华蟾素抑制胃癌细胞靶点PIM3的实验研究

目的评价华蟾素的有效成分丁硫磷对胃腺癌的抑制作用和可能的作用靶点。方法以胃腺癌AGS细胞为模型,用不同浓度(0、20、50μg/mL)的丁硫磷加以处理。采用非放射性细胞增殖法检测细胞活力,采用乳酸脱氢酶(LDH)活性试剂盒测定LDH活性。Hoechst/碘化丙啶(PI)染色和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/PI染色检测细胞凋亡,并用流式细胞仪进行分析。蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达水平。通过i TRAQ分析,确定丁硫磷处理后AGS胃腺癌细胞的PIM3表达基因。结果经20、50μg/mL丁硫磷处理胃腺癌AGS细胞24、48 h后细胞活性分别为(107.21±4.35)%、(96.12±3.87)%和(56.29±2.98)%、(64.27±3.91)%,显著低于0μg/mL丁硫磷[(120.31±2.35)%、(119.83±3.24)%](P <0.05)。20、50μg/mL丁硫磷处理胃腺癌AGS细胞后LDH水平分别为(297.83±13.24)、(412.32±27.98) U/mg,显著高于0μg/mL丁硫磷[(150.27±2.35) U/mg](P <0.05)。20、50μg/mL丁硫磷细胞凋亡率分别为(27.69±3.25)%、(43.78±6.58)%,显著高于0μg/mL丁硫磷[(1.08±0.29)%](P <0.05)。20、50μg/mL丁硫磷处理胃腺癌AGS细胞的Bcl-2蛋白表达水平(32.18±3.89、14.12±2.70)显著低于0μg/mL丁硫磷(85.46±5.12),而Bax蛋白表达水平(169.84±16.63、238.91±20.12)显著高于0μg/mL丁硫磷(96.32±6.57)(P<0.05)。20、50μg/mL丁硫磷处理胃腺癌AGS细胞后PIM3 mRNA表达(51.36±6.89、15.26±3.15)和PIM3蛋白(60.28±4.52、18.92±3.42)表达低于0μg/mL丁硫磷(120.31±17.28、120.07±13.54)(P <0.05);且50μg/mL丁硫磷的以上作用较20μg/mL丁硫磷更显著(P <0.05)。结论华蟾素对胃腺癌AGS细胞具有抗癌活性,且呈剂量依赖性,其可能的作用靶点为PIM3。

单一颈部切口微创食管切除术的初步应用

目的探讨单一颈部切口微创食管切除术治疗食管癌的可行性和安全性。方法2019年3月~2020年6月我科采用单一颈部切口微创食管切除术治疗食管癌18例,胸腔镜下游离食管和清扫淋巴结,全腹腔镜游离胃、清扫淋巴结并制作管状胃,经单一颈部切口取出标本,吻合食管与管胃。结果18例均顺利完成手术,手术时间252~391 min,平均301 min。术中出血量90~280 ml,平均160 ml。淋巴清扫(27.2±6.3)枚。术后肛门排气时间2~10 d,平均4 d。术后住院时间8~21 d,平均12.5 d。术后第1、2、3天疼痛视觉模拟评分(Visual Analogue Scale,VAS)分别为(2.6±0.3),(3.8±0.7),(3.1±1.1)分。术后3例吻合口漏,其中2例经介入治疗恢复,1例经延长胃管拔除保守治疗恢复。18例术后随访9~20个月,平均12个月,1例术后18个月复发,余17例无疾病进展。结论单一颈部切口微创食管切除术可行,安全。

液体活检在胰腺癌早期诊断中应用的研究进展

胰腺癌恶性程度极高,且缺乏典型的早期症状和高效的诊断方法,绝大多数患者在确诊时已丧失手术机会,预后极差。早期诊断对于改善胰腺癌预后至关重要,液体活检旨在通过检测各种体液中的肿瘤相关标志物,如循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA和外泌体等,达到胰腺癌早期诊断的目的。液体活检具有非侵入性、取样方便以及全面反映肿瘤异质性等优势,已展现出巨大的临床应用价值。因此,本文重点讨论液体活检在胰腺癌早期诊断中应用的研究现状、局限性及发展前景。

华蟾素通过下调PIM3的表达抑制高转移胃癌细胞的实验研究

目的:胃癌(GC)是全球第四大常见癌症。丁硫磷是华蟾酥的主要活性成分,从蟾蜍的皮肤和腮腺毒腺中提取,在体外具有抗癌活性。然而,丁硫磷是否对胃癌有抗癌作用尚不清楚。本研究旨在评价丁硫磷对GC的抑制作用。方法:以高转移性MKN28 GC细胞为细胞模型,研究华蟾素的抗癌作用。使用CCK-8测定细胞活力,LDH检测丁硫磷对细胞膜完整性的影响。Hoechst/PI双染色和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡,随后使用流式细胞仪进行分析。western blotting检测相关蛋白的表达水平。通过iTRAQ分析,确定丁硫磷处理后GC细胞的差异表达基因。结果:丁硫磷能抑制高转移性GC MKN28细胞的生长,破坏细胞膜,促进GC细胞凋亡。i TRAQ分析表明PIM3是丁硫磷素抗癌作用的分子靶点。研究还发现,PIM3基因敲除显著增强了丁硫磷对GC细胞的抗生长和促凋亡作用。相反,异位PIM3的表达明显抑制了丁硫磷的抗肿瘤活性。结论:华蟾素对高转移性的GC具有抗癌活性是通过下调PIM3表达而实现的。

妊娠合并胃癌9例临床特征分析

目的探讨妊娠合并胃癌的临床病理特征。方法回顾性分析2010年1月至2020年12月郑州大学第一附属医院收治的9例妊娠合并胃癌病人相关临床病理资料,并对母儿进行短期随访。结果主要症状有恶心呕吐(4例)、上腹痛(2例)、胸闷伴腹胀(2例)。6例CA19-9升高,其中5例同时合并癌胚抗原(CEA)升高。组织学类型以低分化腺癌(5例)和印戒细胞癌(4例)为主。常见转移部位为腹膜(4例)、卵巢(3例)。1例人表皮生长因子受体2(HER2)阳性。仅3例病人接受了根治性切除,术后采用SOX方案(奥沙利铂+替吉奥)化疗,6例晚期病人以奥沙利铂+紫杉醇或SOX方案化疗为主。结论妊娠合并胃癌缺乏特异性临床症状,CEA联合CA19-9可用于辅助晚期胃癌的诊断。制定治疗方案时应综合考虑孕周、肿瘤病理学类型、分期及病人意愿,以争取母儿获益最大化。

隐形切口在腹腔镜胃癌根治术中的应用

目的 探讨隐形切口应用于腹腔镜胃癌根治术中的可行性及安全性.方法 选择2018年7月至2018年10月于郑州大学第一附属医院行腹腔镜胃癌根治隐形切口术的患者69例,对其临床资料进行回顾性分析.所有患者均按D2+CME原则施行全腹腔镜胃癌根治术,标本切除后置入标本袋.近端胃癌、胃体癌、小弯侧胃癌及印戒细胞癌均行根治性全胃切除术+Roux-en-Y食管空肠吻合,胃窦癌行根治性远端胃大部切除+毕罗Ⅱ术式胃空肠吻合术.于耻骨上2 cm处做一长约4 cm的横形切口取出标本袋.观察患者术中、术后情况及随访情况.结果 69例患者均顺利实施了手术,无中转开腹或其他术式.其中,行腹腔镜下远端胃切除7例,行腹腔镜下全胃切除62例.本组患者手术时间(192.0±53.0)min,术中出血量(68.8±36.9)ml,术中淋巴结清扫(29.9±5.7)枚,术后下床活动时间(1.9±0.4)d,术后肛门首次排气时间(3.2±0.9)d,术后住院总时间(7.7±3.4)d,术后切缘细胞残留率为0.术后出现并发症4例,其中切口感染3例,吻合口瘘1例,给予保守治疗后均恢复出院,无其他并发症.术后均行住院复查或电话随访,所有患者均对美容效果满意.结论 腹部隐形切口应用于胃癌根治术安全可靠,且具有美容效果好等优点.

俯卧位胸内手工吻合在食管受累≥4 cm的食管胃结合部腺癌中的应用

目的探讨俯卧位胸内手工吻合治疗食管受累≥4 cm的食管胃结合部腺癌(adenocarcinoma of esophagogastric junction, AEG)的可行性。方法采用回顾性病例系列研究的方法,收集2019年3月至2020年12月期间,在郑州大学第一附属医院胃肠外科接受俯卧位完全微创食管胃胸内手工吻合的28例AEG患者的临床资料,分析手术情况和近期疗效等。结果28例患者均顺利完成手术,无中转开放手术。中位手术时间、中位消化道重建时间、中位术后住院时间分别为227.5(188~340)min、51(40~80)min、13(11~32)d。平均淋巴结清扫总数、平均近切缘长度分别为(27.5±3.8)枚、(5.3±1.4)cm,术后病理检查结果切缘均为阴性。术后并发症总发生率28.6%,其中吻合口并发症发生率7.1%(吻合口漏、吻合口狭窄各1例)、呼吸系统并发症发生率14.3%(胸腔积液2例、肺部感染1例、肺不张1例)、胃食管反流发生率7.1%(2例),并发症严重程度以Clavien-Dindo Ⅱ级、Ⅲa级为主。中位随访时间14个月,随访期间患者均存活,其中2例发生肝转移。结论俯卧位胸内手工吻合治疗食管受累≥4 cm的AEG在技术上是安全、可行的,能保证足够的淋巴结清扫范围和清扫数及近端切缘长度。