自制肝素亲和柱分离纯化载脂蛋白H及其抗体制备与鉴定

目的:自制肝素-琼脂糖6B亲和柱提纯人血清载脂蛋白H(apoH),免疫制备多克隆抗体,为大量制备与进一步研究做准备。方法:利用间接还原胺化法制备亲和层析柱,并优化反应条件。运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原,制备兔源多克隆抗体。结果:自制亲和柱肝素结合量约5mg/g(介质体积)。纯化的抗原经SDS-PAGE鉴定分子量约50kD,无杂带;16种氨基酸组成分析结果与报道一致。多克隆抗体与购置的国外抗体一样,在进行ELISA与dot-ELISA时与小牛血清白蛋白有交叉反应;但在变性且还原的条件下,Western blot结果显示无交叉反应。结论:自制亲和柱成本低、亲和性好、肝素结合稳定,用之分离纯化得到了高纯度apoH;兔多克隆抗体用于检测血清中载脂蛋白H含量时需进一步纯化。

用纳米磁珠吸附富集样本中结核分支杆菌

目的制备纳米磁珠用以吸附富集样本中结核分支杆菌(MTB),有效提高培养的阳性率和实验操作安全性。方法用化学共沉淀法制备表面包被PEG600或油酸的纳米Fe3O4颗粒,在基本密闭系统下培养MTB,观察比较两种磁珠在3种pH下吸附能力的差异;并对包被PEG600的纳米磁珠的吸附容量进行测定。结果自制的两种磁珠具备显著的MTB吸附能力,两种磁珠之间以及不同pH下无明显差异,但pH 5.3条件下油酸纳米磁珠富集的MTB菌落形成较小。自制PEG600纳米磁珠的吸附能力为每100μL 1～10μg MTB磁珠悬液。结论自制的纳米磁珠能有效地吸附MTB,以PEG600纳米磁珠为优,并能够有效避免环境污染。

β_2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物的研究进展

β2-糖蛋白Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白结合形成2β-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物,它在体内存在与否和高氧化应激状态、炎症有关。自身免疫性疾病以及一些伴有心血管病变的有慢性炎性反应的疾病患者血清β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物水平明显升高,自身免疫性疾病患者血清中还可检测到复合物自身抗体的存在。体外实验显示,β2-糖蛋白Ⅰ/氧化型低密度脂蛋白复合物与其自身抗体形成的免疫复合物,通过Fcγ受体途径被巨噬细胞摄取,这可能是导致氧化型低密度脂蛋白被巨噬细胞摄取的主要路径之一。

南京部队1560例中老年干部生化结果的规律

目的调查南京军区中老年干部生化指标随年龄增加变化的规律及异常检出率。方法研究对象为南京军区中老年干部,共计1 556例（男1 417例,女139例）,全自动生化仪检测生化指标。结果球蛋白（Glo）、葡萄糖（Glu）水平随年龄增长而增高;总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平随年龄增长而减低。每10年血Glu增高0.14 mmol/L,其中从49-69岁,每10年血Glu增高0.34 mmol/L;男性尿素（Urea）、肌酐（Cr）随年龄增长而增高,Urea每10年上升0.244 mmol/L,Cr每10年上升2.78μmol/L,总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）随年龄增长而减低;女性50岁以后TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、非高密度脂蛋白胆固醇（Non-HDL-C）水平明显升高。Cr异常增高率最低,另有3.4%的人为低血糖。本人群所有指标均呈偏态分布,除Cr外所有指标的95%百分区间均大于目前国内参考范围。结论由于不同人群生化参考值存在年龄和地区性等差异,因此在临床应用时,实验室针对不同年龄和地区人群设立不同参考值更为适用。

纳米磁珠富集处理临床标本在分枝杆菌培养中的初步应用

目的以罗氏培养基作为培养检测介质,验证采用PEG600纳米磁珠富集临床标本中分枝杆菌的可行性。方法采用PEG600纳米磁珠富集法、离心法(3000×g,20 min)和直接接种法3种方式处理94份临床标本(来源于南京市胸科医院2012年12月至2013年3月间门诊和病房的94例肺结核患者),在固体罗氏培养基上进行培养。比较3种方法的培养阳性率、污染率以及平均初生长时间。对于计数资料采用卡方检验进行统计分析,以Kolmogorov-Smirnov法检测正态性,非正态分布的计量资料采用Wilcoxon秩和检验进行分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果直接接种法、离心法、磁珠富集法的阳性率分别为29.79%(28/94)、43.62%(41/94)、41.49%(39/94);污染率分别为2.91%(3/103)、4.85%(5/103)、3.88%(4/103);平均初生长时间[中位数(上下四分位数)]分别为28(21,40)、21(21,35)、21(21,35)d。磁珠富集法、离心法阳性率均高于直接接种法,差异均有统计学意义(χ2值分别为9.09、11.08,P值均<0.01)。磁珠富集法、离心法的初生长时间均短于直接接种法,差异均有统计学意义(Z值分别为-3.983、-3.980,P值均<0.01)。离心法与磁珠富集法之间在阳性率与平均初生长时间上差异均无统计学意义(阳性率比较:χ2=0.25,P=0.62;平均初生长时间比较:Z=-0.557,P=0.577)。结论磁珠富集法在培养的阳性率与初生长时间上均优于直接接种法,与离心法所得结果相似;由于其对环境的污染概率小,易于批量处理,具备很好的临床应用前景。

N,N-二甲基-1,2,3-三噻烷-5-胺草酸盐经大鼠肝微粒体的代谢

以大鼠肝微粒体为代谢模型,对沙蚕毒素类杀虫剂-易卫杀(N N-二甲基-1,2,3-三噻烷-5-胺草酸盐)进行了体外代谢观察,结果表明易卫杀经大鼠肝微粒体的代谢速率较快,其主要代谢产物有N,N-二甲基-1,2-二硫环戊烷-4胺(a,沙蚕毒素);N,N-二甲基-1,3双(甲亚磺酰基)-2-丙胺(b);N-甲基-1,2-二硫环戊烷-4-胺(c);硫磺聚合物(d)及甲基氨基丙烷(f),可能的代谢途径为:易卫杀脱掉一个硫原子变成沙蚕毒素;沙蚕毒素脱甲基生成脱甲基产物;沙蚕毒素甲基化后进一步生成N,N-二甲基-1,3-双(甲亚磺酰基)-2-丙胺。

沙蚕毒素类杀虫剂的毒性及代谢

1934年,日本医生Nitta从一种海生环节动物—异足索沙蚕(Lumbriconereis hetero-poda.Marenz)体内成功地分离出了沙蚕毒素(Nereistoxin,NT)。1962年,Hagiwara等在Nitta的基础上首次人工合成了NT。之后,日本。

ELISA法检测IgA肾病患者血清β_2-GPI/LDL复合物

目的建立人血清β2-糖蛋白Ⅰ/低密度脂蛋白(β2-GPI/LDL)复合物ELISA检测法,探讨其对IgA肾病的诊断价值。方法建立以抗人β2-GPI抗体为包被抗体、酶标记抗apoB为检测抗体的β2-GPI/LDL ELISA检测法,对50例IgA肾病患者和50例健康对照者检测分析。结果建立的β2-GPI/LDL ELISA检测法灵敏度0.25 U/m l,批内、批间变异系数为5.73%和10.67%,参考范围(0.66±0.17)U/m l。IgA肾病组β2-GPI/LDL水平显著高于对照组[(1.27±0.23)U/m l vs(0.66±0.17)U/m l,P<0.0001]。敏感性86%,特异性为100%。结论β2-GPI/LDL以健康对照组x-+2s即1.0 U/m l为cut off值,对IgA肾病有较高的敏感性与特异性,提示其有潜在的临床诊断价值。

检测血清β_2-GPI/ox-LDL复合物对系统性红斑狼疮的临床诊断价值

目的:低密度脂蛋白(LDL)的氧化修饰在自身免疫疾病早发动脉粥样硬化过程中起重要作用。国外研究发现,在循环血和动脉斑块中氧化LDL(ox-LDL)能与抗心磷脂抗体的主要自身抗体β2-糖蛋白I(β2-GPI)结合成稳定的复合物。文中通过检测中国SLE患者血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平,进一步探讨该复合物的临床诊断价值。方法:用ELISA法对47例系统性红斑狼疮(SLE)患者(SLE组)和42例健康对照者(对照组)检测比较。结果:SLE患者β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(1.05±0.14)U/mlvs(0.79±0.11)U/ml,P<0.0001]。若以1 U/ml为临界值,SLE组中28例高于临界值(敏感性59.6%),对照组中仅4例异常(特异性90.5%)。2组β2-GPI/ox-LDL水平均与apoB和LDL呈显著正相关。结论:β2-GPI/ox-LDL对SLE有较高的敏感性与特异性,提示其潜在的临床诊断价值。

2011-2013年南京市胸科医院非结核分枝杆菌感染状况及耐药分析

非结核分枝杆菌（non-tuberculous mycobacteria,NTM）是指除结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌等结核分枝杆菌复合群及麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌总称.NTM属于机会致病菌,在自然界广泛存在,仅少部分NTM对人体致病,可侵犯肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组织和器官,并可引起全身播散性疾病[1-2].

南京地区结核分枝杆菌耐药性调查

目的摸清南京地区常用抗结核药物的耐药情况,为结核病防治提供科学依据。方法对2008年7月—2011年7月期间收集的临床分枝杆菌菌株,采用绝对浓度法检测对抗结核药物的敏感性。结果从临床标本中共分离出抗酸分枝杆菌3 251株,其中结核复合群3 119株,占96.0%;非结核分枝杆菌132株,占4.0%。所有抗酸分枝杆菌对9种抗结核药的耐药率为:RIF(36.51%)、INH(45.19%)、SM(27.78%)、EB(12.58%)、DIP(10.49%)、LVX(16.70%)、PAS(6.61%)、AMK(7.69%)、CPM(5.44%)。结核复合群中耐多药结核菌(MDR-TB)占28.70%;广泛耐多药结核菌(XDR-TB)占4.55%。结论南京地区结核杆菌的总体耐药趋势得到了一定程度的控制,但XDR-TB比率较高,应加强重点监测。

血清β_2-糖蛋白Ⅰ-脂蛋白(a)复合物水平的测定及其对IgA肾病的诊断价值

目的建立检测人血清β2-糖蛋白I-脂蛋白(a)复合物的酶联免疫吸附法,探讨该复合物存在于人血循环中的可能性,并通过对IgA肾病患者的检测分析该复合物的临床诊断价值。方法以抗人β2-糖蛋白I抗体为包被抗体、酶标记抗载脂蛋白(a)为检测抗体建立双抗体夹心酶联免疫吸附法,对50例IgA肾病患者和50例健康对照者进行检测分析。结果建立的β2-糖蛋白I-脂蛋白(a)检测法批内、批间变异系数为6.61%和13.02%,在0.33～1.83ku/L范围内呈线性。IgA肾病患者β2-糖蛋白I-脂蛋白(a)水平显著高于健康对照者(1.45±0.57ku/L比0.42±0.29ku/L,P<0.01),检测敏感性为80%,特异性为96%。结论β2-糖蛋白I与脂蛋白(a)能以复合物的形式存在于人血循环中,该复合物在IgA肾病患者血清中的水平明显增高,提示其潜在的临床诊断价值。

南京地区近年耐药结核病情况分析

目的通过统计分析我院检验科近十余年来结核菌培养的药敏试验结果,了解本地区结核菌耐药的现状和变化趋势。方法 2002年1月～2014年12月间,经改良罗氏培养阳性的标本共计12515份,采用SPSS17.0软件对药物敏感试验结果进行整理、归纳和统计学分析。结果大多数常用药物的年耐药发生率在一定范围内波动,异烟肼耐药有下降趋势,耐多药的发生率在下降,而左氧氟沙星耐药率在明显上升,从最初10.93%上升至至24.36%,而且单耐左氧氟沙星的病例数也在增多。结论随着国家对结核病管理的加强和规范,结核病的耐药情况有所改善,但仍应加强对抗结核药物使用的管理,减少耐药的发生。

^(35)S-多噻烷的毒物动力学

多噻烷化学名7-二甲胺基—1,2,3,4,5—五硫环辛烷草酸盐,为我国贵州省化工研究所新近合成的沙蚕毒硫杂环化合物,系沙蚕毒系新农药,其杀虫效力较好,特别对棉田害虫有一定防治效果[1],其毒性作用已有报道[2],但对其在体内动力学尚未见报导。本文简要报告35S-多噻烷在大鼠和小鼠的毒物动力学研究。

LS-Ⅰ型pH计测定乳汁中胆碱脂酶抑制物方法初探

本文用LS—I型合金膜酸度计测定乳汁中胆碱脂酶活性抑制物。此方法操作简便,灵敏度高,稳定性、选择性均较好,适用于人体材料和环境中有机磷农药的测定。

歌唱中高音唱法的一点感悟

在音乐领域中，声乐这个专业是问题最多的，不光是因为各声乐流派对歌曲风格、音色、咬字吐词及共鸣的要求和训练方法的不同，更重要的是声乐的发声器官属于我们身体的一部分，它的形状和构造看不见、摸不着，对于它的运用和操作，只能靠一种抽象的理解和想像，甚至只能意会不可言传。鉴于此，常常使得许多初学声乐的人被这样那样的问题所困扰、迷惑：有时象飞上云端，感觉极好：有时又象跌进深渊，找不着感觉。因而不能象学习其他乐器的人那样得到同样正常稳定的进度。其实，歌唱与乐器发声一样．只要了解其发声原理，在心理上有所准备，这些问题必将迎刃而解。

沙蚕毒类杀虫剂多噻烷代谢过程的研究Ⅱ.——多噻烷分子结构的测定

多噻烷是沙蚕毒类仿生农药的一个新品种,本文以质谱为主,参考红外、核磁等波谱数据对其分子结构进行推定,为准确地进行代谢过程的研究打下了基础。

T-SPOT.TB,TB-Ab和TB-DNA在肺结核与非结核分枝杆菌肺病鉴别诊断中的价值研究

目的探讨结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB),结核抗体(TB-Ab)和结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TB-DNA)在肺结核与非结核分枝杆菌肺病鉴别诊断中的价值。方法回顾南京市胸科医院2013年3月~2017年4月收治的肺结核病人140例,非结核分枝杆菌肺病患者39例。两组患者均抽血做T-SPOT.TB,TB-Ab(胶体金法和蛋白芯片法)检测,培养阳性的标本同时做TB-DNA检测。统计四种方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、假阳性率、假阴性率、阴性似然比、阳性似然比、诊断符合率和约登指数。结果 T-SPOT.TB敏感度、诊断符合率显著高于TBAb和TB-DNA(χ~2=6.91~87.46,P<0.01)。T-SPOT.TB特异度显著高于TB-Ab(χ~2=13.18~24.98,P<0.01),而与TB-DNA差异无统计学意义(Fisher’s Exact Test,P=0.62>0.05)。结论 T-SPOT.TB检测在肺结核与非结核分枝杆菌肺病鉴别诊断中有很高的敏感度、特异度和诊断符合率,对两种疾病的鉴别诊断有很大价值。

依托高校资源 创建省级文明城市——以衡水市为例

现阶段,衡水市创建省级文明城市的工作正在火热进行,衡水学院作为衡水市唯一的地方普通高校,应该发挥自身的优势,起到模范带头作用。

阴/阳离子化羟乙基纤维素十二烷基缩水甘油醚的制备与应用

介绍一锅法合成一种羧基化的羟乙基纤维素(HEC)十二烷基缩水甘油醚(CHECGE)和一种季铵化的HEC十二烷基缩水甘油醚(QAHECGE)。利用红外光谱(FT-IR)和核磁共振氢谱(1 H-NMR)对产物进行结构表征及平均取代度(DS)的测定。产物的流变性能表征结果表明,CHECGE具有比HEC更强的凝胶行为,在稳态剪切下的表观黏度较HEC有所提高。虽然QAHECGE的凝胶行为和表观黏度小于HEC,但假塑性明显较HEC有所提高。以所得产物及其复合物将橄榄油(20%)在水相中进行乳化,结果显示分别在CHECGE、QAHECGE和CHECGE/QAHECGE(质量比为1∶3)复合物体系乳化下,均能制备出稳定的乳液(超过15d放置)。因此所得产物可以作为一种新型的大分子乳化剂。