淋巴细胞恶性增殖病患者丙型肝炎病毒感染的研究

目的 :研究淋巴细胞恶性增殖性疾病 ( MPL D)患者丙型肝炎病毒感染情况及病毒基因型分布。方法 :用逆转录 PCR( RT- PCR)法对 76例 MPL D和 118例体检人群血清进行 HCV- RNA检测 ,同时用 Okamoto HCV基因分型法进行 HCV基因分型。结果 :76例 MPL D中 HCV - RNA阳性 10例 ( 13.16 % ) ,其中 2 1例非霍奇金淋巴瘤 ( NHL )中 2例阳性 ( 9.5 2 % ) ,39例多发性骨髓瘤 ( MM)中 7例阳性 ( 17.95 % ) ,16例急性淋巴细胞白血病( AL L )中 1例阳性 ( 6 .2 5 % ) ,118例体检人员中 1例阳性 ( 0 .85 % )。对 HCV感染病例 HCV分型发现 ,10例 HCV感染患者均感染 HCV- 型 ,其中 MM中 1例混合感染 HCV- 型 ,1例混合感染 HCV- 型。结论 :MPL D患者有较高的 HCV感染 ,以 MM的 HCV感染最高 ,HCV- 型是 MPL D患者

人急性白血病HTLV-I相关抗原和逆转录酶活性的初步研究

应用直接免疫金银染色法对41例初发急性白血病患者及27例对照者培养前后白血病细胞进行人类T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-Ⅰ)相关抗原测定,并对9例抗原阳性标本进行逆转录酶(RT)活性分析,结果:患者培养前后HTLV-Ⅰ相关抗原阳性检出辜为53.66％(22/41)和82.92％(34/41)(x^2=8.1098,P<0.01);阳性细胞平均百分率为8.45％±1.86％((?)±(?)％)和46.54％±4.53％(t=4.464,P<0.001),均有显著性差异。对照者均阴性。9例HTLV-Ⅰ相关抗原阳性标本RT活性随培养后抗原表达增加而增高(r=0.90,P<0.001)。提示人急性白血病细胞中含有与HTLV-Ⅰ有亲缘关系的逆转录病毒。

巨大骶骨骨巨细胞瘤患者MDT诊治报道

本文介绍1例巨大骶骨骨巨细胞瘤患者的多学科诊治过程。患者男性,24岁,因大便困难4个月,加重伴小便困难1周收治入院。骨盆影像学检查提示骶3以下椎体椎前巨大囊实性肿块,大小约16.1 cm×11.5 cm×15.4 cm,行病灶CT引导下穿刺活检病理报告示骶骨巨细胞瘤。临床分期为CampanacciⅢ期,初诊时骶骨肿瘤巨大,无法通过一期手术进行切除。经过多学科讨论后患者接受血管外科多次骶骨肿瘤血管栓塞术,在全麻下行腹主动脉球囊阻断下前后联合入路骶骨肿瘤切除内固定术,最终实现前后路的肿瘤切除。1年后开始行局部放疗,方案为设骶骨瘤区按D95包计划靶区(planning target volume,PTV)6 MV-X线DT45 Gy/24 F适形放疗。放疗24次。随访至术后26个月,患者KPS评分从术前的60分提高至90分,大小便功能基本正常,双下肢活动正常,日常生活基本满意。骨肿瘤(尤其是巨大的骶骨肿瘤)的多学科诊治具有重要意义,多学科诊治团队需常态化和专业化以实现患者的最大获益。

造血和淋巴组织肿瘤WHO分类形态学诊断——附571例应用体会

目的介绍造血和淋巴组织肿瘤WHO分类的应用体会,促进在我国的应用和普及。方法用血片,骨髓涂片、印片和切片(简称四片联检)加细胞免疫化学染色进行形态学诊断。结果按WHO的基本要求,近四年来诊断髓系肿瘤370例,淋系肿瘤201例。应用体会之一,开展四片联检,可显著提高WHO的形态学诊断水平,尤其是慢性骨髓增殖性疾病(MPD)和骨髓增生异常-MPD(MD-MPD)及伴骨髓纤维化的造血和淋巴组织肿瘤。体会之二,WHO的AML五分类中,第一类重现性染色体异常AML,形态学典型的M3、M2(原始细胞较大伴成熟特征或M2b)、M4Eo和M5,可提示这一类型并建议(分子)遗传学检查;第二类伴多系病态造血和第三类治疗相关AML,结合临床可以作出诊断;第四类不另作分类AML(M0、M1、M6和M7,以及不包括前述三类的M2、M4和M5),即仍按FAB诊断,还有形态学诊断的急性嗜碱粒细胞白血病、全髓增殖症伴骨髓纤维化和髓系肉瘤;第五类系列未明或双系AML,为形态学结合免疫表型诊断。体会之三,WHO分类的MDS八型,除5q-综合征外,以形态学为主要诊断,有核细胞量、原始细胞量和病态造血程度的评估是诊断和鉴别的根本指标。体会之四,WHO分类的MPD和MD-MPD,主要为形态学诊断,外周血细胞增多和骨髓增殖是MPD评估的最重要异常,骨髓增殖加病态造血是诊断MD-MPD的最有力证据。体会之五,ALL形态学诊断(尤其L1和L2)中,需要开展免疫化学染色,以区分B、T细胞;成熟B细胞肿瘤主要是形态学诊断。结论以WHO理念,摆正形态学与其他检查在诊断中的位置,按条件应用WHO分类的深度和广度,提高诊断水平以及对治疗和预后的评估力。

巨核细胞逸核和胞核胞质连体分离的形态学研究(英文)

为了观察巨核细胞逸核和胞核胞质连体分离的形态学变化,用光镜观察4例初诊血液病患者的血片、骨髓涂片和骨髓切片中巨核细胞形态特征。4例初诊血液病患者为1例原发性骨髓纤维化(PMF),1例骨髓增生异常综合征(MDS),1例急性粒细胞白血病部分成熟型(M2)和1例红白血病(M6)。结果显示:在4例患者骨髓象中均观察到多种病态巨核细胞,其中例A(PMF)和例D(M6)多为撕拉分离状的病态巨核细胞;例B(MDS)和例C(M2)多为脱核的或胞核胞质分离状的病态巨核细胞,胞体大或巨大,部分胞核远离母体,有的残留少量胞质成为小(或)淋巴样巨核细胞,细胞免疫化学染色可显示分离的胞核胞质。结论:巨核细胞存在逸核和(或)胞核胞质分离现象,提示巨核细胞在成熟中存在多核胞核分散向周边逸去的过程,甚至完全脱离母体;微小巨核细胞可能是由多小核巨核细胞的胞核连胞质分离或分割而成的部分。

粒细胞和巨噬细胞异常的特殊形态

目的 探讨几种粒细胞和巨噬细胞的特殊形态以及临床意义。方法 镜检分析血象和骨髓象中粒细胞和巨噬细胞特殊形态。 结果 在12年骨髓检查中发现五种比较特殊的细胞形态 ,分别为巨幼细胞性贫血中出现粒系细胞巨变和过度生成为特征 ,粟粒性结核中出现巨大的双核、多核伴空泡生成为特点的粒系细胞 ,肺吸虫病中的中性粒细胞出现密集的非特异性颗粒 ,巨细胞病毒感染中巨噬细胞吞噬大量中性粒分叶核粒细胞以及MDS患者中中性粒细胞核染质呈菊花样异常。结论 重视粒细胞和巨噬细胞特殊形态可为临床提供重要的诊断依据 。

心脑血管病和糖尿病相互合并与血浆凝血酶调节蛋白水平的变化

目的探讨脑梗死、脑出血、冠心病、高血压合并糖尿病对血浆凝血酶调节蛋白 (PTM)水平的影响。方法用ELISA法检测305例心脑血管疾患 ,其中脑血管病132例 (脑梗死81例 ,脑出血51例 ) ,高血压冠心病66例 ,糖尿病107例。健康对照组60例 ,其中献血员25人 ,学生12人 ,体检健康者23人 ,年龄12～77岁 ,平均38.6岁。结果60例健康人对照组PTM水平为(20.40±7.72)μg/L,糖尿病和高血压冠心病无合并症组PTM水平稍高 (23.44±6.33)μg/L和(23.00±7.13)μg/L,与对照组无显著性差异 (P>0.05) ,无合并症脑血管病组PTM水平 (30.51±14.13)μg/L则显著高于对照组 (P<0.01)。合并症各组中 ,合并糖尿病的PTM水平最低 ,合并肾病者PTM水平最高。合并肾病的各组 ,PTM水平均显著高于其他合并症组 :脑血管病合并肾病为(61.25±24.43)μg/L高于合并高血压冠心病 (32.12±12.35)μg/L和糖尿病 (31.37±12.06)μg/L,高血压冠心病合并肾病为(52.11±22.29)μg/L高于合并脑血管病 (31.78±12.28)μg/L和糖尿病 (28.72±9.58)μg/L,糖尿病合并肾病为(40.26±11.98)μg/L高于合并脑血管病 (31.63±8.95)μg/L ,P<0.01;高血压冠心病和糖尿病合并脑血管病时PTM水平均高 (31.78±12.28)μg/L和(31.63±8.95)μg/L。

909例骨髓缺铁及其血液学异常探讨

目的 了解骨髓检查病例的缺铁 (ID)率及其血液学异常的若干特点。方法 每例骨髓检查的初诊患者除了常规外 ,均作骨髓可染铁染色 ,判断骨髓ID并按标准进行缺铁性贫血 (IDA)和血液病伴ID等的诊断。结果 近 7年中诊为骨髓ID 90 9例 ,占同期检查病例的 14 .7%。其中单独诊断为IDA 5 13例 ,占ID的 5 6 .4 % ;血液病伴ID(主要见于特发性血小板减少症和脾功能亢进 ) 2 82例 ,占ID的 31.0 % ;其他疾病ID 114例 ,占12 .5 %。分析血液学检查 ,IDA、血液病伴ID和其他疾病ID的患者 ,在贫血率、血红蛋白浓度、红细胞指数(MCV、MCH、MCHC和RDW )及红系细胞形态学方面各有不同程度的变化。结论 了解骨髓ID及其血液学异常 ,有助于提高ID病理的认识 ,以及IDA与血液病伴随ID的主次诊断。

脂肪酸合成酶抑制剂抑制人多发性骨髓瘤细胞增殖及诱导其凋亡的研究

目的明确脂肪酸合成酶(FAS)在人多发性骨髓瘤(MM)细胞中的高表达;探讨 FAS 抑制剂抑制 MM 细胞增殖及诱导其凋亡的机制。方法通过 RT-PCR 方法检测 FAS 在 MM 细胞系U266、RPMI8226细胞中的表达;以 MM 细胞系 U266细胞为模型,MTT 法观察 FAS 抑制剂浅蓝菌素(cerulenin)对 U266细胞增殖抑制率;以流式细胞术检测经 cerulenin 处理后 U266细胞 Annexin V 的表达及细胞周期变化。结果 MM 细胞系 U266、RPMI8226细胞均有 FAS mRNA 的高表达,而健康献血员外周血单个核细胞(PBMNC)中不表达 FAS mRNA;cerulenin 对 U266细胞增殖有显著的抑制作用,并呈剂量-效应相关;20μg/ml 的 cerulenin 作用于 U266细胞12h,细胞早期凋亡率为56.9%,24h 细胞早期凋亡率为69.3%,而对照组分别为4.3%和1.8%(P<0.01);细胞周期 DNA 分析发现,20μg/mlcerulenin 作用于 U266细胞12h,S 期细胞从对照组的9.7%上升至20.3%,作用24h,S 期细胞上升为29.8%。结论 FAS 在 MM 细胞中高表达;FAS 抑制剂可抑制 U266细胞的增殖;DNA 合成阻止在 S期,其抑制增殖的作用可能是通过促进 U266细胞早期凋亡;FAS 可能是一个潜在的抗 MM 的靶位。

浅蓝菌素改变多发性骨髓瘤U266细胞凋亡相关基因表达谱的研究

目的研究浅蓝菌素改变多发性骨髓瘤（MM）细胞系U266细胞凋亡相关基因的表达谱变化，进一步明确浅蓝菌素引起U266细胞凋亡的分子机制。方法用SuperArray cDNA基因芯片，分析U266细胞在浅蓝菌素（20μg／ml）处理前后细胞凋亡相关基因的表达谱变化，对Rip2、caspase9及TRAF2代表性主要差异基因进行半定量RT-PCR进行验证。结果浅蓝菌素处理U266细胞12h后，与空白对照组比较，在研究的96个基因中，共有44个细胞凋亡相关基因表达改变较明显，其中表达上调2倍以上的基因41个，表达下调2倍以上的基因3个。caspase9表达的显著上调，说明线粒体途径在凋亡中起了主要作用；TRAF2基因表达的变化，提示在凋亡过程中有细胞核内转录因子的参与。结论浅蓝菌素引起U266细胞的凋亡有死亡受体信号通路和死亡受体非依赖的信号通路共同参与，线粒体途径在凋亡中起了主要作用，细胞核内转录因子参与了浅蓝菌素引起U266细胞的凋亡。

CD41标记微小巨核细胞染色法及其临床应用价值探讨

微小巨核细胞是一种病态巨核细胞，胞体直径〈15μm，胞核大小如淋巴细胞，胞质量少，常伴血小板的生成^[1]。瑞特-姬姆萨染色微小巨核细胞常与原始巨核细胞、淋巴细胞等混淆，漏检率高，而细胞免疫化学标记的CD41染色易于辨认，可以显著提高微小巨核细胞的检出率^[2]。

骨髓涂片和切片中的巨核细胞多形性改变在慢性骨髓增殖性疾病中的诊断意义

目的探讨骨髓涂片和切片中巨核细胞多形性改变在慢性MPD（CML-CP、ET、PV及PMF）中的诊断意义。方法182例MPD患者采用骨髓抽吸-活检双标本同步取材，获取骨髓涂片和切片标本。骨髓涂片行瑞氏-姬姆萨染色和CD41免疫组织化学染色，骨髓切片行苏木素-姬姆萨-酸性品红染色。将涂片和切片中的巨核细胞多形性形态定义为5类，分别为Ⅰ型（包含型）；Ⅱ型（少分叶核型）；Ⅲ型（巨大多分叶核型）；Ⅳ型（小核固缩型）和Ⅴ型（脱落型）。骨髓涂片和切片中的巨核细胞簇分别计为未见巨核细胞簇状分布（0）；小于6个的小簇巨核细胞组成为主（＋1）；至少6个以上的大簇巨核细胞组成为主（＋2）3种情况。同步分析骨髓涂片和切片中的各型巨核细胞多形性变化以及巨核细胞簇的检出率。结果CML—CP组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和正常型的巨核细胞在骨髓涂片中的检出率分别为（3．73±3．84）％、（14．19±7．62）％、（5．99±4．67）％、（34．37±10．79）％、（9．45±6．87）％及（32．28±7．67）％，在切片中的检出率分别为（3．13±2．30）％、（12．61±9．28）％、（4．94±4．27）％、（35．26±9．63）％、（9．47±5．89）％及（34.58±6．81）％，两者差异无统计学意义（t值分别为0．524、0．510、0．645、0．239、0．011、0．869，P均〉0．05）。ET组Ⅰ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为（6．17±2．89）％，明显高于骨髓切片的（2.42±1．28）％，差异有统计学意义（t=7．183，P〈0．01）；Ⅴ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为（6．28±3．34）％，明显低于骨髓切片的（10．18±4．03），差异有统计学意义（t=3．940，P〈0．01）；其余各型（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和正常型）差异无统计学意义（t值分别为0．079、0．122、1．643、1．638，P均〉0．05）。PV组Ⅴ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为（6．55±4．11）％，明显低于骨髓切片的（10．30±3．34）％，差异有统计学意义（t=2．351，P〈0．05），其余各型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和正常型）差异无统计学意义（t值分别为1．635、0．301、0．132、0．704、0．681，P均〉0．05）。PMF组Ⅳ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为（13．05±5．24）％，明显低于骨髓切片的（29．14±8．72）％，差异有统计学意义（t=5．245，P〈0．01）；正常型巨核细胞在骨髓涂片检出率为（33．58±14．39）％，明显高于骨髓切片的（23．01±7．96）％，差异有统计学意义（t=2．132，P〈0．05），其余各型（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ型）差异无统计学意义（t值分别为0．787、0．646、2．062、0．869，P均〉0．05）。CML．CP组和PV组中骨髓涂片和切片中巨核细胞簇检出率差异无统计学意义（χ^2=2．772，P〉0．05），均以小簇检出为主。ET组中骨髓涂片中小簇状分布的巨核细胞簇的检出率明显高于切片，而大簇状分布的巨核细胞簇检出率明显低于切片（r=13．748，P〈0．01）。PMF组中骨髓涂片无巨核细胞簇的检出率明显高于切片，而大簇状分布的巨核细胞簇的检出率明显低于切片（χ^2=18．741，P〈0．01）。结论骨髓涂片与骨髓切片同样可以观察到巨核细胞多形性改变，通过仔细观察巨核细胞多形性改变，我们认为对MPD的分型和鉴别诊断具有一定的参考价值。

骨髓印片在骨髓细胞学检验中的应用价值

目的 研究骨髓印片在血液病诊断中的应用价值.方法 收集2002年1月至2008年6月同步骨髓涂片、印片和切片检查的3024例初诊血液系统疾病患者（男1667例,女1357例,年龄7～82岁,中位年龄55岁）的骨髓标本重新阅片,以切片有核细胞量为标准评估印片与涂片的指标性能,并以临床汇总诊断为依据,比较骨髓印片、涂片和切片的诊断符合率.选取79例浸润性淋巴瘤、114例浆细胞骨髓瘤（PCM）患者骨髓标本,对肿瘤细胞在印片与切片中的浸润方式进行等级相关分析.结果 骨髓印片含较明显的造血区和非造血区,细胞基本保留了完整的形态学结构.骨髓印片的有核细胞量评估性能优于涂片（P〈0.05）而与切片相近（P〉0.05）.印片对脾功能亢进（130例）、骨髓转移癌（67例）、伴原始细胞增多难治性贫血（27例）、骨髓增殖性肿瘤（174例）和PCM（94例）的诊断符合率高于涂片（分别为96.9%比80.7%、91.0%比76.1%、92.6%比81.5%、92.5%比76.4%、97.8%比92.6%,均P〈0.05）,对巨幼红细胞性贫血（69例）、急性髓细胞白血病亚型（104例）、单系和多系增生异常难治性血细胞减少（分别为15例和22例）、淋巴浆细胞性淋巴瘤（12例）的诊断符合率高于切片（分别为100%比84.0%,91.3%比74.0%,86.7%比60.0%,90.9%比72.7%,66.6%比50.0%,均P〈0.05）,对骨髓增生异常-骨髓增殖性肿瘤（26例）的诊断符合率（96.2%）高于涂片（76.3%,P〈0.05）和切片（78.2%,P〈0.05）.浸润性淋巴瘤与PCM患者骨髓印片和切片中肿瘤细胞浸润方式具有良好的相关性（r=0.90,r=0.78,均P〈0.05）.结论 骨髓印片兼有涂片和切片的特征.印片评估有核细胞量优于涂片,也可预测切片中肿瘤细胞浸润的某些方式.印片单个核细胞的形态学清晰度优于骨髓切片,对主要依据形态学进行的诊断具有明显优势.