太湖地区24份杂交粳稻DNA指纹图谱的构建及遗传相似性分析

利用SSR标记对24份太湖地区杂交粳稻品种初步建立了DNA指纹图谱和进行遗传相似性分析.结果表明：24对引物在研究材料中共检测到105个多态性片段,平均每对引物的多态性片段为4.38个.筛选出5对核心引物（RM336、RM72、RM1195、RM19和Rm^267）建立了24份材料的DNA指纹图谱.24份材料之间的相似系数变化范围为0.69～0.99,相似系数比较大,表明供试材料的遗传基础多样性相对狭窄.在遗传相似系数0.71水平处可以将24份材料分为3个类群.

灵芝酸通过髓样分化蛋白2调控小胶质细胞活化改善小鼠脑缺血损伤

目的灵芝酸是灵芝的主要生物活性成分之一,具有免疫调节及抗炎的作用。本研究旨在观察灵芝酸对小鼠脑缺血损伤是否具有保护作用及可能的作用机制。方法通过线栓法缺血60 min再灌注制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型。小鼠随机分为假手术组、假手术给药组、模型组和灵芝酸治疗组。灵芝酸(1.25,5和20 mg·kg^(-1))于再灌同时ip给药。体外实验应用经典的脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞神经炎症损伤模型。结果灵芝酸可呈剂量依赖性改善小鼠脑缺血后神经功能缺失、减小脑梗死体积、减轻脑水肿程度。与模型组相比,灵芝酸治疗组可显著抑制脑缺后神经元的凋亡,抑制小胶质细胞过度激活,减少损伤侧脑组织中炎症相关蛋白iNOS,COX-2和TNF-α的表达,NF-κB及MAPK信号通路的蛋白(ERK,JNK和P38)磷酸化水平也显著降低。体外实验结果表明,灵芝酸同样可呈剂量依赖性地减少LPS诱导后小胶质细胞炎症相关蛋白iNOS,COX-2和TNF-α的表达水平,并抑制NF-κB及MAPK信号通路。我们利用超高效液相色谱-串联质谱检测灵芝酸的组成,并将含量较高的单体进行提取和纯化,通过ELSIA法筛选有效的抗炎单体,应用表面等离子共振技术、蛋白芯片技术、分子对接技术以及免疫共沉淀等方法对筛选出的灵芝酸可能的作用靶点进行检测和验证。结果表明,灵芝酸混合物主要由19种灵芝酸单体组成,其中含量较高的8种单体均可抑制小胶质细胞炎症因子的分泌,并且髓样分化蛋白2(MD2)可能为灵芝酸抑制小胶质细胞炎症反应的关键靶点,灵芝酸单体可通过与MD2结合,抑制其与TLR4形成复合物,进而影响下游的NF-κB及MAPK信号通路。在8种灵芝酸单体中灵芝酸K的抗炎活性最为突出,且与MD2亲和力也最强。MD2基因敲除及MD2基因敲除后给予灵芝酸对小胶质细胞炎症反应及脑缺血再灌注损伤的实验结果表明,脑缺血再灌注损伤后,损伤侧脑组织中MD2的表达明显升高,MD2基因敲除后显著抑制脑缺血再灌注后小胶质细胞的过度激活。并且MD2基因敲除可抑制LPS引起的小胶质的炎症反应,减少脑缺血再灌注后脑梗死体积,在MD2基因敲除基础上给予灵芝酸,以上作用无显著差异。表明灵芝酸发挥脑缺血再灌注损伤保护作用依赖于MD2。结论灵芝酸具有抗脑缺血损伤的作用,其机制主要是通过与MD2结合,抑制MD2与TLR4形成复合物,下调MAPK及NF-κB信号通路,进而抑制小胶质细胞过度激活,减少炎症因子的表达。

稀释性低钠血症发病机制及其治疗策略的研究进展

水电解质紊乱高发于住院患者、老年患者以及长期使用利尿药的患者,其中低钠血症是最常见的电解质紊乱,占住院患者的15%~30%。低钠血症患者愈后较差、死亡率高。该文旨在通过对肝硬化、抗利尿激素分泌失调综合征、心力衰竭伴随的稀释性低钠血症发病机制以及临床治疗方案进行综述,理清对稀释性低钠血症病因及治疗方案的认识,为治疗稀释性低钠血症和研发新型利尿药提供更好的思路。

利用SSR标记鉴定杂交粳稻‘常优1号’种子纯度

为了建立一套快速有效的鉴定交粳稻‘常优1号’种子纯度的方法,本研究利用SSR分子标记技术,对三系杂交粳稻‘常优1号’及其父母本的多态性进行了引物筛选和种子纯度鉴定研究。从24对SSR引物中筛选到1对在‘常优1号’和其双亲之间表现为稳定的共显性且能将杂交种及其亲本完全区分开的引物。利用筛选的RM208引物对‘常优1号’200粒种子进行鉴定,结果表明,‘常优1号’种子纯度为96%,与大田1 000株杂交种纯度鉴定结果 98.2%相比,SSR标记与大田种植鉴定结果基本一致。研究结果表明,引物RM208可用于‘常优1号’种子纯度的鉴定,有助于‘常优1号’的推广应用。

Research on accurate quantitation technique using liquid chromatography coupled with triple quadrupole mass spectrometry and experiment optimization—take a novel diuretic as an example

Liquid chromatography coupled with the triple quadrupole mass spectrometry(LC-QQQ MS)technique is the most commonly used technique for quantitative analysis.It is widely used in pharmacology,targeted metabolomics,Chinese medicine quality control,and other research fields.The technique monitors only characteristic precursors and product ions through multiple reaction monitoring(MRM)mode and can detect targeted molecules in complex matrix with high specificity and sensitivity.In the present study,a diarylamide derivative diuretic was used as an example to introduce the method establishment and parameter optimization of this liquid chromatography-mass spectrometry technique.Diuretic and its internal standard could be completely separated within a 5-min gradient,and the quantitative linear range was 1–1000 ng/mL with R2=0.9996 in practical samples.This study showed that the key to the method development for LC-QQQ MS was the selection of the LC mobile phase,the elution gradient,the declustering potential,and the collision energy of compounds in MS.