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大片形吸虫外泌体对水牛外周血单核巨噬细胞极化的影响
1
作者
王渝瑞
王乐铭
+1 位作者
朱彬
王冬英
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2023年第1期88-94,共7页
为探讨大片形吸虫外泌体(FgExo)在宿主免疫调节方面的作用,本研究采用聚合物沉淀法和超速离心法从大片形吸虫分泌排泄产物(FgESP)中分离得到FgExo;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测不同浓度的FgESP或FgExo作用于水牛外周血单核巨噬细胞(Mφ...
为探讨大片形吸虫外泌体(FgExo)在宿主免疫调节方面的作用,本研究采用聚合物沉淀法和超速离心法从大片形吸虫分泌排泄产物(FgESP)中分离得到FgExo;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测不同浓度的FgESP或FgExo作用于水牛外周血单核巨噬细胞(Mφ)后γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)的转录水平;根据qPCR结果选择50μg/mL FgExo(+5μg/mL脂多糖)、200μg/mL FgESP(+5μg/mL脂多糖)作为试验组,以PBS为阴性对照组、脂多糖为阳性对照组,分别作用于Mφ后采用qPCR检测Mφ分型相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶2(Arg-2)、CD206的转录水平;ELISA检测白介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)分泌水平。结果显示:FgExo和FgESP可显著上调MφIL-10 mRNA的转录水平,显著抑制IFN-γmRNA的转录水平;显著上调M2型Mφ标记物CD206及相关因子Arg-2、TGF-β1的表达,显著抑制M1型Mφ标记物CD86及相关因子iNOS、IL-1β的表达。本研究结果表明,FgExo和FgESP均能够使水牛外周血单核巨噬细胞向M2型极化,利于大片形吸虫在水牛体内生存。
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关键词
大片形吸虫
外泌体
外周血单核巨噬细胞
极化
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职称材料
大片形吸虫CatL1蛋白的原核表达及其特异性多克隆抗体的制备
被引量:
1
2
作者
王乐铭
侯林静
+6 位作者
饶国顺
梅雪芳
施维
王渝瑞
吴正姣
王冬英
张为宇
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第18期62-65,70,共5页
为了制备大片形吸虫诊断抗体,试验采用原核表达制备大片形吸虫组织蛋白酶L1重组蛋白(rFgCatL1),用该蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体效价,Western-blot法检测多克隆抗体的特异性。结果表明:Ca...
为了制备大片形吸虫诊断抗体,试验采用原核表达制备大片形吸虫组织蛋白酶L1重组蛋白(rFgCatL1),用该蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体效价,Western-blot法检测多克隆抗体的特异性。结果表明:CatL1基因大小为981 bp,蛋白质分子质量为39.0 ku左右,与预期分子质量大小一致。制备的小鼠多克隆抗体血清效价达1∶128 000,能特异性识别大片形吸虫排泄-分泌物(ESP)抗原。说明制备的rFgCatL1多克隆抗体可作为良好的诊断抗体用于研制快速诊断试剂盒。
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关键词
大片形吸虫
组织蛋白酶L1
原核表达
多克隆抗体
特异性
原文传递
题名
大片形吸虫外泌体对水牛外周血单核巨噬细胞极化的影响
1
作者
王渝瑞
王乐铭
朱彬
王冬英
机构
广西大学动物科学技术学院/广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心/广西高校动物疫病预防与控制重点实验室
出处
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2023年第1期88-94,共7页
基金
广西自然科学基金(2019GXNSFAA245013)
崇左市科技项目(崇科FA2019006)
广西创新驱动发展专项(桂科AA17204057)。
文摘
为探讨大片形吸虫外泌体(FgExo)在宿主免疫调节方面的作用,本研究采用聚合物沉淀法和超速离心法从大片形吸虫分泌排泄产物(FgESP)中分离得到FgExo;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测不同浓度的FgESP或FgExo作用于水牛外周血单核巨噬细胞(Mφ)后γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)的转录水平;根据qPCR结果选择50μg/mL FgExo(+5μg/mL脂多糖)、200μg/mL FgESP(+5μg/mL脂多糖)作为试验组,以PBS为阴性对照组、脂多糖为阳性对照组,分别作用于Mφ后采用qPCR检测Mφ分型相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶2(Arg-2)、CD206的转录水平;ELISA检测白介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)分泌水平。结果显示:FgExo和FgESP可显著上调MφIL-10 mRNA的转录水平,显著抑制IFN-γmRNA的转录水平;显著上调M2型Mφ标记物CD206及相关因子Arg-2、TGF-β1的表达,显著抑制M1型Mφ标记物CD86及相关因子iNOS、IL-1β的表达。本研究结果表明,FgExo和FgESP均能够使水牛外周血单核巨噬细胞向M2型极化,利于大片形吸虫在水牛体内生存。
关键词
大片形吸虫
外泌体
外周血单核巨噬细胞
极化
Keywords
Fasciola gigantica
exosome
peripheral blood mononuclear macrophages
polarization
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
大片形吸虫CatL1蛋白的原核表达及其特异性多克隆抗体的制备
被引量:
1
2
作者
王乐铭
侯林静
饶国顺
梅雪芳
施维
王渝瑞
吴正姣
王冬英
张为宇
机构
广西大学动物科学技术学院
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020年第18期62-65,70,共5页
基金
广西创新驱动发展专项(桂科AA17204057)
国家重点研发计划项目“反刍动物肝片吸虫病早期诊断与控制技术研究”(217YFD0501202)。
文摘
为了制备大片形吸虫诊断抗体,试验采用原核表达制备大片形吸虫组织蛋白酶L1重组蛋白(rFgCatL1),用该蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体效价,Western-blot法检测多克隆抗体的特异性。结果表明:CatL1基因大小为981 bp,蛋白质分子质量为39.0 ku左右,与预期分子质量大小一致。制备的小鼠多克隆抗体血清效价达1∶128 000,能特异性识别大片形吸虫排泄-分泌物(ESP)抗原。说明制备的rFgCatL1多克隆抗体可作为良好的诊断抗体用于研制快速诊断试剂盒。
关键词
大片形吸虫
组织蛋白酶L1
原核表达
多克隆抗体
特异性
Keywords
Fasciola gigantica
Cathepsin L1
prokaryotic expression
polyclonal antibody
specific
分类号
S852.735 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大片形吸虫外泌体对水牛外周血单核巨噬细胞极化的影响
王渝瑞
王乐铭
朱彬
王冬英
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
大片形吸虫CatL1蛋白的原核表达及其特异性多克隆抗体的制备
王乐铭
侯林静
饶国顺
梅雪芳
施维
王渝瑞
吴正姣
王冬英
张为宇
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2020
1
原文传递
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