用培养的大鼠血管内皮细胞建立血管紧张素转换酶体外模型初步研究

目的 :分离大鼠肺血管及腹主动脉的内皮细胞 ,建立研究血管紧张素转换酶 (ACE)表达的体外模型。 方法 :分离大鼠肺血管内皮细胞采用活体胶原酶灌注法、腹主动脉内皮细胞采用贴壁法 ;二种方法均用胰酶不完全消化和加入血清或无血清培养相结合的方法得到纯化的内皮细胞。 结果 :肺血管内皮细胞灌注法细胞传代至第 4代后其增生速度趋于稳定 ,内皮细胞纯度达到 95 %以上 ,冻存后细胞复苏率 (0 .816± 0 .0 85 )和贴壁率 (0 .75 8±0 .0 79)均较高、生长良好。腹主动脉内皮细胞贴壁法第 4代传代后细胞增生速度较慢 ,纯度为 78% ,冻存后传代细胞复苏率为 0 .72 4。 结论 :肺血管内皮细胞灌注法分离到的大鼠肺血管内皮细胞 ,纯度高 。

多药耐药相关蛋白基因在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的：检测多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因在乳腺癌组织中的表达水平，并和谷胱甘肽Ｓ－转移酶－ｐｉ（ＧＳＴ－π）的表达作相关性比较，探讨其在临床的应用价值。方法：用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术，检测了５５例乳腺癌组织中ＭＲＰ和其中４０例ＧＳＴ－πｍＲＮＡ的表达水平，并和术前化疗比较分析。结果：ＭＲＰ表达的阳性率为７６．４％，高表达占１８．２％，中低表达各占２３．６％和３４．５％。ＭＲＰ和ＧＳＴ－π有４０％的共表达率，虽然ＭＲＰ表达阳性率及水平和术前化疗关系不明显，但化疗后二者表达有正相关趋势。结论：ＭＲＰ在乳腺癌中普遍表达，以中低表达为主，其和ＧＳＴ－π的共表达可能和化疗药物诱导有关。

烫伤增强大鼠TNF-α基因表达对内毒素刺激的敏感性

目的 证实严重烫伤大鼠TNF α基因表达对内毒素 (LPS)刺激敏感性增强 ,阐明创伤机体无明显感染条件下血清TNF α升高的机理。方法 给予同剂量LPS体内注射 ,观察烫伤组 ,烫伤休克组及其正常对照组血清TNF α及肝脏TNF αmRNA的变化。结果 同剂量的LPS刺激后 ,正常对照组血清TNF α及肝脏TNF αmRNA升高不显著 ,而烫伤组 ,烫伤休克组血清TNF α及肝脏TNF αmRNA明显升高。结论 TNF α基因表达对LPS敏感性增强 ,导致创伤患者TNF α水平明显升高 ,提示防治创伤患者轻微感染在临床治疗休克。

大鼠肺血管内皮细胞培养及血管紧张素转换酶表达特点的初步研究

目的:分离大肺血管内皮细胞,建立研究ACE表达调控的体外模型。方法:分离大鼠肺血管内皮细胞采用活体胶原酶灌注法;用胰酶不完全消化和无血清培养相结合的方法得到纯化的内皮细胞;用定量PCR技术检测血管紧张素转换酶(ACE)mRNA水平的变化,速率法测定ACE酶活性。结果:传代细胞第四代后细胞增殖速度趋于稳定,内皮细胞纯度达到95%以上,ACE的活性及mRNA的表达也处于稳定期。表皮生长因子(EGF)可以使ACEmRNA表达受到抑制(P=0.025)。冻存后存代复苏率(0.816±0.085)和贴壁率(0.758±0.079)均较高,生长良好。结论:本法分离到的大鼠肺血管内皮细胞,纯度高,ACE活性及其mRNA表达水平在第四代后稳定。

GST-π和MDR1在乳腺癌中共表达水平及其临床意义

目的 :研究谷光苷肽S 转移酶 (GST π)和多药耐药基因 (MDR1)mRNA在乳腺癌组织中的表达水平 ,探讨其共表达机制及在临床的应用价值。方法 :复合定量RT PCR技术 ,检测 79例乳腺癌组织中耐药相关基因的表达水平 ,其中MDR179例 ,GST π 6 5例。观察DMR1和GST π的共表达率并与TNM分期、受体表达、是否术前化疗作相关分析。结果 :乳腺癌组织中MDR1和GST π阳性率分别为 96 2 %和 70 7% ,共表达率为78 5 % ,两者的表达水平明显相关。MDR1和肿瘤大小相关 ,而MDR1和GST π均与雌激素、孕激素受体表达及是否术前化疗无关。MDR1、GST π共表达和单独表达率与是否术前化疗无关 ,而MDR1表达水平化疗后增高 ,GST π表达水平无显著差异。结论 :MDR1、GST π共表达是乳腺癌耐药的特征之一 ,而MDR1可能发挥了主导作用。GST π和MDR1表达水平呈明显正相关 ,说明两者可能有互相调节机制。

全血细胞计数的(x|ˉ)-B分析及其靶值确定

(x)-B分析是BULL根据DORSEY的基本原理,把病人数据用于临床血液学室内质控的方法.全血细胞计数的xB分析则是库尔特公司把BULL法在血液分析仪(CBC)上的应用.本室用COULTER-JT-IR全血细胞计数仪按照BULL法,计算红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH),红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC),确定本室以上三项的x-B靶值.经过近一年的应用,基本达到了室内质控的目的.

TNF-α对严重烫伤小鼠骨骼肌摄取葡萄糖作用的研究

目的 证实TNF α导致创伤胰岛素抵抗的机制。方法 以 40只用 3 0 %TBSAⅢ度严重烫伤小鼠为模型 ,分烫伤对照组和TNF α单克隆抗体注射组 ,观察骨骼肌用和不用胰岛素刺激的葡萄糖摄取水平的改变。结果 烫伤对照组基础葡萄糖摄取明显升高 ,但胰岛素依赖的葡萄糖摄取明显降低 ,TNF α单克隆抗体注射治疗组基础葡萄糖摄取能力明显下降 ,但胰岛素刺激的葡萄糖摄取明显升高。结论 TNF α能促进骨骼肌基础葡萄糖摄取 ,但抑制胰岛素刺激的葡萄摄取。TNF

严重烧伤患者血浆TNFα与胰岛素抵抗指数、胰岛素分泌指数和乳酸含量相关性临床分析

目的:证实烧伤患者血浆TNFα与胰岛素抵抗相关性。方法:测定烧伤患者血浆TNFα、空腹血糖、空腹胰岛素、空腹乳酸含量,并计算稳态模式胰岛素抵抗指数和胰岛素指数。结果:烧伤患者血浆TNFα与胰岛素抵抗指数呈正相关,与乳酸含量呈正相关,与胰岛素分泌指数呈负相关。结论:烧伤患者血浆TNFα可作为判断胰岛素抵抗程度和胰岛素分泌功能的预警指标,TNFα在烧伤胰岛素抵抗和胰岛素障碍中,可能发挥重要作用。

肾衰患者透析前后血（THP）含量变化

本文采用放射免疫法测定了正常人，慢性肾衰(CRF)患者血清Tamm Horsfall糖蛋白(THP)的含量变化，发现正常人血THP含量显著高于CRF(P＜0．001)；重度CRF比轻、中度CRF明显降低(P<0．05)；31例CRF患者血透前、后血THP与SCR．BUN之间有显著差异。本文就CRF血THP含量改变与肾功能的关系进行了初步研究．

尿液镜检筛检与细菌培养结果比较观察

尿液检验是实验室最多的诊断项目，但阴性率甚高。目前国外一些实验室建立了自动系统，在数小时内作出结果判断，并可排除一些不必要的检查。但目前国内极大多数实验室还无法达到。为了能迅速获得正确结果，采用尿多形核细胞计数和Gram氏染色筛选，同时作细菌培养对1829例尿标本进行对比观察，发现镜检是迅速获得结果的有效方法。现报告如下。

复合定量PCR检测谷胱苷肽-S转移酶和多药耐药相关基因mRNA表达水平方法的建立及初步应用

用β－肌动蛋白（β－ａｃｔｉｎ）作内参照，设计不同扩增片段的谷胱苷肽－Ｓ转移酶（ＧＳＴ－π）和多药耐药基因（ＭＤＲ１）引物，建立同时定量检测ＧＳＴ－π和ＭＤＲ１ｍＲＮＡ表达水平的复合定量ＰＣＲ法。扩增条带光密度值用凝胶成像系统检测，基因相对表达水平用目的基因和β－ａｃｔｉｎ光密度比值计算。本法灵敏度高、重复性好，能作批量分析。室内Ｘ控制图可有效控制定量ＰＣＲ扩增和电泳质量，保证本法能检测出小于２倍的表达差异。在乳腺癌组织中ＧＳＴ－π和ＭＤＲ１ｍＲＮＡ中位数分别为０．２７和１．３２，且表达水平呈明显正相关（ｒ＝０．３２３，Ｐ＜０．０５）。

严重烫伤早期TNFα基因对内毒素刺激表达敏感性增强及TNFα对骨骼肌葡萄糖摄取作用的实验研究

目的 证实严重烫伤大鼠TNFα基因对内毒素(LPS)刺激表达敏感性较强,以及TNFα在创伤胰岛素抵抗中的作用机制。方法 给予同剂量LPS体内注射,观察严重烫伤和正常大鼠血清TNFα及肝脏TNFα-mRNA的变化,并用TNFα单克隆抗体(TNFα-McAb)静脉注射烫伤小鼠,观察骨骼肌基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取量的改变。结果 同剂量的LPS刺激后,正常对照组血清TNFα及肝脏TNFαmRNA升高不显著,而严重烫伤组血清TNFα及肝脏TNFαmRNA明显升高。严重烫伤组基础葡萄糖摄取明显升高,但胰岛素依赖的葡萄糖摄取明显降低,经TNFα-McAb静脉注射治疗后,基础葡萄糖摄取量明显下降,但胰岛素刺激的葡萄糖摄取明显升高。结论 严重烫伤早期TNFα基因对LPS刺激表达敏感性增强,致使TNFα水平明显升高。血清TNFα促进骨骼肌基础葡萄糖摄取和“葡萄糖循环”,抑制胰岛素刺激的葡萄糖摄取。TNFα在创伤胰岛素抵抗中发挥始动作用。

我想给你们飞翔的翅膀

校园的一角，梧桐树上的麻雀欢叫着在枝头盘旋。阿妍和张明华两位老师微笑着、注视着。她们希望每一个孩子都有一双像鸟儿一样的翅膀，能够展翅翱翔。做留守孩子的良师益友，做家长和孩子信息传递的桥梁；

创伤失血性休克患者血清一氧化氮水平变化及其临床意义研究

目的 :探讨创伤失血性休克患者一氧化氮 (NO)的代谢及在休克中的作用机制 ,为临床治疗提供理论依据。方法 :采用镉还原Griess重氮试剂法 ,检测 110例创伤失血患者血清NO水平 ,并与患者预后、动脉舒张压、收缩压及外周全血象进行相关分析。结果 :创伤失血性休克患者血清NO水平 (41 86± 9 83μmol/L)比正常对照组 (17 5± 6 2 4μmol/L)明显升高 (P<0 0 5 ) ,并与疾病的严重程度明显相关 (P <0 0 5 )。NO水平与外周血红蛋白含量 (r =-0 6 0 32 ,P <0 0 5 ) ,收缩压水平 (r =- 0 8731,P <0 0 1) ,舒张压水平 (r =- 0 76 45 ,P <0 0 1)呈负相关 ,与外周血中性粒细胞数量 (r =0 86 6 7,P <0 0 1)呈正相关 ,与外周血小板数量 (r =0 40 5 1,P >0 0 5 )相关不显著。结论 :NO在创伤失血性休克病理生理过程中发挥重要作用。血清NO水平变化可作为判断失血性休克患者预后转归的有效指标。