SPHK1靶向NF-κB信号通路调控胃癌细胞的迁移与侵袭

目的探讨鞘氨醇激酶-1(SPHK1)在胃癌(GC)组织中的表达及其靶向核因子-κB(NF-κB)调控GC细胞迁移和侵袭能力的分子机制。方法基于TIMER2.0、GEPIA与HPA数据库分析SPHK1在GC组织中的表达。使用Kaplan-Meier Plotter数据库预测SPHK1与GC患者预后的关联。利用IHC检测GC及癌旁组织中SPHK1和MKI67的表达并分析两者相关性。运用Western blotting与qRT-PCR检测GC各细胞系中SPHK1蛋白及mRNA水平。基因富集通路数据库检索SPHK1对GC进展的生物学功能。使用慢病毒敲低HGC-27/过表达MGC-803细胞中SPHK1的表达;采用细胞划痕实验探究SPHK1对GC细胞迁移能力的影响;Transwell实验探究SPHK1对GC细胞迁移和侵袭能力的作用;通过Western blotting检测各蛋白表达情况。体内成瘤实验中,将裸鼠随机分为shNC组、shSPHK1组、oeNC组与oeSPHK1组,利用稳转株验证SPHK1的促癌作用。结果生物信息学表明SPHK1在GC组织中显著高表达(P<0.001);同时高表达的SPHK1预示着较差的总生存期(P<0.001)和进展后总生存期(P<0.001)以及更差的无复发生存期(P<0.001)。IHC结果表明GC组织中SPHK1与MKI67表达明显上调(P<0.001)且呈正相关(P<0.001)。基因富集通路数据库提示,SPHK1参与GC中的细胞黏附、迁移及血管生成等,且NF-κB参与GC进展(P<0.05)。细胞实验数据显示,抑制SPHK1减弱GC细胞的迁移和侵袭能力,而过表达SPHK1会产生相反的结果(P<0.01);SPHK1正向调节磷酸化P65(p-P65)、血管内皮生长因子(VEGFA)和白细胞介素(IL-17)蛋白表达(P<0.05);利用PDTC阻断NF-κB信号通路可削弱SPHK1促进的GC细胞迁移与侵袭能力以及各蛋白表达水平(P<0.01);动物实验表明,与NC组相比,shSPHK1组肿瘤大小和质量明显减小,而oeSPHK1组显著增加(P<0.001)。结论SPHK1可靶向NF-κB信号通路表达进而调控GC细胞的迁移与侵袭,提示SPHK1可能是GC进展的潜在诊断分子标志物。

FTY720诱导胃癌细胞发生自噬及抗癌机制的研究

目的 揭示戈芬莫德(FTY720)诱导胃癌细胞发生自噬及抗癌机制的研究。方法 首先,利用STITCH数据库分析FTY720与肿瘤生长因子MKI67之间的关联;其次,利用CCK-8、细胞铺板实验检测FTY720对胃癌细胞增殖的影响;Western blot与qRT-PCR检测FTY720对细胞自噬的作用;使用自噬抑制剂(HCQ),并采用CCK-8、细胞划痕、Transwell小室与细胞凋亡实验探究FTY720对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡能力的作用。最后,使用Western blot检测FTY720对S1PR1/PI3K信号通路的影响。结果 基于STITCH数据库,FTY720可能存在调节肿瘤生长因子MKI67的表达。体外细胞实验显示,FTY720抑制胃癌细胞增殖,呈剂量时间依赖性。Western blot与qRT-PCR结果显示,FTY720诱导自噬发生。CCK-8、细胞划痕、Transwell小室与细胞凋亡实验结果表明,与FTY720组相比,使用HCQ后,Control与FTY720+HCQ组的细胞增殖、迁移、侵袭能力得到明显改善,而细胞凋亡能力减弱。Western blot结果表明,FTY720减少S1PR1/PI3K信号通路蛋白量。结论 FTY720诱导胃癌细胞发生自噬并抑制其增殖、迁移与侵袭以及促进凋亡能力,提示FTY720具有独特抗癌效应。

前交叉韧带的临床解剖研究

目的结合MRI对前交叉韧带(ACL)有关数据进行测量,为临床上ACL相关手术提供数据支持。方法选取9具甲醛固定的无膝关节损伤的正常成人标本(左右两侧膝关节共18例)及15例膝关节MRI体检者的影像资料(影像结果均显示ACL正常),分别对其ACL宽度、长度,股骨止点到股骨外侧髁后缘的距离,胫骨止点到胫骨平台内侧水平距离,胫骨止点到胫骨平台外侧水平距离进行测量。结果MRI测量的ACL长度、宽度,股骨止点到股骨外侧髁后缘的距离,胫骨止点到胫骨平台内侧水平距离,胫骨止点到胫骨平台外侧水平距离均短于标本测量的相应数据,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论MRI测量ACL所得的数据普遍小于实际测量数据,仅可以作为临床操作参考,仍然需要寻找规范化、精确化的测量方法。