Cbfa1对骨髓间充质干细胞分化的定向调控研究(英文)

目的研究Cbfa1调控间充质干细胞(MSCs)分化为成骨细胞的分子机制。方法用Percoll密度梯度离心法分离获得人、大鼠和小鼠的MSCs,通过苏木精-伊红染色、细胞化学、免疫细胞化学、免疫荧光及透射电镜等方法进行鉴定。传代培养后的MSCs分别用重组真核表达载体pcD-NA3.1(+)/Cbfa1-II通过脂质体系统转染,用NorthernBlot检测三种成骨细胞特异性细胞外基质蛋白mRNA的表达情况。结果转染后人、大鼠和小鼠的MSCs都有骨钙素、骨桥接蛋白和I型胶原的表达,三者间无明显差别。结论Cbfa1在转录水平定向调控间充质干细胞分化为成骨细胞,可应用于骨科疾患的基因治疗。

模拟男性老年骨质疏松大鼠模型骨扭转与压缩实验研究

目的研究正常及雄性老年骨质疏松大鼠骨的扭转与压缩力学性质,为研究男性老年骨质疏松提供生物力学参数.方法选用280～360 g5～6个月龄Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常对照组20只,骨质疏松模型组20只.模型组大鼠于0 w摘除睾丸,正常对照组与模型组大鼠饲养14 w,以腹主动脉放血法处死大鼠,取大鼠股骨进行扭转实验,取大鼠胫骨进行压缩试验.结果大鼠股骨扭转正常组最大扭矩为（24.7±4.6）N·cm,最大剪应力（18.6±3.82）MPa;模型组最大扭矩为（17.4±5.2）N·cm,最大剪应力为（11.4±2.94）MPa.正常对照组压缩最大载荷为（425±28.6）N,应力为（62.5±7.2）MPa,应变为（2.54±0.81）%,弹性模量为（2 760±26.2）MPa;模型组压缩最大载荷为（337±32.5）N,应力为（47.6±10.6）MPa,应变为（1.62±0.64）%,弹性模量为（2 410±21.6）MPa.结论骨质疏松模型骨的各项力学性能指标均显著降低.

骨性关节炎对膝关节干骺端松质骨力学性质影响的实验研究

目的研究正常国人新鲜尸体膝关节干骺端松质骨和老年骨性关节炎病膝关节干骺端松质骨的生物力学性质,为临床提供生物力学参数。方法取正常和病态膝关节干骺端松质骨在Shimadzu AUTOGRAPH电子万能试验机上进行压缩和弯曲实验。结果得出了其最大载荷、应力、应变、弹性模量等数据。结论病态组各项力学性质指标均显著低于正常组。

氮化纯钛颈椎植骨融合器的研制及生物力学测试

目的:根据国人颈椎特点设计研制了一种经氮化处理的纯钛植骨融合器,并进行生物力学测试。方法:取12具新鲜成年男性颈椎标本,分别处理成包含单、双运动功能单位的试样,模拟前路植骨及植人融合器,进行前屈、后伸、侧弯、扭转四个方面的测试,比较本融合器植人后与完整颈椎及单纯椎间植骨的稳定性,经统计学分析后自编程序拟合出载荷—位移曲线和扭矩一扭转角曲线。同时进行疲劳强度和强度破坏试验。结果:融合器植人后颈椎在各方向运动中的稳定性均明显强于单纯椎间植骨,也较完整颈椎运动功能单位稳定。结论:纯钛颈椎植骨融合器适用于前路间盘摘除减压手术的椎间固定融合,尤其是多节段病变的病例。

绝经女性被动吸烟行为对骨密度指标及抗骨折能力影响的调查

目的评价被动吸烟行为对绝经女性骨密度、骨代谢指标及抗骨折能力的影响。方法选择门诊就诊和住院治疗的绝经后妇女356例,调查接受吸烟情况和被动吸烟情况调查,并计算相应被动吸烟指数,同时还进行左侧股骨颈、大转子和Words三角等部位骨密度、骨代谢指标检查和抗骨折能力评估。结果356例绝经女性中,被动吸烟绝经女性大部分股骨Neck、Troch、Words三角等骨密度指标和FS、MS等抗骨折能力数据明显低于对照组。主、被动吸烟组之间全部股骨Neck、Troch、Words三角等骨密度指标和FS、MS等抗骨折能力数据无明显区别(P均>0.05)。轻度被动吸烟绝经女性的大部分股骨Neck、Troch、Words三角等骨密度指标和FS、MS等抗骨折能力数据明显高于中、重度被动吸烟组。结论被动吸烟绝经女性与主动吸烟一样,都有确切骨密度指标及抗骨折能力减低表现,尽早远离烟草、控烟戒烟、净化居住和工作环境很有必要。

ACL和MCL拉伸力学性质实验研究

目的研究了10具新鲜成人尸体膝关节前交叉韧带和内侧副韧带的拉伸力学性质,为临床提供生物力学参数。方法取正常国人新鲜尸体前交叉韧带和内侧副韧带各20个试样进行单向拉伸实验,得出了破坏载荷、强度极限、最大应变、弹性模量。对实验数据以多项式进行拟合,得出了应力-应变曲线和应力-应变关系表达式。结果前交叉韧带的拉伸强度极限最大应变弹性模量大于内侧副韧带。

青年与老年人脊柱黄韧带黏弹性实验研究

目的比较青年与老年人脊柱黄韧带的应力松弛和蠕变黏弹性力学性质,为黄韧带退变的黏弹性力学机制提供依据。方法 20例老年腰椎退变病人黄韧带标本为老年退变组,20例青年腰椎外伤病人黄韧带为青年组,黄韧带标本均取自L4～L5间黄韧带。以1%/s的应变增加速度和0.5 MPa/s的应力增加速度分别对试样进行应力松弛和蠕变实验,实验温度设定为(36.5±0.5)℃。设定试验时间为7 200 s,采集90个应力松弛和蠕变数据。以统计分析和归一化的方法处理实验数据。结果青年组黄韧带7 200 s应力下降了1.42 MPa,老年组黄韧带7 200 s应力下降了1.91 MPa。青年组黄韧带7 200 s应变上升了3.39%,老年组黄韧带7 200 s应变上升了2.07%,两组7 200 s应力均下降,应变上升数据均有统计学意义(P<0.05)。应力松弛曲线是以对数关系变化的,蠕变曲线是以指数关系变化的。结论老年退变组黄韧带和青年组黄韧带相比,7 200 s应力松弛量和蠕变量降低,黏弹性力学性能发生改变。

骨质疏松对骨的粘弹性性质影响的实验研究

目的研究正常大鼠股骨和维甲酸所致大鼠骨质疏松股骨的压缩粘弹性性质,为临床提供生物粘弹性力学参数。方法选用175～245g,6月龄Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组15只,模型组15只。对模型组大鼠每日灌服维甲酸(70mg·kg-1·d-1),实验动物于第12周末处死。取股骨进行压缩应力松弛、蠕变实验。结果得出了正常对照组和模型组股骨应力松弛,蠕变数据和曲线。对应力松弛蠕变实验数据进行归一化处理,得出归一化应力松弛函数、蠕变函数及曲线。结论模型组的7200s应力松弛、蠕变量指标显著低于正常对照组(P<0.05)。

正常与病态股骨头应力松弛特性的对比分析

比较正常股骨头和股骨头坏死后股骨头应力松弛性质,为人工关节研究和髋关节置换术提供应力松弛参数。在日本岛津电子万能试验机上对正常与病态股骨头各8个试样进行应力松弛实验。模拟人体温在36.5℃的温度场下进行实验,以5%/s的应变增加速度对标本施加应变,设定时间为7 200 s,采集100个实验数据。采用三参数模型计算应力松弛方程。观察应力松弛曲线和7 200 s应力松弛量。股骨头在最初600 s变化较快,之后应力缓慢下降,正常组7 200 s应力松弛量为0.31 MPa,病态组7 200 s应力松弛量为0.22 MPa,病态组7 200 s应力松弛量显著低于正常组(P<0.05)。股骨头坏死后打乱了松质骨头骨小梁的正常排列,骨量丢失,从而对应力松弛特性造成影响。应力松弛数据可以定量地说明坏死股骨头应力松弛特性差。

氟中毒对膝关节前交叉韧带应力松弛影响实验研究

目的研究氟中毒对膝关节前交叉韧带应力松弛的影响,为临床提供生物力学参数。方法复制氟中毒动物模型,取动物模型膝关节前交叉韧带进行应力松弛实验。结果得出了对照组和实验组动物膝关节前交叉韧带应力松弛数据和曲线。结论实验组膝关节前交叉韧带7200S应力松弛量显著低于对照组。

前路植入物对颈椎稳定性的影响

目的 比较前路椎间植骨和植入新型纯钛融合器后颈椎的生物力学强度。方法 取 1 2具新鲜成年男性颈椎标本 ,处理成所需试样 ,分别进行前屈、后伸、左 /右侧弯、左 /右扭转和轴向压缩的测试 ,计算位移 /载荷均值并绘图比较。结果 单纯椎间植骨的稳定性最差 ,而融合器植入则较完整颈椎试样稳定。结论 颈椎纯钛融合器是前路手术中椎间固定融合的可靠手段 ,尤其适用于多节段病变的病例。

新型肽对Lewis肿瘤细胞的作用

目的探讨新型肽对Lewis肿瘤细胞的抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测Lewis肿瘤细胞在不同时间段(24、48、72 h)细胞增殖活性,构建C57BL/6N纯系小鼠肺癌模型,免疫组化法检测细胞周期蛋白D1阳性表达。结果 Lewis肿瘤细胞在给药48 h,新型肽对肿瘤细胞的增殖具有明显抑制作用,与空白对照组比较差异显著(P<0.05);在连续给药21 d后,肿瘤体积明显缩小,抑制率为43.38%;细胞周期蛋白D1阳性表达明显降低,与空白对照组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论新型肽可能通过调节细胞周期蛋白D1的表达,诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抗肿瘤生长作用。

重组Osf2定向调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

目的研究成骨细胞特异性因子(Osf2)调控骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为成骨细胞(OB)的分子机制。方法用Percoll密度梯度离心法分离获得大鼠的MSCs,通过细胞免疫化学、免疫荧光、透射电镜及流式细胞仪等方法进行鉴定。构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Osf2,通过脂质体系统转染传代培养后的MSCs,用Northern Blot检测三种OB细胞外基质蛋白mRNA的表达情况。结果转染后的MSCs都表达OB特异性基质蛋白骨钙素、骨桥接蛋白和I型胶原。结论Osf2在转录水平定向调控MSCs分化为成骨细胞,可应用于骨质疏松、骨缺损等疾患的基因治疗。

Runx2参与调控Osterix启动子活性及其基因表达(英文)

尽管Runx2和Osterix都是成骨细胞分化途径中关键的转录因子,但是Runx2是否能够调控Osterix,还不为所知.研究发现,在非成骨细胞系,无论是间充质干细胞还是已分化的细胞,以及成骨细胞系中,Runx2都能诱导Osterix的表达.同时Runx2能够上调3.2kb人的Osterix基因启动子活性.进一步实验证明,在这一段启动子中存在Runx2功能性的结合位点.因而,实验结果有力地支持了这样一个假设,即Runx2参与了Osterix基因的表达调控.瞬时转染和荧光素酶双报告分析结果显示,在非成骨细胞中,Osterix明显上调2.3kb的Ⅰ型胶原蛋白启动子活性,但Runx2却不能.这样的差别暗示,在成骨细胞分化过程中位于Runx2下游的转录因子Osterix是刺激Ⅰ型胶原蛋白基因表达所必需的.

高糖和缺氧对体外培养视网膜M üller细胞VEGF表达的影响

目的 :观察体外培养兔视网膜 Müller细胞在高糖和缺氧条件下血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的变化。方法 :采用免疫细胞化学、原位杂交和ELISA方法对高糖和缺氧条件下体外培养兔视网膜 Müller细胞 VEGF的表达进行定性定量测定。结果 :高糖能刺激 VEGF表达 ,且通过转录水平调节 ,这种调节呈时间和剂量依赖性。 Co Cl2 能造成 Müller细胞不完全缺氧 ,刺激 VEGF的分泌。结论 :Müller细胞在高糖、缺氧条件下 VEGF表达增强 ,VEGF表达水平的升高可能是高糖及缺氧条件下促进糖尿病视网膜病变的因素之一。

模拟后路间盘摘除植骨与置融合器术L4-S1腰椎稳定性与粘弹性实验研究

设计研制了一种钛合金腰椎融合器 ,并进行生物力学测试。方法是取 18具新鲜成年男性L4 S1腰椎标本 ,处理成所需试样 ,分别进行前屈、后伸、左、右侧弯、左、右侧扭转、和轴向压缩实验 ,经统计学分析后自编程序拟合出载荷 位移曲线和扭矩 扭转角曲线。进行了粘弹性实验 ,方法是取 18具新鲜成年男性L4 S1腰椎标本 ,测定完整L4 S1(正常组 )、模拟后路间盘摘除植骨组 (对照 1组 )和模拟后路间盘摘除置入融合器组 (对照 2组 )L4 S1段腰椎的应力松弛和蠕变效应。得出了在恒应力、应变条件下应力、应变 时间曲线及数据。用回归分析的方法处理实验数据 ,得出了归一化应力松弛、蠕变函数及曲线 ,对后路间盘摘除植骨与置入纯钛融合器对脊柱稳定性的影响进行分析讨论。

高糖对视网膜Müller细胞碱性成纤维细胞生长因子表达及钙离子通道的影响

目的 :观察在高浓度葡萄糖条件下体外培养兔视网膜 Müller细胞碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblast growth factor,b FGF)的表达及其钙 (Ca2 + )通道的变化。方法 :采用免疫细胞化学及透射电镜方法鉴定体外培养的兔视网膜 Müller细胞 ;应用免疫细胞化学方法定性观察高糖条件下视网膜 Müller细胞 b FGF表达的变化 ;利用膜片钳技术观察高糖条件下 Müller细胞 Ca2 + 通道的变化。结果 :高糖可以刺激视网膜 Müller细胞表达b FGF,对 Ca2 + 通道无明显影响。结论 :高糖刺激 Müller细胞 b FGF的表达 ,而发挥促血管生成的作用 ,在此过程中 Ca2 +

乳鼠皮层神经元原代培养与观察

目的:通过原代培养乳鼠皮层神经元,为脑血管疾病的研究提供实验模型。方法:酶消化法原代培养出生1天Wistar乳鼠的皮层神经元,利用免疫细胞化学和免疫荧光方法进行鉴定。结果:培养的细胞贴壁生长,胞体饱满,突起较长。免疫细胞化学染色显示神经元特异性烯醇化酶阳性细胞达85%,免疫荧光显示胶质细胞酸性蛋白阳性细胞达15%。结论:酶消化法原代培养乳鼠皮层神经元是一种可靠、稳定的获得神经元的方法。