人子宫颈癌PD-L1的表达及其与肿瘤内浸润T细胞的相关性研究

目的观察负性免疫调节分子程序性死亡配体1(programmed death receptor-ligand1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内T淋巴细胞浸润的关系。方法免疫组织化学染色观察5例正常宫颈组织、7例高级别宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CINⅡ-Ⅲ)组织和67例子宫颈癌组织中PD-L1的表达和淋巴细胞PD-1的表达,免疫荧光染色观察相应组织内浸润的CD4+T和CD8+T细胞数量,TUNEL法检测淋巴细胞凋亡。结果正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈瘤变上皮不表达或弱阳性表达PD-L1,70%(47/67)的宫颈癌表达PD-L1。肿瘤内浸润的部分淋巴细胞表达PD-1。子宫颈瘤变上皮与子宫颈鳞状细胞癌PD-L1表达存在明显差异(P<0.01),浅表浸润的子宫颈鳞状细胞癌PD-L1的表达略低于深部浸润的鳞状细胞癌,但无显著差异;PD-L1阳性病例肿瘤局部CD8+T细胞数量显著减少,且PD-L1表达与CD8+T细胞数量明显负相关(r=-0.82,P<0.01),但与肿瘤局部CD4+T细胞数量无明显相关性(r=-0.05,P>0.05);部分PD-L1阳性的子宫颈癌局部浸润的淋巴细胞存在凋亡现象。结论子宫颈癌细胞表达PD-L1,且PD-L1的表达与肿瘤局部浸润的CD8+T细胞数量减少有关,但与浸润的CD4+T细胞数量无关。癌细胞表达PD-L1可能促进了肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡。

宫腔镜冷刀切除子宫肌瘤对患者子宫内膜容受性及血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平的影响

目的 分析宫腔镜冷刀切除子宫肌瘤对患者子宫内膜容受性及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平的影响。方法 选取2019年7月至2021年6月收治的子宫肌瘤患者40例作为研究对象,依据简单数字表法将其随机分为对照组和观察组,每组40例。对照组行腹腔镜手术治疗,观察组行宫腔镜冷刀去除术治疗。比较2组肌层愈合情况、手术相关指标、子宫内膜容受性(子宫内膜厚度、子宫内膜血流博动指数、阻力指数)、炎性因子水平(TNF-α、IL-1β、IL-6)、并发症情况。结果 术后1~6个月2组肌层愈合率均逐渐升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。相较于对照组,观察组手术时间、首次下床活动时间、术后肛门排气时间、住院时间均明显缩短,术中出血量明显减少(P<0.05)。相较于术前,1个月时2组子宫内膜厚度均升高,并且观察组高于对照组;而2组子宫内膜血流搏动指数及阻力指数均降低,并且观察组低于对照组(P<0.05)。相较于术前,术后3 d2组TNF-α、IL-1β、IL-6均升高,但观察组低于对照组(P<0.05)。2组并发症比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 相较于腹腔镜手术,宫腔镜冷刀去除子宫肌瘤的疗效更加显著,不仅有利于肌层愈合,还能够保障子宫内膜容受性,同时有效减轻手术对机体造成的炎性损伤,促进患者术后恢复。

共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在人子宫颈癌的表达及意义

目的：研究共刺激分子程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）、程序性死亡配体2（Programmeddeath ligand 2,PD-L2）和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学PV-6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN（CINⅡ~Ⅲ级）和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性。结果：正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2;CINⅡ~Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70%（47/67）、51%（34/67）和46%（31/67）。统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关（P〈0.01）,与年龄、组织学类型无关;PD-L2的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）有关;B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）和局部血管内瘤栓形成（P〈0.05）相关。结论：人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关。PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点。

重组疫苗E. coli LLO/OVA促进小鼠树突状细胞NOD1受体活化并表达IFN-γ

目的探讨重组疫苗E.coli LLO/OVA诱导树突状细胞的细胞内受体NOD(nucleotide-binding oligomerizationdomain)活化及表达IFN-γ的作用。方法采用基因芯片杂交分析经E.coliLLO/OVA刺激后小鼠骨髓树突状细胞(bonemarrow-derived dendritic cells,BMDC)Card4/NOD1及其下游NF-κB信号通路相关分子mRNA的表达,RT-PCR检测BMDC的NOD1、NOD2和IFN-γmRNA表达,ELISA测定BMDC培养上清液内IFN-γ含量。结果经E.coli LLO/OVA刺激后4h至8h,BMDC出现Card4/NOD1基因表达上调,其下游信号途径相关分子基因Rip2、Ikkα、Ikkβ、Nfκb1、Nfκb2和IFN-γ均出现表达上调。RT-PCR结果显示该疫苗刺激后BMDC的NOD1与IFN-γ基因表达时段一致。经E.coliLLO/OVA刺激后24h,BMDC培养上清液内IFN-γ含量明显高于E.coli OVA刺激后的BMDC。结论重组疫苗E.coliLLO/OVA诱导小鼠骨髓树突状细胞NOD1受体信号途径活化并促进了IFN-γ表达。

CD11c细胞的改良法磁珠分离及诱导T细胞增殖研究

目的:改良CD11c细胞的磁珠分离方法,并观察CD11c细胞诱导同源CD4^+T和CD8^+T细胞增殖的作用。方法:使用胶原酶、DNase I和EDTA处理脾组织,以及小鼠血清和抗CD16/32抗体阻断CD11c磁珠与脾细胞非特异结合后分离CD11c细胞;流式细胞术分析CD11c细胞的纯度;淋巴细胞混合培养和ELISA检测CD11c细胞诱导同源T细胞增殖及分泌细胞因子的作用。结果:改良后的磁珠分离法获得了平均(4.52±0.05)×10~6/鼠的CD11c细胞,纯度高达98%。重组肿瘤疫苗E.coli LLO/ OVA免疫小鼠的CD11c细胞明显促进了CD4^+T和CD8^+T细胞增殖并分泌IL-2和IFN-γ。结论:改良法磁珠分离获得了较多高纯度的CD11c细胞,活化的CD11c细胞具有诱导同源T细胞增殖及分泌细胞因子的作用。

重组疫苗E.coli LLO/OVA诱导树突状细胞成熟并表达趋化因子及受体

目的:探讨重组疫苗E.coliLLO/OVA诱导树突状细胞成熟和表达趋化因子及其受体的作用.方法:采用基因芯片杂交及RT-PCR检测经E.coliLLO/OVA刺激后小鼠骨髓树突状细胞(BMDC)的NF-κB信号通路相关分子和趋化因子及其受体mRNA的表达,流式细胞分析BMDC活化状况及趋化因子受体CXCR4的表达.结果:未成熟BMDC表达趋化因子基因Ccl2,Ccl4,Ccl6,Ccl9,Ccl17,Ccl22,Cxcl2,Cxcl4和趋化因子受体基因Ccr2,Ccr5和Ccr7.经E.coliLLO/OVA刺激后4～8 h,BMDC明显上调表达基因Myd88,Nf-κb1,Ccl3,Ccl5,Ccl7,Ccl22,Cxcl1,Cxcl9和Ccr12,同时下调表达趋化因子受体基因Ccr2和Ccr5,但持续表达Ccr7.经该疫苗刺激后8 h,BMDC上调表达基因Tlr2,Myd88,Nf-κb1和Cxcr4.该疫苗刺激后12 h,BMDC下调一系列趋化因子和趋化因子受体基因表达,仅持续表达基因Ccl5和Cxcr4.经疫苗刺激24 h后BMDC上调表达CD40,CD80,CD86,MHC-II类分子及CXCR4.结论:重组疫苗E.coliLLO/OVA可能通过Myd88/NF-κB信号途径诱导了小鼠骨髓树突状细胞成熟并表达一系列趋化因子及趋化因子受体基因,尤其上调了趋化因子受体CXCR4的表达.

妊娠晚期新发甲状腺功能减退患者应用左甲状腺素钠片治疗的效果及对新生儿出生质量的影响

目的研究妊娠晚期新发甲状腺功能减退患者应用左甲状腺素钠片治疗的效果及对新生儿出生质量的影响。方法方便选取2016年1月—2018年1月来该院诊治的妊娠晚期新发甲状腺功能减退患者500例作为研究对象,按照随机数字表达法分为研究组(n=250)和对照组(n=250),研究组应用左甲状腺素钠片治疗妊娠晚期新发甲状腺功能减退患者,对照组不接受左甲状腺素钠片治疗,对比两组患者的治疗效果,包括治疗前后甲状腺功能以及母婴情况。结果研究组患者治疗后TSH水平较之治疗前和对照组显著降低(P<0.05);不良妊娠发生率,研究组为15.2%,对照组为94.4%,研究组显著低于对照组(χ^2=4.870,P<0.05);围产儿并发症发生率,研究组为15.2%,对照组为97.2%,研究组显著低于对照组(χ^2=5.010,P<0.05)。结论左甲状腺素钠片对妊娠晚期新发甲状腺功能减退患者的治疗效果好,能够提高患者甲状腺功能,安全性高,改善不良妊娠,新生儿出生质量高,值得进一步应用和推广。