女贞果实过氧化物酶的纯化及热稳定性研究

为探讨过氧化物酶在女贞果实发育中的作用,经过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100、DEAE-纤维素离子交换层析分离,从女贞果实中分离提纯过氧化物酶(POD),纯化倍数为48倍,回收率为13.3%。该酶的比活力为1 167.15 U/mg蛋白,最适pH为6.5,对H2O2的Km值为3.85 mmol/L,对愈创木酚的Km值为6.2 mmol/L,最适温度为40℃,热稳定性较好,55℃以下不易失活。其活性受到MnSO4明显抑制。

地震伤员外科救治医护人员的压力水平和特质应对方式

目的:探讨在地震灾害发生后的早期,救治伤员的外科医护人员的压力水平及特质应对方式。方法:在汶川大地震后第14天,方便选取成都市参加收治地震伤员的某医院外科医护人员37名,同期选取某医院精神科医护人员44名为对照组,用自制地震相关问题筛查表、心理健康自评问卷及特质应对方式问卷进行测查。结果:外科医护人员的心理健康自评问卷和消极应对方式因子得分均高于对照组[(9.3±4.7)vs.(3.2±3.9),(29.8±6.2)vs.(26.1±7.1),均P<0.05];外科医护人员的心理健康自评问卷得分与消极应对因子得分呈正相关(r=0.50,P=0.002);外科医护人员年龄与急性应激水平正相关(R2=0.168,P=0.012)。结论:震后外科医护人员有较高水平的急性应激反应,尤其以年长者、具有消极应对倾向者为甚,建议加强医疗资源的合理调配和心理知识宣传,以提高外科医护人员自身心理健康水平。

一种具有热滞活性的女贞叶质外体过氧化物酶

采用浸出离心法从女贞叶中分离的质外体蛋白,约占叶片可溶蛋白的1.63%,其中的质外体过氧化物酶占叶过氧化物酶(POD)总酶活性的3.14%。以凝胶过滤和离子交换层析分离纯化得到一分子量为62 kDa的质外体过氧化物酶,其对H_2O_2的表观K_m值为1.3 mmol·L^(-1),表观V_(max)值为189.33 U·mg^(-1)(蛋白);对愈创木酚的表观K_m值为1.78 mmol·L^(-1),表观V_(max)值为215.26 U·mg^(-1)(蛋白)。在蛋白质浓度为10 mg·mL^(-1)时,其热滞活性为0.332℃。此种蛋白的酸性氨基酸含量和亲水性氨基酸含量较高,类似于沙冬青和黑麦的抗冻蛋白。

超声光散射成像技术在早期乳腺癌诊断中的应用价值

目的探讨超声光散射成像(DOT)技术在早期乳腺癌诊断中的应用价值。方法对126例乳腺癌患者病灶(直径<1 cm)行超声DOT和常规超声检查,以术后病理结果为金标准,进行对比分析。结果超声DOT和常规超声对乳腺病灶的诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性分别为92.68%、81.82%、90.48%、85.71%、88.88%和85.37%、77.27%、87.50%、73.91%、82.54%。超声DOT和常规超声与病理结果的一致性检验Kappa值分别为0.753和0.651。超声DOT和常规超声诊断乳腺癌的ROC曲线下面积分别为0.873和0.813。结论超声DOT对乳腺癌的诊断价值较常规超声高,作为一种功能性检测技术,超声DOT对早期乳腺肿瘤的诊断有重要临床价值。

单侧Forsus矫治器治疗安氏Ⅱ类亚类错效果分析

目的分析单侧Forsus矫治器治疗安氏Ⅱ亚类错畸形患者的临床效果。方法 23例安氏Ⅱ类亚类错患者,在直丝弓固定矫治器排齐整平上下牙列后,患侧单侧戴用Forsus矫治器。同时选择27例未治疗的安氏Ⅱ类亚类错患者作为对照组。在治疗前、治疗后拍摄X线头颅侧位片,分别测量和分析牙齿、骨骼和软组织的各项指标。结果 Forsus矫治器可矫正安氏Ⅱ类亚类错畸形,在矢状方向上后移单侧上颌磨牙并前移单侧下牙列,在水平方向上纠正中线不齐,牙齿移动差异有统计学意义(P<0.05)。结论单侧Forsus矫治器可产生显著的牙齿和软组织改变,能有效治疗安氏Ⅱ类亚类错畸形。

穿透性Sox2蛋白的质粒构建及功能鉴定

目的构建具有细胞性穿透性的9R-Sox2蛋白的重组质粒,使其在293T细胞中表达,并对所表达的9R-Sox2蛋白的功能进行鉴定。方法从小鼠胚胎干细胞中扩增Sox2基因,并且在其N端加上9个精氨酸短肽,此融合基因连接到pPYCAG载体上,pPYCAG-9R-Sox2和pPYCAG分别转染到293T细胞中。3 d后,对转染细胞用嘌呤霉素筛选,1周后筛选得到阳性克隆细胞株,对其进行细胞免疫荧光鉴定。表达9R-Sox2蛋白的细胞株进行裂解,取细胞裂解液加入至小鼠胚胎成纤维细胞的培养基中进行通透。48 h后,小鼠胚胎成纤维细胞进行细胞免疫荧光检测,并提取蛋白Western blot检测PCNA表达。结果用Sox2抗体进行细胞免疫荧光鉴定,结果均显示所有细胞表达9R-Sox2。在细胞裂解液处理的成纤维细胞,细胞免疫荧光结果显示9R-Sox2蛋白定位在细胞核,表明9R-Sox2构建和翻译正确。同时经含9R-Sox2的细胞裂解液处理的成纤维细胞,PCNA表达明显上调。结论成功构建表达9R-Sox2融合蛋白的pPYCAG-9R-Sox2重组质粒,并证明具有细胞通透及促细胞增殖功能。

汶川大地震后外科医护人员急性应激水平相关因素分析

目的探讨在地震灾害发生后的早期,影响外科医护人员的急性应激水平相关因素。方法用自编一般情况调查表、自编相关问题筛查表、灾害自评量表(SRQ-20)及特质应对方式问卷(TCSQ)在震后第14天对37名汶川地震余震区的参加的外科医护人员进行问卷调查,同期随机选取同地区未参加紧急救治的其他外科医护人员43人作为对照组,并对调查结果进行统计描述、方差分析、相关分析和多元逐步回归分析。结果职业因素与性别因素比较,职业为主效应;SRQ-20总分与消极应对因子分呈显著负相关;年龄、职业、消极应对因子分可预测急性应激水平的高低。结论震后参加救治的外科医护人员有较高水平的急性应激反应,尤以护士为甚,年龄越大,应激水平越高,消极的应对方式会带来更高水平的应激反应。建议加强心理知识的宣传,避免过多的使用消极的应对方式,尤应注意外科医护人员特别是护士的心理健康水平变化,合理调配医疗资源,以提高其自身心理健康水平。

离子吸附型稀土找矿及研究新进展

21世纪以来由于稀土资源的战略地位不断提升,全球对稀土的供需变化和价格波动极为关注,并加大了稀土的勘查和开发程度。离子吸附型稀土(iRee)资源因轻重稀土元素配分齐全,且不需要通过矿物分解的方式来分离不同的稀土元素,成为近十多年全球稀土找矿和研究的热点。iRee矿产是我国的优势资源,已有40多年的开采历史,为全球稀土产业尤其是重稀土产业做出了巨大的贡献。近年来,项目组在江西、广西和云南等省区发现了一批矿产地,矿床的分布范围已从我国南方的丘陵地带扩大到高海拔(云南)和高纬度(安徽和浙江)地区,从亚热带气候扩大到热带气候,如越南、缅甸、泰国、马达加斯加及智利等国家。我们的研究继续丰富了iRee成矿"八多两高一深"的认识,即:多类型、多岩性、多期次、多层位、多模式、多标志、多因继承、多相复合,高海拔、高纬度及大深度,新矿床的发现也不断为此认识提供实例。同时,本文对亚热带和热带地区的花岗岩风化壳、华南不同岩性(花岗岩、火山岩和浅变质火山-沉积岩)以及不同稀土配分类型(LREE和HREE型)的iRee矿床进行了对比研究。目前,国内的iRee矿床无论从规模和品位,还是母岩的多样性和稀土配分的全面性都优于国外的。然而,我国长期仍无法摆脱矿山及周边环境污染和优势资源过度消耗的现状。今后,寻找经济价值大的iRee矿床是找矿的重要方向。

PBL教学法在肿瘤放射治疗学临床实习中的应用

目的探讨PBL教学法在肿瘤放射治疗学学生临床带教中的应用效果。方法将2016年2~6月进入放射治疗科实习的98名学生随机分为观察组和研究组,研究组采用PBL教学法进行带教,对照组采用传统临床带教模式,实习结束对两组学生学习效率的提高和对课程满意度进行比较。结果研究组学习效率提高及对课程的满意度明显高于对照组(P<0.05)。结论 PBL教学法能够有效提高肿瘤放射治疗临床实习学生的学习效率及对课程的满意度,达到良好的教学效果。

论坛一:发展绿色建筑,共筑中国明日之家

2013年10月23日至24日，由住房和城乡建设部住宅产业化促进中心主办、保障性住房建设材料部品采购信息平台与《城市开发》杂志社协办的“2013中国房地产业转型与住宅产业现代化暨绿色建筑新技术新材料发展趋势交流会”在北京国家会议中心如期召开。会议期间，题为“发展绿色建筑，共筑中国明日之家”和“住宅产业现代化与成品住宅发展新趋势”的两个互动论坛将会议推向了高潮。本刊分别摘录了两个论坛的部分观点，以飨读者。

“生活即教育”——浅论高中思想政治课生活化模式应用

在"生活即教育"理念下让"教育回归生活",体现高中政治知识来源于生活的本质特征,才能让学生用政治思想充实自己头脑,在面对生活问题时更好使用思想政治知识去解决。但在实际使用过程中,受应试教育与传统教学方式的影响,"生活教育"开展浮于表面,流于形式,并未有效生活与教育结合起来。针对此特从高中思想政治教学现状与不足入手,讨论生活教育在高中思想政治教育中应用的意义,最终结合教学实践提出针对性的"生活教育"策略,希望研究能够促进高中思想政治教育的发展。

ELISA高通量筛选PIM靶向抑制剂的研究

背景与目的:Pim家族是具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的原癌基因,包括Pim-1、Pim-2、Pim-3。研究发现,Pim能够抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,导致肿瘤发生。本研究利用ELISA反应原理建立高通量筛选体系,对Pim抑制剂进行筛选,为药物的应用和解决恶性肿瘤临床治疗的难题提供研究基础。方法:通过计算机辅助药物设计的手段,以蔓生百部碱母核三环酰胺作为核心结构合成系列衍生物;利用Pim重组蛋白和Bad重组蛋白可以与Ni2+特异性结合的亲和层析原理进行重组蛋白的纯化精制;利用ELISA方法,通过Pim激酶磷酸化促凋亡蛋白分子Bad在112位丝氨酸的反应,建立筛选Pim靶向抑制剂的体系。结果:0.01 mmol/L的IPTG在37℃条件下,诱导Bad蛋白2 h,可以获得最大量的可溶性Bad重组蛋白;0.02%的阿拉伯糖在37℃条件下,诱导Pim-1、Pim-2、Pim-3蛋白3 h,可以获得最大量的Pim重组蛋白;ELISA结果显示,Pim激酶与Bad底物之间的作用存在剂量依赖性反应关系,进而成功建立药物筛选体系;初步筛选出低分子化合物T-18,在体外能有效抑制Pim激酶活性。结论:利用ELISA反应原理建立的筛选药物方法,是一种经济、简单、快速、高效、敏感的筛选手段,并初步筛选出小分子化合物T-18,能够抑制Pim激酶活性,阻断Pim对凋亡蛋白分子Bad的磷酸化过程,进而抑制肿瘤的发生。

异常高表达TCTP通过上调Bcl-xL抑制胰腺癌细胞的细胞凋亡

背景与目的:胰腺癌是一种常见的恶性肿瘤,病死率高,5年生存率<5%,目前尚无很好的治疗方法。翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一个生长相关的蛋白质,有促进肿瘤生长,抗细胞凋亡的作用,目前有研究显示TCTP在肝癌、结直肠癌中异常高表达,但其在胰腺癌中的相关研究报道较少。本研究通过对TCTP在胰腺癌细胞中的表达及其生物学作用机制分析,致力于寻找新的肿瘤分子靶点,为胰腺癌的靶向治疗提供依据。方法:采用免疫组织化学方法检测胰腺癌组织中TCTP表达情况;RT-PCR检测胰腺癌细胞株中TCTP的mRNA表达,Western blot方法检测胰腺癌细胞株中TCTP和Bcl-xL蛋白表达水平;免疫荧光染色方法检测TCTP在胰腺癌细胞中的定位;小分子RNA干扰技术沉默胰腺癌细胞中TCTP表达后,利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞仪检测胰腺癌细胞的细胞周期和细胞凋亡等生物学指标。结果:与正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中TCTP异常高表达,并且主要位于胰腺癌细胞的细胞质中;不同胰腺癌细胞株中TCTP也呈高表达;siRNA沉默胰腺癌细胞中的TCTP,显著抑制细胞的增殖速度和细胞周期进程,促进细胞的凋亡;在胰腺癌细胞中Bcl-xL表达与TCTP表达呈正相关,沉默TCTP可以下调Bcl-xL的蛋白表达。结论:异常高表达TCTP,通过上调Bcl-xL抑制细胞凋亡,从而促进胰腺癌的发生和发展。

低表达miR-33a诱导胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药

背景与目的:胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤。由于其对一线化疗药物吉西他滨的耐受,往往导致预后较差。Micro RNA(mi RNA,mi R)是一类非编码小RNA,参与肿瘤的多种生物学功能。mi R-33a作为代谢相关的mi RNA被广泛研究,而与耐药之间关系的报道较少。该研究通过探讨mi R-33a参与胰腺癌吉西他滨耐药及其作用解析,为胰腺癌化疗提供新的理论依据。方法:采用原位杂交方法检测胰腺癌组织中mi R-33a的表达情况;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各胰腺癌细胞系中mi R-33a的表达情况。利用SW1990和Miapaca-2胰腺癌亲本细胞株,构建吉西他滨耐药细胞株(SW1990res,Miapaca-2res)及mi R-33a稳定表达细胞株(SW1990-mi R-33a,Miapaca-2-mi R-33a、SW1990res-mi R-33a和Miapaca-2res-mi R-33a);采用细胞毒性实验检测mi R-33a的表达对胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的影响。结果:mi R-33a在胰腺癌组织样本中普遍低表达。与HEK293T正常人胚肾细胞相比,其在各胰腺癌细胞系中均呈低表达。mi R-33a过表达可以增加胰腺癌细胞对吉西他滨的药物敏感性,能有效逆转胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药。结论:mi R-33a在胰腺癌组织中低表达,导致胰腺癌患者对吉西他滨获得性耐药。增加mi R-33a表达,从而增强了胰腺癌细胞对吉西他滨的药物敏感性,为开发新型胰腺癌分子靶向治疗药物,联合化疗提供新的理论依据。

肿瘤型膝关节假体置换术后近期再次手术的原因分析

[目的]分析肿瘤型膝关节假体置换术后近期再次手术的原因,评价不同原因对再手术的影响。[方法]回顾分析西京骨科医院骨与软组织肿瘤科2010年1月~2013年6月收治的167例肿瘤型膝关节假体置换术病历资料,其中男106例,女61例;年龄8~72岁,平均25.27岁。骨肿瘤部位：股骨下段95例,胫骨上段72例;骨肿瘤类型：骨肉瘤88例,骨巨细胞瘤67例,Ewing肉瘤6例,软骨肉瘤4例,恶性纤维组织细胞瘤2例。96例恶性肿瘤患者术后行至少一次化疗,化疗药物有顺铂、多柔比星、洛铂、异环磷酰胺、甲氨蝶呤等。假体类型：定制型新轴心式膝关节假体44例,定制型旋转铰链膝关节假体56例,可延长式股骨远端膝关节假体2例,组配式铰链膝关节假体65例。首次手术距再次手术时间4~55个月,平均35.6个月;首次手术时长80~275 min,平均178.58 min;首次手术术中失血量450~1 000 ml,平均681.67 ml;首次手术术后第1 d引流量90~270 ml,平均175.75 ml。[结果]167例病例中34例进行了再次手术,占20.36%。再次手术的原因有：术后假体周围感染14例,占8.38%;局部肿瘤复发9例,占5.39%;假体松动8例,占4.79%;假体断裂3例,占1.80%。72例胫骨近端病例中,既往手术中行腓肠肌肌瓣转移术的57例,术后发生假体周围感染2例,占3.51%;未行腓肠肌肌瓣转移术的15例,术后发生假体周围感染6例,占40.00%。34例行再次手术的病例中,定制型新轴心式膝关节假体10例,定制型旋转铰链膝关节假体14例,组配式铰链膝关节假体10例。通过x2检验,发现化疗病例和未化疗病例在感染发生率方面差异存在统计学意义（P=0.026）;行腓肠肌肌瓣转移术病例与未行该术病例在感染发生率方面差异存在统计学意义（P〈0.005）。通过t检验发现感染病例和非感染病例在既往手术时间、术中失血量及术后第1 d伤口引流量方面差异无统计学意义（P=0.457、P=0.339、P=0.385）。[结论]导致肿瘤型膝关节假体置换术后近期再次手术的主要原因是术后假体周围感染,而化疗的应用、软组织覆盖的缺失等与感染的发生有密切的关系。

雷公藤甲素对病毒性心肌炎细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的研究

目的:研究雷公藤甲素对柯萨奇病毒B3病毒(CVB3)感染的病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡和Fas/FasL蛋白表达的抑制作用,探讨TP治疗病毒性心肌炎的作用机制。方法:将Balb/c小鼠随机分成4组作为动物模型,分别为对照组、模型组、利巴韦林组和TP组。对照组腹腔注射生理盐水,其余三组腹腔注射CVB3,利巴韦林组和TP组小鼠分别予以相应的药物治疗后,测定各组小鼠存活率及心肌病变积分,采用末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测小鼠心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Fas/FasL蛋白阳性表达。结果:空白对照组心肌无病变,利巴韦林组、TP组与模型组相比有显著性差异(P<0.01)。正常组鲜见心肌细胞凋亡,模型组细胞凋亡率较正常组显著增加(P<0.01),治疗组利巴韦林组和TP组凋亡率比模型组明显降低(P<0.05,P<0.01)。模型组Fas/FasL表达比正常组显著增多(P<0.01),治疗组利巴韦林组和TP组较模型组显著降低(P<0.01)。结论:雷公藤甲素具有通过抑制Fas/FasL蛋白的表达,减缓心肌细胞凋亡,达到抑制病毒性心肌炎从而保护心肌细胞的作用。

分清类型治疗小儿感冒

四岁的壮壮这两天没来幼儿园，班主任何老师打电话给壮壮妈，一问才知道，原来孩子得了感冒。