乳制品行业产品质量监管问题探究

随着我国社会经济的发展与国民生活水平的不断提高,群众对生活有更高的享受追求。从过去的饮食只为吃饱,到现在对食品的营养价值有了更多、更高的要求。乳制品的种类以及销量随之不断增多。而对乳制品的要求也从初期的追求口味、样式、新奇,到现在更注重奶源以及生产质量的安全性,绿色生产成为行业中市场营销主要的营销标签。本文从法律视角探讨了乳制品生产质量安全问题及主体责任。结合国外的乳制品质量安全监管体制及经验,对我国乳制品质量安全监管不到位等问题进行了分析并提出了建议。

miR-125a-5p通过GSK-3β/Snail信号通路抑制乳腺癌细胞的上皮-间充质转化

目的:探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)通过GSK-3β/Snail信号通路对乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:RT-qPCR检测人正常乳腺上皮细胞与乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量,同时检测miR-125a-5p质粒在人乳腺癌MDA-MB-231细胞中的转染效率;趋化运动实验与Transwell侵袭实验检测趋化运动能力和侵袭能力;Western blot检测EMT相关标志物的变化,同时检测磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK-3β)的蛋白水平及Snail的转核情况。结果:乳腺癌细胞中miR-125a-5p的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P<0.05);miR-125a-5p在转染miR-125a-5p质粒的MDA-MB-231细胞中表达水平明显增高;MDA-MB-231细胞的趋化运动能力在表皮生长因子(EGF)浓度为10μg/L时最强;在EGF刺激下,与MDA-MB-231/NC细胞组相比,MDAMB-231/miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显降低,上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)表达量升高,波形蛋白(vimentin)和p-GSK-3β的蛋白水平明显降低,同时Snail转核受到明显抑制;与MDA-MB-231/miR-125a-5p+Con细胞组相比,MDA-MB-231/miR-125a-5p+GAB2细胞组的侵袭能力明显增强,E-cadherin表达量降低,vimentin和p-GSK-3β的蛋白水平明显升高,同时促进Snail转核。结论:miR-125a-5p可通过GSK-3β/Snail信号通路抑制乳腺癌细胞的EMT,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭能力。

miR-504靶向CHD1L抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制

目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P <0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P <0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P <0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P <0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。

图式理论指导“英美概况”教学的探索

针对传统"填鸭式"教学的弊端,介绍了运用建构主义的图式理论指导"英美概况"课程教学的做法。

时间与空间交融的多维画卷——济慈《秋颂》与普桑《四季》

本文对济慈颂诗《秋颂》中的空间转换与时间流淌的交织与相融进行了分析,指出济慈借助自己对语言的娴熟驾驭,突破了莱辛基于模仿手段和符号的不同对诗歌与绘画所作的严格区分,以诗意的语言绘制了一幅赋形与写意绝不输于普桑《四季》的层次鲜明、意象丰富的巨幅自然画卷。

浅析乔伊斯《死者》中的心象性形象和顿悟现象

乔伊斯素以意识流技巧的精湛运用而被誉于现代小说的伟大先驱,而他的短篇小说也同样堪称英语文学中的经典。本文试从《死者》入手,窥一斑而见全豹,浅析乔伊斯小说中的心象性形象和顿悟现象。

MiR-186-5p通过靶向调控RAB2A在乳腺癌细胞阿霉素耐药性中的逆转作用机制

目的探讨miRNA-186-5p在乳腺癌细胞阿霉素耐药性逆转作用中的分子机制。方法采用阿霉素诱导人乳腺癌细胞系MCF-7,建立阿霉素耐药性细胞株,命名为MCF-7/ADR;采用双荧光素酶实验检测miR-186-5p与RAB2A的靶向结合情况;采用qRT-PCR和Western blot分别检测细胞中miR-186-5p、RAB2A mRNA的表达及RAB2A蛋白的表达情况;特异性上调MCF-7/ADR中的miR-186-5p,下调MCF-7中的miR-186-5p后,采用CCK-8和Western blot分别检测乳腺癌细胞增殖情况以及RAB2A蛋白的表达;采用Western blot和CCK-8分别检测共转染后,细胞增殖情况的变化及PI3K/Akt信号通路的激活情况。结果双荧光素酶实验结果显示,RAB2A是miR-186-5p的直接靶点;qRT-PCR结果显示,在MCF-7/ADR细胞中miR-186-5p mRNA表达明显下调,而RAB2A mRNA表达没有明显变化,RAB2A的蛋白表达明显上调。特异性上调MCF-7/ADR中的miR-186-5p,其增殖能力明显下降,RAB2A蛋白的表达明显下调;下调MCF-7中的miR-186-5p,其增殖能力明显增加,RAB2A蛋白的表达明显上调。Western blot和CCK-8结果显示,过表达miR-186-5p使PI3K/Akt信号通路表达明显减弱,且上调RAB2A逆转了上调miR-186-5p所致的增殖能力的减弱。结论 miR-186-5p通过靶向调控RAB2A,经PI3K/Akt信号通路调控乳腺癌细胞的阿霉素耐药和增殖。

消费与建构:济慈《海披里安》系列中的埃及文化浅析

济慈一生不曾离开欧洲,但他的诗歌中却有着鲜明的埃及文化的痕迹。他笔下的埃及文化再现了当时对外征伐和考古发现的文学或艺术,又是基于想象将前者与自己一直沉浸其中的希腊文化融合的产物。从英国展出的艺术品与《海披里安》和《海披里安的覆亡》之间的形象联系来考察济慈对埃及文化的消费与建构。

Raptor通过上皮-间质转化促进乳腺癌的侵袭与转移

目的探讨Raptor在乳腺癌侵袭与转移过程中的作用。方法采用Western blot检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况。应用小干扰RNA技术下调乳腺癌细胞MDA231中Raptor的表达量,同时将过表达质粒转入乳腺癌细胞MCF-7中,应用Western blot法检测转染后各组细胞中上皮性钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;应用Transwell体外侵袭实验检测转染后各组细胞的侵袭能力;应用细胞核质分离实验检测转染后各组细胞中Snail蛋白的转核情况。结果MCF-7细胞中Raptor蛋白的表达量明显低于MDA231细胞中的表达量;转染后,与对照组Scr/MDA231相比,siRaptor/MDA231组中Raptor蛋白的表达量明显降低,Vimentin蛋白表达量降低,而E-cadherin蛋白表达量升高;与对照组MCF-7/Con相比,MCF-7/Raptor组中Raptor蛋白的表达量明显升高,并伴有Vimentin蛋白表达量升高,而Ecadherin蛋白表达量降低。siRaptor/MDA231细胞组中穿过Matrigel小室的细胞数量明显减少(P<0.05);MCF-7/Raptor细胞组中穿过Matrigel小室的细胞数量明显升高(P<0.05)。细胞核质分离实验结果显示,siRaptor/MDA231组中Snail蛋白表达量较Scr/MDA231组中明显降低;MCF-7/Raptor组中Snail蛋白表达量较MCF-7/Con组中明显升高。结论 Raptor能够促进乳腺癌EMT的发生,对乳腺癌的侵袭与转移有重要作用。

miR-424通过结合ARK5 mRNA 3'-UTR抑制胶质瘤细胞侵袭

前期的研究证明,人腺苷酸活化蛋白激酶5(ARK5)通过Gab2-Akt-ARK5通路,促进胶质瘤的侵袭。然而,ARK5的调节机制尚不清楚。本研究旨在探讨miR-424是否通过与ARK5 mRNA结合,进而影响胶质瘤侵袭。通过Targetscan找到与ARK5的3'-UTR区互补结合的microRNA(miR-424)。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胶质瘤细胞系中miR-424表达水平,发现3种胶质瘤母细胞(高级别胶质瘤细胞)株中,miR-424表达量均不同程度低于低级别胶质瘤H4细胞株。miR-424及miR-424抑制剂质粒转染胶质瘤细胞系H4、LN-229并结合蛋白质印迹法显示,miR-424可负向调控ARK5蛋白表达。qRT-PCR显示,在胶质瘤细胞内过表达miR-424后,ARK5mRNA无显著变化,提示miR-424在翻译水平影响ARK5蛋白表达。Transwell侵袭实验显示,过表达miR-424导致胶质瘤细胞体外侵袭能力明显减弱。双荧光素酶基因报告检测显示,miR-424能与ARK5 mRNA的3'-UTR结合,抑制荧光素酶活性。上述结果提示,miR-424可以结合ARK5mRNA的3'-UTR而抑制ARK5蛋白翻译,从而抑制胶质瘤细胞侵袭。

miR-125a-5p通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭与转移

目的探讨miR-125a-5p抑制乳腺癌细胞侵袭与转移的潜在机制。方法采用实时荧光定量PCR检测组织及细胞中miR-125a-5p的表达量;利用瞬时转染技术将过表达质粒转染到MDA231中,Transwell侵袭实验检测miR-125a-5p对各组细胞侵袭的影响;Western blot检测各组细胞Akt的磷酸化情况,以及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9的表达量。结果通过临床标本的相关检测发现,miR-125a-5p在乳腺癌组织中的表达量明显低于癌旁相对正常组织,并且与淋巴结转移等有关。体外细胞培养实验发现,过表达miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显降低,Akt的磷酸化明显减弱,并且MMP-2和MMP-9表达量下降;而同时过表达GRB相关蛋白2(GRB-associated binding protein2,GAB2)和miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显增强,Akt的磷酸化明显增强,并且MMP-2和MMP-9表达量明显升高,揭示了GAB2和miR-125a-5p共同通过PI3K/Akt通路影响MMP-2和MMP-9的表达。结论 miR-125a-5p能够通过PI3K/Akt/MMP信号通路,抑制乳腺癌细胞的侵袭与转移。

济慈“消极感受力”与艾略特“非个性化”之比较研究

约翰·济慈作为浪漫派诗人中的一员,其诗歌及书信中所体现出的诗学理论,尤其是他的"消极感受力"理论备受评论界关注。不少评论者看到了该理论的现代性,认为其与现代派大师艾略特的"非个性化"理论具有相通之处。但将两者理论简单地等同起来的作法却颇为粗率。

邓恩:徘徊于宗教与科学之间的灵魂——“敬神十四行诗”浅析

英国17世纪的著名诗人约翰·邓恩常被视为玄学派的鼻祖,其诗歌比喻奇特,意象新奇,其对爱情、宗教与死亡的等主题不同寻常的深刻阐释在当时及后世都是耐人寻味的。本文试从邓恩的"敬神十四行诗"入手,浅析邓恩对于英国国教与天主教、科学与宗教等问题的彷徨与犹疑态度。

《民法典》背景下离婚损害赔偿制度的法律适用及完善探析

离婚案件中离婚损害赔偿制度从出台以来便一直争议不断,在司法实践中存在着损害赔偿法定情形界定狭窄、举证责任分配不均、诉讼程序启动困难、精神损害赔偿标准不一、承担责任主体受限等一系列的适用难题。性质上,离婚损害赔偿与夫妻间侵权责任虽彼此独立但存在一定交叉。《民法典》一千零九十一条新增的“其他重大过错”的范围也应以是否严重违反家庭义务或家庭伦理,以至于威胁到共同生活的可能性作为判断标准。司法实践中,离婚损害赔偿制度存在亟须进一步规范的法律适用的疑难问题,因此,需要从各个角度有针对性地对相关问题进行完善。