抗体在AA患者中的表达及其意义

目的探讨血小板糖蛋白特异性抗体在再生障碍性贫血(AA)患者发病中的作用。方法采用改良的MAIPA法,检测血浆血小板糖蛋白特异性抗体(抗GPⅡb/Ⅲa抗体和抗GPIb/IX抗体)。若患者的OD值大于正常OD值的均数+3倍标准差则为阳性。结果AA组总阳性率为20.00%(6/30),特发性血小板减少性紫癜(ITP)组总阳性率为46.67%(14/30),正常对照组阳性率为0。总阳性率的比较:AA组与ITP组,P<0.05,两者之间有显著性差异。结论部分AA患者的糖蛋白特异性抗体为阳性,这表明部分AA患者的血小板减少与免疫因素有关,血小板糖蛋白特异性抗体所致的血小板破坏在AA患者的血小板减少中可能具有一定作用,这为AA的免疫抑制剂治疗提供了新的依据。

IL-18基因修饰对肺癌细胞来源exosome诱导杀伤肿瘤细胞作用的影响

目的:研究细胞介素18(IL-18)基因修饰对肺癌细胞来源exosome诱导杀伤肿瘤细胞作用的影响,以探讨高效exosome疫苗的制备。方法:提取IL-18基因修饰的NCI-H460细胞(IL-18/H460)、pcDNA3.1+载体修饰细胞(DNA3.1/H460)及未修饰NCI-H460细胞(NCI-H460)上清液的exosome,透射电镜下观察exo-some形态;用Western blotting方法检测exosome中热休克蛋白70(HSP70)、人白细胞抗原(HLA)及IL-18的表达;用exosome直接刺激活化T细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)法测定T细胞对NCI-H460细胞的杀伤作用;用exosome冲击树突状细胞(DCs),然后活化T细胞,测定对NCI-H460细胞的杀伤作用,计算杀伤率。结果:透射电镜下观察exosome具有典型的形态;3组exosome中均有HSP70及HLA蛋白表达,IL-18/H460组有IL-18蛋白表达。效靶比25∶1、10∶1、5∶1时exosome直接提高活化T细胞的杀伤率,IL-18/H460组为(38.45±5.42)%、(25.17±3.94)%和(11.75±3.22)%,exosome冲击DCs活化T细胞的杀伤率,IL-18/H460组为(89.05±4.06)%、(64.97±6.02)%和(40.16±4.98)%,均高于其余2组。Exosome冲击DCs活化T细胞的杀伤作用强于exosome直接刺激活化的T细胞。结论:IL-18基因修饰能增强NCI-H460细胞来源exosome诱导的杀伤肿瘤细胞作用。

高三尖杉酯碱对HL6 0细胞凋亡的影响及机制的研究

目的 :研究高三尖杉酯碱对HL6 0细胞凋亡的影响及其机制。方法 :运用高三尖杉酯碱作用HL6 0细胞后撤药实验筛选其诱导HL6 0细胞凋亡启动时相 ,流式细胞和免疫组化技术检测高三尖杉酯碱诱导HL6 0细胞凋亡启动时相凋亡信号分子Bcl - 2、Bax、Fas/FasL、caspase - 3、ERK2和p38的表达状况。结果 :在高三尖杉酯碱诱导HL6 0细胞凋亡启动时相 ,Bcl- 2表达降低 ,Bax表达增高 ,Bcl - 2 /Bax比值降低 ,ERK2表达减低 ,p38表达增加 ,cas pase- 3表达增加 ,Fas/FasL分子的表达无显著变化。结论 :Bcl- 2、Bax、MAPK途径和caspase - 3参与高三尖杉酯碱启动HL6

中西药联合防治急性心肌梗死溶栓再灌注心律失常的临床研究

目的 :探讨早期应用中药针剂葛根素和脉安定防治急性心肌梗死 (AMI)再灌注心律失常的效果。方法 :对 10 2例 AMI患者随机分为中西药治疗组和西药治疗对照组 ,每组 5 1例。中药治疗组采用针剂葛根素和脉安定静滴 ,对照组用极化液静滴 ;溶栓和其它治疗 2组相同 ,均采用常规方法。结果 :中西药治疗组心律失常较对照组显著减少 (P<0 .0 1)。综合评价中西药治疗组总有效率为 96 .1% ,对照组为 82 .4% ,2组有显著差异(P<0 .0 1)。结论 :葛根素和脉安定对 AMI再灌注心律失常有明显的防治效果。

葛根素加脉安定对急性心肌梗死溶栓再灌注心律失常的疗效观察

为探讨葛根素和脉安定早期静滴对急性心梗 (AMI)溶栓再灌注心律失常 (RA)的临床疗效 ,将 10 2例AMI患者随机分为两组进行观察治疗 ,其中试验组加用葛根素和脉安定 ,对照组用极化液 ;两组均常规用溶栓和其他治疗。结果试验组 RA较对照组显著减少 (P<0 .0 1) ;综合评价其总有效率试验组为 96 .1% ,对照组为82 .4% (P<0 .0 1)。研究提示 ,葛根素和脉安定对 AMI溶栓

高三尖杉酯碱联合IFNα-2b可促进白血病源性树突状细胞成熟

目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)、干扰素α-2b(IFNα-2b)和两者联合(HHT+IFNα-2b)对白血病源性树突状细胞(DCs)的促成熟作用。方法:在白血病多药耐药细胞K562/A02中加入细胞因子rhGM-CSF和rhIL-4,7d后Wright-Gimsa染色观察细胞形态的变化,流式细胞术检测细胞免疫表型的变化,同种混合淋巴细胞反应、CTL杀伤效应、细胞因子IL-12的分泌来评价此白血病源性DC的成熟程度,然后在上述白血病源性DC中分别加入HHT、IFNα-2b和HHT+IFNα-2b,3d后以上述同样方法检测它们对此白血病源性DC的促成熟作用。结果:K562/A02细胞在rhGM-CSF和rhIL-4作用7d后,CD83、HLA-DR和CD86分子的表达分别为(65.50±8.40)%、(32.00±4.32)%和(18.65±3.20)%,经HHT作用后这3种分子的表达升高到(85.36±8.42)%、(39.58±7.68)%和(35.53±4.35)%;经IFNα-2b作用后升高到(87.15±7.59)%、(40.53±6.30)%和(38.45±6.42)%;经HHT+IFNα-2b联合作用后升高到(94.38±6.59)%、(52.75±8.51)%和(42.98±9.87)%,与作用前相比差异均显著。经HHT、IFNα-2b和HHT+IFNα-2b作用后具有典型DC形态的细胞增多。经HHT和IFNα-2b作用的DC均可刺激T细胞产生较强的增殖效应,诱导产生的CTL对靶细胞K562/A02的杀伤率明显增强且当效靶比为20:1时杀伤效率最强,IL-12分泌明显增高。结论:HHT和IFNα-2b对白血病源性DC有促成熟作用,且两者联用时作用最强。

电镜细胞化学在急性白血病分型中的应用

对 30例初治成人急性白血病分别进行了形态学、免疫学和电镜细胞化学检查。结果显示形态学与免疫学检查可使急性白血病的诊断准确率达 90 % ,而电镜细胞化学检查的联用使急性白血病的诊断准确率几乎达10 0 %。

T、B免疫双标记型急性淋巴细胞白血病的临床特点

目的 :了解T、B免疫双标记型急性淋巴细胞白血病 (ALL)的临床特点 ,以判断预后与指导治疗。方法 :对 4 89例形态学上诊断为ALL的病例 ,取其外周血或骨髓 ,分离出单个核细胞 ,应用APAAP法进一步作免疫表型分析 ,对其中同时表达T、B淋巴细胞表面抗原的免疫双标记型病例的临床特点、化疗疗效及预后进行观察。结果 :4 7例患者同时表达T、B淋巴细胞表面特异性抗原。在临床方面 ,与T淋巴细胞系ALL相比 ,肝、脾、淋巴结肿大或纵隔肿块发生率、白细胞数量均较低 (P <0 .0 5 ) ,但化疗完全缓解率及存活期差异无显著性意义(P >0 .0 5 ) ;与B淋巴细胞系ALL相比 ,肝、脾、淋巴结肿大及纵隔肿块发生率均较高 (P <0 .0 5 ) ,而白细胞数量差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,但化疗完全缓解率高、存活期较长 (P <0 .0 5 )。结论

冬凌草甲素对人肺癌NCI-H460细胞侵袭和迁移的影响

目的:研究冬凌草甲素对人肺癌NCI-H460细胞侵袭和迁移的影响。方法:将NCI-H460细胞分为高剂量(HD)组、中剂量(MD)组、低剂量(LD)组和对照(N)组,前3组(实验组)加入不同浓度的冬凌草甲素,N组不加冬凌草甲素,观察细胞生长情况;用MTT法测定细胞增殖;比较细胞侵袭能力和迁移能力;Western blotting检测细胞MMP-2和MMP-9表达。结果:实验组细胞数量低于对照组,细胞增殖受抑制,HD组抑制率为48.94%,MD组为36.17%,LD组为19.15%;实验组穿透滤膜细胞数明显减少,HD组为26.67±5.16,MD组为36.17±5.08,LD组为44.33±5.50;实验组的迁移速率及迁移细胞数均降低;实验组的MMP-2和MMP-9表达水平明显低于N组(P<0.01)。结论:冬凌草甲素能抑制NCI-H460肺癌细胞的侵袭和迁移,其作用与下调MMP-2和MMP-9表达有关。

葛根素加脉安定防治急性心梗再灌注损伤的研究

目的 :探讨中药针剂葛根素加脉安定早期静滴防治急性心肌梗死 (AMI)再灌注损伤的效果。方法 :对 10 2例AMI患者随机分为试验组和对照组 ,每组 51例 ;试验组采用葛根素加脉安定 ,对照组用极化液 ;溶栓和其他治疗两组均常规进行。结果 :两组HR、mBP无明显差异 ,试验组O2 max、RA显著减少 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ;CK、CK MB和HBD峰值显著低于对照组 ,且降至正常值的时间明显缩短 (P <0 .0 1) ;WBC平均总数和中性平均百分比在 4 8h～ 5d试验组显著降低 (P <0 .0 5) ;BUN、Cr治疗前后试验组差异有显著性 (P <0 .0 5) ,对照组差异无显著性 ;MIER为 7.8% ,其中试验组为 5.9% ,对照组 9.8%。综合疗效评价试验组达 96.1% ,对照组为 82 .4 % (P <0 .0 1)。结论 :葛根素加脉安定对急性心梗再灌注损伤有明显的防治效果。

慢性粒细胞白血病并假性低血糖7例报告附文献复习

目的:对7例慢性粒细胞白血病合并假性低血糖的病例进行总结,并复习相关文献。方法:对7例慢性粒细胞白血病患者同时采用葡萄糖氧化酶(GOD)法及血糖仪检测空腹血糖,采用直线相关分析法分析白细胞计数与血清葡萄糖水平之间的关系。结果:白细胞计数与血清葡萄糖水平之间存在直线相关关系,呈负相关。结论:慢性粒细胞白血病可能合并假性低血糖的存在。

重组人白细胞介素蛳11对化疗所致血小板减少的治疗效果

目的:观察重组人白细胞介素蛳11(巨和粒)对化疗所致血小板减少的治疗效果。方法:选择化疗所致血小板减少的患者25例,实验组15例,除给予常规止血治疗外,采用巨和粒1.5 mg皮下注射7 d;对照组仅给予常规止血治疗。观察两组治疗后血小板数目的变化及出血症状的改善情况。结果:治疗后血小板数目实验组较前明显升高,与对照组有显著性差异(P<0.05),且出血症状明显改善。结论:对化疗所致血小板减少的患者采用巨和粒治疗,可使血小板数目升高,可有效地缓解出血症状。

再生障碍性贫血患者骨髓自然杀伤T细胞体外活化特性研究

目的 研究再生障碍性贫血（再障）患者骨髓中自然杀伤T（NKT）细胞的数量以及体外活化后的功能状态.方法 将扩增活化骨髓单个核细胞（BMMNC）中NKT细胞的培养体系分为2组：①加入α-半乳糖神经酰胺（α-galactosylceramide,α-Galcer）＋rhIL-2;②加入α-Galcer＋rhIL-2＋rhGCSF.以流式细胞术（FACS）检测再障患者及正常对照组BMMNC中TCRVα24＋Vβ11＋细胞（NKT细胞）扩增前后的比率,同时测定NKT细胞活化后胞内IFN-γ、IL-4的表达.结果 再障患者组BMMNC中NKT细胞的比率为（0.19±0.09）%,NKT细胞在①、②培养体系中扩增活化7 d后,扩增倍数分别为79.91±40.56和67.45±29.42（P＜0.05）;活化后NKT细胞胞内IFN-γ阳性的比率分别为（62.31±14.67）%和（37.45±7.89）%（P＜0.01）;IL-4阳性的比率分别为（27.03±9.88）%和（55.11±12.13）%（P＜0.01）.正常对照组BMMNC中NKT细胞的比率为（0.25±0.12）%,较再障患者组显著升高（P＜0.05）,正常对照组NKT细胞在相应的①、②培养体系中的扩增倍数均高于再障患者组（P＜0.05）;活化后NKT细胞胞内IFN-γ的表达均低于再障患者组（P＜0.05）.结论 再障患者骨髓中NKT细胞较正常对照显著减少,扩增能力较正常对照降低,活化后IFN-γ的表达较正常对照升高.在rhG-CSF作用下,再障患者骨髓中NKT细胞经α-Galcer刺激后的扩增能力下降,表达IL-4的NKT2型细胞优势扩增,IL-4表达及分泌增加.

肿瘤坏死因子-α对A549肺腺癌细胞外来体诱导抗肿瘤作用的影响

肺癌的发病率及病死率较高，传统的治疗方法如手术、放疗及化疗等毒性及不良反应大，疗效不满意，生物免疫疗法是肺癌治疗的重要手段之一。肿瘤细胞来源的外来体含有肿瘤抗原和共刺激分子，能诱导抗肿瘤免疫反应，但其抗肿瘤疗效有待进一步提高。研究结果显示多种细胞因子能调节外来体的分泌和功能，

临床诊断思维

为提高临床医师诊断思维水平与能力。本文阐述了临床诊断思维的概念与重要性;进行诊断思维应具备的基本条件;临床诊断思维常用的几种方法;重申了临床医疗实践与提高临床思维水平和能力的关系;初步提出了评价临床思维水平和能力的几个条件。

一定要把握好诊断学的发展方向

笔者阐述诊断学的概念和任务,提出诊断学主要发展方向:要不断研究诊断学的概念、任务特点,要不断调整、完善诊断学的发展方向;要努力完成诊断学繁重而艰巨的任务;要把诊断学传统的诊断技术、方法与现代先进的诊断技术、方法紧密地结合起来应用于临床,服务于病人;要不断地研究诊断思维、诊断行为与诊断艺术;要努力创造符合中国国情的诊断学教学方法和评估体系;要加强临床医师基本能力的教育与培养;诊断学应走学科发展之路。

1例罕见成年XLP-1病例报道

X连锁淋巴组织增生性疾病1型(X-linked lymphoproliferative disease type 1,XLP-1)是一种罕见的遗传性X连锁原发性免疫缺陷疾病(primary immunodeficiency diseases,PID),其特点是极易感染爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV),主要影响男性,且有一定的家族史,多在儿童及青年期发病,可表现为严重的传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)、致死性噬血细胞综合征(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)、淋巴增生性疾病和低丙种球蛋白血症。

高三尖杉酯碱诱导的白血病耐药细胞基因表达谱的变化

目的探讨高三尖杉酯碱（HHT）诱导的人白血病细胞耐药相关分子。方法在前期建立的HHT诱导的人白血病多药耐药细胞株K562／HHT的基础上，采用基因芯片技术比较K562／HHT细胞、其亲本K562细胞以及用耐药逆转剂米非司酮（RU486）作用后的K562／HHT（K562／HHT／RU486）细胞三者基因表达谱的差异，选择在这三种细胞中呈动态变化的骨髓细胞X染色体上酪氨酸激酶（BMX）基因用RT—PCR和Westernblot法在转录和翻译水平进行验证，进而转染BMX基因到K562和K562／HHT细胞，观察BMX过表达时这两种细胞内柔红霉素（DNR）含量的变化，确定BMX是否在K562／HHT细胞耐药形成中发挥作用。结果耐药细胞K562／HHT与其亲本K562细胞相比，共有117个基因表达有显著差异，其中57个基因表达明显上调，60个基因表达明显下调，耐药细胞K562／HHT中多药耐药基因mdr-1表达明显上调；K562／HHT／RU486细胞与K562／HHT细胞相比，13个基因表达明显上调，37个基因表达明显下调。这些差异表达的基因涉及耐药、细胞信号传导、细胞分化、细胞增殖、转录调节以及离子转运等。基因NM-001721（BMX）、NM-031459（SESN2）、NM-033642（FGF13）和AL049309（SFRS12）在两组芯片中的表达均有显著差异。其中BMX基因在K562／HHT细胞中的表达与K562细胞相比，明显上调，在K562／HHT／RU486细胞则较K562／HHT细胞减低。进一步用RT—PCR和Westernblot法检测得到了相同的结果。RT—PCR和Westernblot证实BMX质粒转染的K562及K562／HHT细胞BMX表达均上调，流式细胞术检测到K562及K562／HHT细胞内DNR含量荧光强度分别为79．28±4．04和29．84±2．67，均较转染前荧光强度158．52±8．08和58．58±6．53显著减低。结论BMX在高三尖杉酯碱诱导的人白血病多药耐药细胞株K562／HHT耐药性产生中发挥作用。

原发免疫性血小板减少症患者脾脏趋化因子受体CXCR3和CCR5的表达

目的探讨趋化因子受体CXCR3和CCR5在原发免疫性血小板减少症（ITP）患者脾脏中的表达及其临床意义。方法以10例ITP患者（ITP组）为研究对象，并以8例创伤性脾破裂患者脾切除标本作为正常对照。应用免疫组化法检测脾脏组织CXCR3、CCR5阳性表达率，用Westernblot法检测脾脏组织中CXCR3和CCR5的蛋白表达水平，逆转录聚合酶链反应检测CXCR3和CCR5mRNA表达水平。结果免疫组化结果显示ITP患者脾脏组织CXCR3、CCR5阳性表达率（90％、100％）均高于对照组（75％、87．5％），差异均有统计学意义（P〈0．05）；ITP患者脾脏组织CXCR3蛋白、mRNA表达量分别为对照组的3．0倍、3．5倍；CCR5蛋白、mRNA表达量分别为对照组的1．2倍、1．7倍，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论CXCR3及CCR5的高表达可能在ITP患者脾脏免疫紊乱中起着一定的作用。