天山雪莲口服液对类风湿关节炎的治疗作用及其机制研究

目的:观察天山雪莲口服液(SIOL)对类风湿关节炎(RA)的治疗作用,并探讨其作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为健康对照组、阴性对照组、阳性对照组及SIOL低、高剂量组,10只/组。通过注射牛Ⅱ型胶原建立胶原诱导大鼠关节炎模型(CIA),健康对照组和阴性对照组灌胃生理盐水(2 ml/d),阳性对照组灌胃雷公藤多苷片[20 mg/(kg·d)],SIOL低、高剂量组分别灌胃SIOL(0.5 ml/d、2.0 ml/d),共给药28 d。给药期间每周测量并计算大鼠左后踝关节肿胀度;造模给药后采用HE染色观察大鼠关节滑膜组织病理形态表现;qPCR检测关节滑膜组织JNK、Bcl-2、Beclin-1、LC3 mRNA表达水平;Western blot检测JNK、p-JNK、Bcl-2、Beclin-1、LC3-Ⅱ相对蛋白表达水平。结果:与健康对照组相比,阴性对照组大鼠关节肿胀度明显加重(P<0.01),关节滑膜组织中JNK、Bcl-2、Beclin-1、LC3 mRNA表达均显著升高(P<0.01),关节滑膜组织中p-JNK、Bcl-2、Beclin-1、LC3-Ⅱ相对蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。与阴性对照组相比,阳性对照组及SIOL各剂量组大鼠关节肿胀度明显减轻(P<0.01),关节滑膜组织中JNK、Bcl-2、Beclin-1、LC3 mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01),关节滑膜组织中p-JNK、Bcl-2、Beclin-1、LC3-Ⅱ相对蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:SIOL对CIA大鼠具有治疗作用,其机制可能与抑制滑膜组织JNK/Bcl-2/Beclin-1介导的自噬通路激活有关。

白喉乌头对胶原诱导关节炎大鼠模型作用机制研究

目的探讨白喉乌头总生物碱、单体1(Delvestidine)、单体4(氨茴酰牛扁碱)对胶原诱导关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)大鼠CD11c^(+)树突状细胞(Dendritic cells,DCs)表面MHC-II分子表达的影响及作用机制。方法SPF级雄性SD大鼠60只,6~8周龄,体重(200±20)g,按照随机数字表法分为正常组、模型组、阳性药组、总生物碱组、单体1组及单体4组,每组各10只。除正常组给予生理盐水处理外,其余组大鼠经胶原诱导建立CIA大鼠模型,造模成功后,灌胃给药4周,用药期间每周测量左后足踝关节肿胀度、关节炎指数(Arthritis index,AI)评分;HE染色观察踝关节滑膜组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL 10)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平;免疫荧光双重染色法检测踝关节滑膜组织中CD11c^(+)DCs表面MHC-II分子的表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀度显著加重(P<0.01);与模型组比较,阳性药组、总生物碱组、单体1组和单体4组大鼠关节肿胀度明显减轻(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高,IL 4、IL-10水平均显著下降(P<0.05~0.01);与模型组比较,阳性药组、总生物碱组、单体1组和单体4组大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著下降,IL-4、IL-10水平均显著升高(P<0.05~0.01)。与正常组比较,模型组大鼠CD11c^(+)DCs表面MHC-II分子表达量明显升高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组、总生物碱组、单体4组大鼠CD11c^(+)DCs表面MHC-II分子表达量降低(P<0.05~0.01)。结论白喉乌头可能通过抑制CD11c^(+)DCs表面MHC-II分子的表达,抑制DCs分化与成熟,调节相关炎症因子的释放,显著改善CIA大鼠模型的关节症状及炎症。

雪莲口服液影响肠道菌群改善关节炎大鼠关节炎症及细胞因子表达的机制

目的:明确雪莲是否可以通过改变大鼠肠道菌群而改善关节炎症及细胞因子。方法:建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,经雪莲口服液治疗、肠道菌群衰竭后再治疗、移植肠道菌群(FMT),观察各组大鼠足爪肿胀度,ELISA检测各组炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),HE染色观察滑膜病理,16SrRNA检测肠道菌群。结果:雪莲组与雷公藤组较模型组大鼠血清IL-1β、IL-6显著降低(P<0.05),IL-10、TNF-α显著升高(P<0.01),关节肿胀度减轻(P<0.01),雪莲组肠道菌群较模型组更接近正常组;进行肠道菌群移植后,雪莲粪便组、雷公藤粪便组、正常粪便组以及正常大鼠灌胃雪莲粪便组大鼠关节肿胀度较模型粪便组明显好转(P<0.01),滑膜增生减少,炎症细胞浸润减少。去除肠道菌群干预后,经过雪莲治疗后,雪莲菌群衰竭组大鼠关节炎症较盐水菌群衰竭组差异无统计学意义。结论:雪莲口服液可以通过改变肠道菌群影响炎症因子,改善关节炎症。