腺苷受体A_1与A_(2A)相互作用对小鼠大脑中动脉缺血/再灌注损伤区谷氨酸转运体GLT-1表达的影响

目的探讨在不同A1受体活性状态下,腺苷A2A受体缺失对脑缺血/再灌注区GLT-1D的影响,并探讨其产生的缺血性脑保护的可能机制。方法将腺苷A2A受体基因敲除小鼠(A2AR/KO)与野生型小鼠(A2AR/WT)制作成大脑中动脉缺血2 h/再灌注22 h模型,分别给予腺苷A1受体激动剂CPA及拮抗剂DPCPX,采用免疫组化、Western-blot方法检测缺血/再灌注区(纹状体区)谷氨酸转运体(GLT-1)的表达情况,同时观察对脑梗死体积和神经功能缺损程度的影响。结果缺血2h/再灌注22 h后,KO小鼠的神经功能缺损程度均明显轻于同样干预的WT小鼠(P<0.05),使用A1受体拮抗剂后,小鼠的神经缺损程度较非干预组明显加重,而使用A1受体激动剂后神经功能缺损程度较非干预组明显减轻;KO小鼠的梗死体积均明显小于同样干预的WT小鼠(P<0.01),A2AR-KO/A1拮抗剂组小鼠梗死体积较非干预小鼠明显增大,而A2AR-KO/A1激动剂组小鼠的梗死体积则明显缩小。在缺血/再灌注区,A1R激动剂CPA使小鼠的GLT-1表达明显高于非干预组,其中A2AR/KO小鼠的增加更为明显;而使用A1R拮抗剂DPCPX后,局部GLT-1的表达与非干预组相比无明显差异。结论初步证明A2AR缺失产生的神经保护作用与A1受体功能激活,进而促进缺血/再灌注区GLT-1的表达增加有关。抑制A2AR,同时激活A1R能加强缺血性脑保护作用。

姜黄素对神经干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达影响的离体研究

目的探讨姜黄素对神经干细胞内Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选择孕14.5 d的SD大鼠,取胚鼠大脑前端2/3部分组织,提取神经干细胞。培养并传代3次时,进行细胞免疫荧光学鉴定;同时换用只添加2%B27的Neurobasal培养基连续培养细胞,并设置空白对照组、IWR-1(Wnt信号通路特异性阻断剂10μmol/L)处理组、姜黄素500 nmol/L组、IWR-1+姜黄素500 nmol/L组(先添加IWR-1,20min后再加入姜黄素)、DMSO组。细胞培养3 d时,采用Western blot方法检测各组wnt3a、β-catenin蛋白表达水平变化,采用RT-PCR方法检测各组wnt3a、β-catenin的mRNA表达量变化。结果 Western blot结果显示:对培养第3代的细胞干预3 d后,姜黄素组wnt3a、β-catenin表达量较其他各组明显升高(P<0.05),IWR-1处理后其表达水平明显降低(P<0.05);姜黄素联合IWR-1处理细胞后wnt3a、β-catenin表达量明显减少(P<0.05);DMSO组表达量接近空白对照组。RT-PCR结果显示:与空白对照组比较,姜黄素组wnt3a及β-catenin基因表达水平明显上调(P<0.05),而IWR-1组wnt3a及β-catenin基因表达水平明显下降(P<0.05),总体变化趋势与Western blot结果一致。结论初步证明姜黄素可激活Wnt信号通路,由此推测姜黄素与经典的Wnt/β-catenin信号通路密切相关。

阻断腺苷A2a受体对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤区谷氨酸转运体GLT-1表达的影响

目的观察腺苷受体A2 a拮抗剂对大鼠MCAO模型纹状体中谷氨酸转运体GLT-1表达的影响,并探讨其对缺血性神经保护作用的机制。方法分别在雄性SD大鼠脑缺血2 h、缺血2 h再灌注22 h给予腺苷受体A2 a拮抗剂SCH-58261,采用RT-PCR、WB方法检测纹状体区GLT-1的表达,同时观察脑梗死体积和神经功能缺损情况。结果缺血2 h组的神经功能评分无明显差异;缺血2 h再灌注22 h干预组神经功能评分(1.67±0.52)与对照组(2.50±0.55)比较,有显著差异(P<0.05);缺血2 h干预组梗死体积(23.63±3.89),比对照组缩小了16%(P<0.05)。缺血2 h再灌注22 h干预组梗死体积(95.12±18.22),比对照组缩小了33%(P<0.01);给予SCH-58261后,MCAO大鼠在急性缺血期和缺血再灌注期纹状体中GLT-1表达均明显增高。结论初步证明阻断腺苷受体A2 a对脑缺血产生的保护作用与增强了GLT-1的功能有关。

神经内科住院医师规范化培训的实践和体会

住院医师规范化培训制度,是医学实践教育的进一步延伸,是医生提高临床实践能力的重要途径,更是保障医疗质量的有力举措。第三军医大学新桥医院神经内科做为首批临床住院医师规范化培训国家级基地,在住院医师规范化培训过程中积累了丰富的实践经验。本文就我科在住院医师规范化培训过程中的具体实践,从培训思路、规范带教、考评模式等方面,将创新性做法和体会做一总结。

内皮祖细胞移植对大鼠短暂性大脑中动脉栓塞的治疗作用

目的观察内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植在治疗大鼠短暂性大脑中动脉栓塞(transientmiddle cerebral artery occlusion,tMCAO)中的作用,探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在其中的可能作用机制。方法培养、鉴定大鼠骨髓来源EPCs,通过颈内动脉移植到大鼠tMCAO模型。实验动物分为2组:PBS对照组、EPCs移植组,分别观察第1、3、5、7天各项指标。采用HE染色,观察大鼠缺血部位病理变化,采用TUNEL法检测嗅周皮质神经元凋亡情况、免疫组化法检测Caspase-3蛋白表达情况、Western blot检测缺血局部脑组织VEGF表达。结果 EPCs移植后第5天,大鼠缺血嗅周皮质TUNEL阳性细胞数逐渐减少到最低值(54.68±3.12),Caspase-3蛋白表达也逐渐降低最低值(31.24±2.73),对应的局部脑组织VEGF表达则逐渐升高到最高值(0.99±0.03),EPCs移植组各时相点与PBS对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EPCs移植tMCAO大鼠可抑制神经元凋亡,减轻缺血导致的神经损伤,部分作用机制可能是通过旁分泌VEGF降低Caspase-3活性这一途径实现的。

超声造影时间-强度曲线联合CTA预测缺血性脑卒中复发的价值

目的探讨超声造影时间-强度曲线(TIC)联合CTA对缺血性脑卒中(IS)复发的预测价值。方法选取我院收治的95例IS患者,均行超声造影和CTA检查。根据随访1年的结果分为复发组44例和未复发组51例,比较两组始增时间、达峰时间(TTP)、曲线上升支斜率、峰值强度(PI)、峰值时间(MTT)、曲线下面积(AUCTC)及CTA所测血管狭窄程度。应用二元Logistic回归分析IS复发的危险因素,绘制ROC曲线分析TIC、CTA单独及联合应用预测IS复发的价值。结果复发组患者年龄≥65岁及合并高血压病的比例均高于未复发组(均P<0.05);未复发组血管狭窄程度明显优于复发组(P<0.05)。与未复发组比较,复发组TTP降低,PI、AUCTC均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,TTP短、CTA测得血管狭窄、AUCTC高是IS复发的独立危险因素(OR=3.324、1.149、1.018,均P<0.05).ROC曲线分析显示,TTP、PI、AUCTC、CTA检测血管狭窄率预测IS复发的曲线下面积分别为0.724、0.763、0.906、0.694,AUCTC与血管狭窄率联合应用预测IS复发的曲线下面积为0.951,与各参数单独应用比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论超声造影TIC联合CTA对IS复发具有较高的预测价值。

大脑中动脉水平段狭窄与基底节脑出血及脑梗死关系的临床研究

目的探讨大脑中动脉水平段(M1)狭窄与基底节脑出血和脑梗死的关系。方法选择2015年1~12月陆军军医大学第二附属医院神经内科收治的1123例脑血管疾病患者,经筛选最终纳入470例进行回顾性研究,依据头颅计算机断层扫描和颅脑核磁共振检查结果将其分为基底节脑出血组、急性脑梗死组、陈旧性脑梗死组和正常受试者组。依据计算机断层头颈部血管成像检查结果测量大脑中动脉狭窄程度。利用单因素相关分析模型和多因素Logistic回归模型筛选脑出血和脑梗死的危险因素,探讨大脑中动脉水平段(M1)狭窄和基底节脑出血及脑梗死的关系。结果M1狭窄增加了基底节脑出血的风险(P=0.001,OR=5.675),高血压(HP)增加了基底节脑出血的风险(P<0.001,OR=16.117),糖尿病(DM)减少了基底节脑出血的风险(P=0.001,OR=0.144),M1狭窄增加了急性和陈旧性脑梗死的风险,HP减少了急性和陈旧性脑梗死的风险,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论M1狭窄会增加基底节脑出血和脑梗死的风险,需积极予以治疗。

乙型肝炎病毒对颅内动脉狭窄影响的研究

目的探讨乙型肝炎病毒感染与颅内动脉狭窄的关系。方法回顾性纳入2014年1月-2016年12月在新桥医院神经内科住院的病例,共计3438例,经纳入标准及排除标准筛选后最终3072例受试者纳入统计分析;基于头颈部CTA检查表现,所有受试者分为4组:颅内动脉狭窄组、颅外动脉狭窄组、颅内及颅外动脉狭窄组和正常受试者组;基于乙型肝炎病毒核心抗体和表面抗原的检验,所有受试者的乙型肝炎病毒感染情况分为4种类型:核心抗体(+)/表面抗原(+);核心抗体(+)/表面抗原(-);核心抗体(-)/表面抗原(+);核心抗体(-)/表面抗原(-);二元Logistic回归模型筛选脑血管病的危险因素,纳入多项Logistic回归模型分析乙型肝炎病毒感染和颅内动脉狭窄的关系。结果多项Logistic回归分析发现乙型肝炎病毒核心抗体(+)/表面抗原(-)与颅内动脉狭窄显著相关(OR=1.462,P=0.004),而与颅外动脉狭窄、颅内动脉及颅外动脉狭窄无显著相关。乙型肝炎病毒核心抗体(+)/表面抗原(+)与颅内动脉狭窄、颅外动脉狭窄、颅内动脉及颅外动脉狭窄均无显著相关。结论乙型肝炎病毒感染与颅内动脉狭窄显著相关。